O metodă de diagnostic de otrăvire cu metale grele

ARDAVICHENE Tatyana

A61B10 - Alte metode și instrumente pentru diagnosticarea unor astfel de instrumente pentru luarea de probe de celule, biopsie pentru diagnostic prin imunizare (vaccinare pentru profilaxia sau terapia A61B 17/20); determinarea sexului copilului în perioada embrionară; determinarea ovulatiei (Tabelul G06C 3/00 ciclu menstrual); dispozitive de examinare a laringelui

Republicile (61) În plus față de autori. SVID-count (22) A raportat 030278 (21) 2576496 / 28-13 (51) M. Cl.

O aplicație 61 M 10/00 aderare

Ardavichene T. A. (71) Solicitantul

Irkutsk Institutul Medical de Stat (54) O metodă pentru diagnosticarea OTRĂVIRE

Invenția se referă la medicină. și anume Metodele relative de diagnosticare. un mod sistematic a corpului.

Cunoscut in metodele de practica medicala de diagnostic de otrăvire cu metale grele, cum ar fi taliu, plumb etc. Prin determinarea concentrației de hemoglobină din sânge, numărul eritrocitelor, reticulocitelor, eritrocite de acid -aminolevulinic basophilic-găurite si in urina € „porfirie concentrație, noi și g.

Este cunoscută o metodă de diagnostic de otrăvire cu metale grele prin identificarea acizilor nucleici din eritro 15 tsitah. Esența acestei metode constă în aceea că 0,1-0,2 ml de sânge este transferat într-o centrifugă răcită. tuburi conținând citrat de sodiu răcită, agitată și centrifugat 20

6 min, la 15.000 rot / min. Eritrocitele au fost spălate de două ori cu acetat de sodiu și la acesta se adaugă o cantitate de 30 ori mai mare de dietil eter. După agitare și decantarea eterul la 25 resturi de

amestec ku se adaugă eter dietilic, etanol și acetonă într-un raport de

30: 1: 1, care, după amestecare, este îndepărtat de la pompa de apă cu jet de aer. Cured 30 solvenți organici CAL extras nucleotide eșantion Lh-tratarea unei soluții saline de acid tricloracetic.

Extractul a fost separat prin centrifugare, se spală de trei ori cu eter rece ca gheața și C 9 este aplicată benzilor pornind de hârtie până la aproximativ 0,1 ml.

După uscare, benzile de hârtie acoperită cu aceste probe transportate. DYT ohlazhdeyiya condiții de electroforeză la o tensiune de 850-950 V la 2.5 O intensitate a curentului, potențial picătură

30 V / cm și un pH de 3,9, timp de 2 h. Eluarea se realizează 0 0,5 ml 1N. soluție de acid clorhidric la 260 nm Spektrofotometriruyut $ 1j.

Cu toate acestea, folosind metode cunoscute de diagnostic de otrăvire cu metale grele, este imposibil să se stabilească semnele inițiale sau timpurii de intoxicație. Prin metode cunoscute de diagnostic relevă prezența intoxicației când sistemul sanguin dezvoltat încălcări semnificative conduc la stimularea măduvei osoase eritroide. În sângele periferic există o cantitate mare de regenerare, kletokretikulotsitov, găsit forme degenerative ale celulelor roșii din sânge â € „bazofil745506 nopunktirovannye eritrocite. Sinteza hem Perturbat, evidențiată prin creșterea concentrației de acid L -aminolevulinic, și n, p aspect străin în urină.

Scopul invenției este de a asigura diagnosticarea precoce a otrăvirii cu metale grele.

Scopul este atins

Am stabilit că dazoksiribonukleinov b) de acid și conținutul său în ng 20,689,7 milioane. Hematiilor diagnostica otrăvirea.

Metoda este următoarea .obrazom.

La determinarea semnelor precoce de intoxicație posleduemoy sângelui 15 prin purificare și centrifugare îndepărtate celule nucleate și plasmă și RBC din acidul rămas vschelyayut dezoxiribonucleic (ADN) și cantitatea sa u Su DYT de otrăvire cu metale grele, ca și în sângele eritrocitelor sănătoase acidul dezoxiribonucleic uman este absent. Acest acid apare în sinteza eritrocitare dacă este necesar orice substanță capabilă să crească organismului sporotivlyaemost acțiune metale toxice. Deci, în cazul în care dezoksiri de conținut. Acid bonukleinovoy 20,6-89,7 ng per milion. eritrocit diagnostica otrăvire.

Exemplu. Pentru a determina primele semne de otrăvire cu metale grele din eritrocitele unui subiect vschelyayut de acid dezoxiribonucleic (ADN) prin spectrofotometrie dual-lungime de undă.

Procesul de cuantificare a acidului dezoxiribonucleic (ADN), în eritrocite este împărțit în trei etape principale.

Se determină un număr total de eritrocit masei de acid nucleic (C nn), adică concentrare

Apoi, hârtia clorhidric filtroval- doilea disc a fost adăugat 2 ml dintr-un amestec

40 1.2 n. Soluție de acid percloric

0,05 M clorură de magneziu și prin

20-30 min se filtrează. astfel, evidențiind doar o dată acid ribonucleic (RNC).

45 se măsoară pe un filtrat din punct de vedere cuvetă densitate spectrofotometru Orr, cele de 1 cm, la o lungime de undă de 270 nm și

290 nm și calculul concentrației efectuate acizi ribonucleic (C "" „) formula

C rr, unde C QY -C ®vЂ "

Se determină concentrația în masă eritrocitară ribonucleic kis (Srsch,).

Din diferența dintre suma concentrației de acid nucleic (C nc) și concentrația de acid ribonucleic (ARN) (She-SpW = Sdn) este evaluată pe concentrația de acid dezoxiribonucleic (VOS „) în eritrocite.

Sânge luat dintr-o venă în flacoane din plastic răcite conținând

3,8- soluție a fost citrat de sodiu.

Se centrifughează la 1500 rot / min, plasmă, leucocite și trombocite au fost îndepărtate și spălate încă o dată cu citrat de sodiu 3,8%.

Apoi, cantitatea de eritrocite spălate în melazherah numărate în milioane per micrometri. Apoi 0,09-0,11 masa ml eritrocit se aplică la cele două discuri de hârtie de filtru și fixate în 10-15 ml de 0,2N. soluție de acid percloric cu clorură de magneziu 0,05 M, în acele „chenie 10-15 min, la 4-5 ° C Amestecul a fost decantat și procedeul se repetă.

După aceea, ambele probe turnat în acetonă, într-o cantitate de 10-15 ml, se încălzește la fierbere, acetona decantează și procedeul se repetă din nou. După ce a fuzionat acetonă, se adaugă la eritrocite 10-15 ml de amestec de etanol și dietil eter în raport de 3: 1, a fost încălzit la fierbere, amestecul se decanteaza. Procesul se repetă.

Fiecare disc de hârtie de filtru care conține proba de celule roșii se adaugă la 4 ml de 0,3N. soluție de hidroxid de potasiu și hidroliza se efectuează 50-70; min la. 36-37 C.

Mai mult, unul dintre drive-uri priliva-. 2 ml de 0,5 M soluție de acid percloric a fost hidrolizat de 18-22 minute într-o baie de apă la fierbere și cantitate astfel izolată totală atât acizii nucleici (C „k), adică ribonucleic (SPH „) și deoxiribonucleic (la Cn) din hidrolizatul de acid se răcește și se filtrează.

Se măsoară cu un spectrofotometru absorbanta filtratul obținut într-o cuvă de 1 cm la lungimea de undă

270 nm și 290 nm. Se efectuează calculul concentrației acizilor nucleici (Sn), adică Cp „Srrg +“, cunoscut formula

NRC = Hr / lxA, atât concentrația acizilor nucleici; concentrația acizilor ribonucleic; concentrația acidului dezoxiribonucleic; numărul de eritrocite; diferența de densitate optică la o lungime de undă

270 nm și 290 nm.

Comanda 4047/2 Abonament de circulație 673

TSNIIP Comitetul .Gosudarstvennogb al URSS pentru Invenții și Descoperiri

113035, București, F-35, Raushskaya NAB. d. 4/5

SPT ramură "Patent", Uzhgorod, ul.Proektnaya 4

Astfel, examinând sângele persoanei care are contact cu taliu. arată că numărul de celule roșii din sânge

Control, E p> * 0,32 nm.

0,295 EuO 0,32 nm dE nm. â € „0295. nm = 0025 nm

Ea9o 0265 nm bE = 0,37 nm â € „= 0,265 nm, 0,105 nm

E = 0105 nm - 0,025 .nm = 0,08 nm. CH = 32640.08. / 6 = 46,6 ng / milion

9NK C C C 46 OA = e b ng / milion ° -.

-14,5 ng / mn = 32, 1 mg / milion

Prin urmare, de la un om de celule roșii din sânge de presă 31.2. ng / milioane de euro. eritrocite, acid dezoxiribonucleic, care indică începutul intoxicație taliu necesită. măsuri adecvate pentru a preveni 20 pentru a preveni creșterea de intoxicare.

Astfel, metoda de diagnostic de otrăvire. metale grele prin identificarea acizilor nucleici în celulele roșii din sânge, permite detectarea pryznaki timpurie de metal intoxicarea prin determinarea cantitativă. conținut Nogo metale, precum și determinarea cantității de acid dezoxiribonucleic în eritrocite.

O metodă de diagnostic de otrăvire cu metale grele prin identificarea acizilor nucleici în celulele roșii din sânge. caracterizat prin aceea că, în scopul diagnosticării precoce, care este determinat. redelyayut acidului dezoxiribonucleic și conținutul său 20, 6-89,7 ng per milion. eritrocit diagnostica otrăvire. Surse yanFormatsii luate în considerare în cadrul examinării

P 316 991, cl. 6 O1 k 33/16, 1974.