protocol microbiologie №5

Determinarea sensibilității la antibiotice

1. Determinarea purității culturilor izolate.

Puritatea culturii indică uniformitatea creșterii și prezența microorganismelor în prepararea de un fel. Prin urmare, atunci când creșterea studiului macroscopic, nota intensitatea (, moderată, abundentă firave), transparență, culoare să acorde o atenție la omogenitatea. Se prepară droguri fix buclă ating de jos, de mijloc și de sus a glafuri, culoarea și Gram promikroskopiruem.

Egal însămânțarea cultura pură în studiu privind „numărul pestriță“: mediu de semi Hiss cu indicator BP, glucide (glucoză, lactoză, manitol) și BCH.

Peres a efectua semi-mediu ac bacteriologic sau rezervor. diametrul buclei de 1 mm grosime agar stab, înainte de a ajunge în partea de jos a tubului 1 mm. Prin subcultivarea în buclă medii lichide cu cultură de biomasă studiată a fost scufundat în lichid pentru a freca peretele tubului și se spală off. După aceea, între peretele tubului și a pus dop hârtiile indicator pentru determinarea hidrogenului sulfurat și indol, prevenind umezire tuburi muchii și mediu nutritiv tub

Baza pentru studiul proprietăților biochimice ale microorganismelor în scopul identificării este de a determina și (sau) finali produse intermediare ale metabolismului. importanta taxonomică sunt bacterii saccarolitic și proprietăți proteolitice, care determină la medii diferențiale de diagnostic incluse în „numărul de pestriț“.

Proprietățile saccarolitic Determinarea efectuate asupra mediilor sâsâitură. Lor compoziție: apă peptonată, 1% Indicatorul Andred carbohidrat (BP sau altele asemenea.) 0.3-0.5% agar, în cazul în care mediul este semi-solid; În cazul în care mediul lichid, flotoarele imersate pentru tuburi (tub de sticlă scurte, închise la un capăt).

Definiții proprietăți proteolitice este produsă pe apă peptonată (MF) sau bulion de carne-peptonă (BCH), avand in vedere formarea produselor finale ale metabolismului proteinelor (peptone, aminoacizi) - indol, iar în unele cazuri de amoniac.

Formarea indolului este însoțită de colorarea culorii roz a hârtiei indicator impregnat cu o soluție de acid oxalic (metoda Morel); formarea hidrogenului sulfurat - Înnegrirea hârtiei indicator impregnat cu acetat de plumb; formarea de amoniac - hârtie de turnesol albăstreală.

Studiul 3.Posev culturii într-o coloană de agar semilichidă.

Inoculează studiul culturii într-o coloană de semilichide agar stab de un tanc. ac sau rezervor. bucla 1 mm în diametru.

Semănatul cultura într-o coloană de agar semilichid pentru a determina relația sa cu oxigen molecular, și astfel, indirect, pentru a forma o idee despre cum se obține energie.

Determinarea culturii de studiu antibiotikogrammy

Pentru determinarea antibiograma pregăti o cultură în suspensie în studiu în soluție salină sterilă, și adus la o McFarland turbiditate de 0,5. Pentru inoculare cu ajutorul unui tampon de vată sterilă, care înmoaie în tub cu suspensia, rotind-o astfel încât acesta să fie udat în mod uniform, iar apoi stoarceți uscat pe peretele tubului deasupra nivelului lichidului de Curling. Însămânțarea vas de cultură cu AGV medie efectua lovituri în trei direcții, la un unghi de 60 °, de fiecare dată când se rotește paharul în jurul axei sale. În cele din urmă, să facă o rotație câteva mișcări tampon de-a lungul marginilor suprafeței de agar. Apoi lăsați culturile să se usuce timp de câteva minute, la temperatura camerei t ° în cești cu capace închise. Discuri cu antibiotice se aplică nu mai târziu de 15 minute după inoculare cu forceps steril, sau printr-o distanță Dozatoare automat de pe disc la marginea paharului și între discurile ar trebui să fie de 15-20 mm. Astfel, una de 100 mm antena este plasat nu mai mult de 6 discuri. Fiecare disc trebuie apăsat ușor cu ajutorul unei pensete pentru a se asigura contactul cu mediul nutritiv. Cupe imediat după amestecare discuri semn și pus cu capul în jos într-un incubator la 37 ° C timp de 18-20 ore.

1. Determinarea purității culturilor izolate.

Verificați dacă tuburile cu agar înclinat, se constată o creștere uniformă în intensitate - ușoară culoare, translucid.

Made medicament fix (Gram coloraŃiei). În microscopia specimen a relevat bețișoare gram de culoare roșie.

Perfect semănat studiu cultură net "număr pestriță": mediu semi Hiss cu indicator BP, glucide (glucoză, lactoză, manitol) și BCH. cercetare continuă

Studiul 3.Posev culturii într-o coloană de agar semilichidă.

Inoculează studiul culturii într-o coloană de semilichide agar stab. cercetare continuă

4. Determinarea culturii antibiotikogrammy în studiu.

Încheiat metoda disc de difuzie. Cercetarea continuă.

Am stabilit puritatea culturii izolate - bețișoarele gram de albastru.

Determinarea proprietăților biochimice și a sensibilității la antibiotice - cercetare continuă.