Metode pentru diagnosticarea rapidă a infecțiilor virale comune - studopediya

Grupul 2 - izolarea virusului din probe clinice, indicații și identificare (diagnostic virusologic) sa.

In cele mai multe cazuri, concentrația de virus din materialul clinic este insuficient pentru detectarea rapidă a virusului sau a antigenelor acestuia. În aceste cazuri, utilizați diagnosticarea virale. Acest grup de metode este consumatoare de timp, laborios, de multe ori retroactiv. Cu toate acestea, este necesar diagnosticul virusologic pentru infecțiile cauzate de noi tipuri de virus, sau când este imposibil de diagnosticat prin alte metode.

Pentru medicul de diagnostic virologic ar trebui să furnizeze probele necesare în luarea de materiale faza corespunzătoare a bolii, livrarea acestora la laborator, oferind laboratoarelor de diagnosticare de informații clinice necesare.

Material pentru examinare virusologică în bolile însoțite de diaree sau alte tulburări gastro-intestinale, care sugerează o etiologie virală (hepatita A, rotavirus și infecție enterovirus), sunt proaspete lot de fecale. În boli ale tractului respirator (gripa, paragripale, infecția RS, infecția cu adenovirus și altele.) Material de cercetare este cel mai bine obținută prin aspirarea tampoane de mucus. tampoane nazofaringiene sunt mai puțin informativ. În prezența veziculare infecției (HSV) este un material pentru studii aspirate ac fluid de vezicule. Când rash petesiala și makulo papulo - ca mostră de mucus din nazofaringe și fecale. Dacă suspectați o infecții neyrovirusnyh (poliomielita, infecții arboviral) examenului virusologic trebuie să ia mucusul din nas și gât, fecale, și lichidul cefalorahidian. Pentru diagnosticul de oreion și a materialului rabie este saliva. Pentru imagini papovavirusnye tsitomegalo- suspectate și infecția pot fi urina. Încercările de a izola virusul din sânge pot fi luate în caz de infecții suspectate cauzate de anumite arbovirusurile, virusuri herpes. biopsia măduvei poate fi realizată în diagnosticarea encefalita herpetică, SSPE, panencefalita rubeola progresiva, boala Creutzfeldt-Jakob, etc. leukospongiosis.

Formulări mucus nazofaringian sau fecale sunt plasate într-un mediu de transport constând din ser suplimentat cu antibiotice si o cantitate mica de ser proteic sau animal. Materialele pot fi depozitate la 4 ° C nu mai mult de 48 de ore. depozitare mai necesită temperaturi de -70 ° C

Izolarea virusului din materialul clinic se realizează prin inoculare în culturi de celule sau de ouă de găină embrionate le infectate animale de laborator (vezi. Virus Cultivare).

Virusul gripei trebuie alocate prin inocularea material conținând virus în cavitatea amniotic sau alantoidiană de embrioni de pui. Pentru a izola virusul Coxsackie A, virusul rabiei, arbovirusi multe, arenaviruses recomandat inoculare intracerebrală și intraperitoneală a materialului șoarecilor nou-născuți.

indicație virusului în cultură celulară efectuată de CPP, RIF, RGA, RGAds. Multe enterovirusuri provoca un CPP timpuriu (câteva ore). Citomegalovirus, adenovirus, virusul rubeolei cauzează un CPE în câteva săptămâni, și este uneori necesar să se recurgă la obținerea subcultură. Prezența syncytia indică prezența virusurilor, cum ar fi MS, rujeolei, parotiditei epidemice, virusuri herpes.

Identificarea virusurilor selectate în aceste sisteme se realizează utilizând metode serologice. Astfel de teste serologice cum ar fi testul de inhibare a hemaglutinării, RN, RTGAds utilizat numai pentru infecții virale. RSK, TPHA, ELISA, RIA, IP, RP et al. Folosit atât pentru diagnosticul infecțiilor virale și a infecțiilor provocate de alți agenți patogeni. Acesta este acum utilizat pe scară largă tehnici de diagnostic molecular: MG PCR.

Schemele 2 și 3 este un diagnostic virologic al SARS si infectii intestinale.

Grupul 3 - diagnosticul serologic al infecțiilor virale.

Odată ce testele serologice numai rareori permite diagnosticul de infecție virală (de exemplu, infecția cu HIV). In cele mai multe cazuri, diagnosticul serologic necesită asociat ser luate în timpul fazei acute a bolii și după 2-4 săptămâni. Detectarea și creșterea de patru ori peste titrul de anticorpi este de obicei privit ca un semn de diagnostic al infecției virale acute.

Mucusul din nazofaringe tratate cu antibiotice

Figura 3. Izolarea virusului din fecale, indicația lor și identificarea
infecții virale intestinale

Grupul 4 - metode biologice moleculare de indicație, identificarea și clonarea virusurilor. Efectuat în scopul de a identifica fragmente de genom viral virus-specific în material.

indicație biologică moleculară a virusurilor din material biologic (dot blotting, în hibridizare sinu, sandwich hibridizare):

- Metode de hibridizare moleculară (metoda microgeny). Efectuat pentru a identifica fragmentele specifice virusurilor ale genomului viral în material. Caracterizat de sensibilitate și specificitate ridicată. Folosit pentru a detecta citomegalovirus, virusurile herpetice, virusurile hepatitice.

- reacția în lanț a polimerazei (PCR) și PCR cantitativ.

- Western blot - bazat pe detectarea anticorpilor specifici circulant antigeni ai virusului.

- Determinarea infectate cu virus celule prin citometrie în flux. Folosit în infecția cu HIV, mononuleoze infecțioasă, hepatita C, infecția cu citomegalovirus.

PCR este posibil să se efectueze indicarea virusului în materialul, identificarea, diferențierea cu agenți infecțioși conexe, genotiparea izolate de virus și donarea fragmente ale genomului, fara a fi nevoie de cultivarea celulelor în cultură.