hidroliza completă - proteine - o enciclopedie mare de petrol și gaze, hârtie, pagina 1
Completă hidroliză - proteină
hidroliza completă a proteinei în aminoacizi nu pot fi puse în aplicare de către o singură enzimă; aceasta necesită acțiunea combinată a mai multor enzime. Există două mari grupuri de enzime: proteaze, care includ pepsina, tripsina și chimotripsina, hidrolizare proteine alimentare naturale la peptide mari și peptidil conținând oxidaza carboxipeptidază, aminopeptidaza și peptide dipeptidaza hidrolizare în aminoacizi. [1]
O indicație de hidroliză completă a proteinei este de obicei hidrolizatul abiurent. Cu toate acestea, trebuie amintit că acest atribut indică probabil să se apropie de sfârșitul hidrolizei, decât la finalizarea acestuia, deoarece unele peptide simple, nu pot da un colorant violet cu reacția biuret (vezi. P. Prin urmare, după ce a menționat reacția biuretului negativ pentru hidroliza proteinelor ar trebui să continue în continuare 1 - 2 ore, și numai după aceea poate fi considerată completă [2].
După hidroliza completă a proteinei produse de cuantificare a fiecăruia dintre aminoacizii prezenți în hidrolizatul. Pentru separarea aminoacizilor mai frecvent metoda de cromatografie prin schimb ionic utilizat. Deoarece schimbătorul de ioni este utilizat în general sulfopolistirolny cație-filamente. Amestecul de aminoacizi este introdus în partea superioară a coloanei, la pH = 3; în aceste condiții, aminoacizii individuali sunt încărcate pozitiv. Aminoacizii sub formă de cationi adsorbiți pe rășină sulfopolistirolnoy (conținând gruparea - SOjNa), înlocuind o parte din ionii de sodiu și sunt reținute pe materialul coloanei prin forțe electrostatice. Este evident că puterea de aminoacizi sorbție crește cu principalul său. După realizarea amestecului elgotsiya aminoacizi începe să crească treptat pH și tărie ionică a soluției tampon trecut prin coloană. În aceste condiții, încărcătura pozitivă aminoacizii sunt neutralizate treptat și interacțiuni ionice sunt slăbite. aminoacizi acizi (acid glutamic și acidul aspartic) sunt îndepărtate din coloana întâi, apoi neutru și în cele din urmă miez. Cu această metodă este posibil să se împartă toți aminoacizii care se găsesc în proteine, deoarece rezistența de aminoacizi a rășinii de sorbție depinde de interacțiunile ionice și neionice din. Sulfopolistirolny cationi adsoarbe aminoacizi suficient selectivi, astfel încât toți aminoacizii neutri, care nu sunt separate prin schimb de ioni, cu toate acestea, elua din coloană la diferite fracțiuni. aminoacizi individuali sunt eluate din coloană, colectat colector automat fracții. Ei au fost apoi cuantificată prin măsurarea intensității culorii formate prin acțiunea ninhidrină. [3]
Când hidroliza completă a proteinelor, un amestec de aproximativ douăzeci de aminoacizi. Acești aminoacizi se numesc o-aminoacizi; cu formula generală: NH2 - Clffi - COOH. Excepția este prolină și oxi-vărsat aparținând unei -imino. Acești aminoacizi pot fi împărțite în șapte clase: 1) aminoacizi alifatici; 2) oksiaminokisloty; 3) aminoacizi și amide dicarboxilic; 4) aminoacizi dibazic; 5) aminoacid aromatic; 6) conținând sulf aminoacizi; 7) imino. [4]
Ca rezultat, proteina totală obținută prin hidroliza unui amestec complex de diverși aminoacizi, care sunt dificil să se separe și se obține fiecare aminoacid în formă pură. De aceea, aminoacizi chimic pure necesare pentru cercetarea științifică, cu câteva excepții, sunt foarte costisitoare și dificil de materiale de acces. Prepararea aminoacizilor prin hidroliza proteinei este benefică doar pentru un număr mic de aminoacizi, de preferință, conținute într-un substrat biologic folosind orice. De exemplu, alanina este preparat prin hidroliza linters de mătase, cistina - prin hidroliza lână. în creștere aplicație tehnică primește metoda de separare cromatografică a amestecului de aminoacizi Recent (p [5].
Principalele produse de hidroliză completă a amestecului de proteine sunt o-aminoacizi, dar procesul are loc în etape; în anumite condiții, în special sub acțiunea enzimelor, proteinele au fost digerate inițial formează un aspect mai simplu, dar apropiate lor asupra proprietăților substanței - peptone. [6]
Principalele produse de hidroliză completă a amestecului de proteine sunt o-aminoacizi, dar procesul are loc în etape; în anumite condiții, în special sub acțiunea enzimelor, proteinele au fost digerate inițial formează un aspect mai simplu, dar apropiate lor asupra proprietăților substanței - peptone. Acestea sunt produse de hidroliză parțială a proteinei și sa constatat că reprezintă un amestec de diferite polipeptide complexitate (p. O altă hidroliza peptone sunt produse chiar mai simple polipeptide, dipeptide și în final acizii-un amino. [7]
Ca rezultat, hidroliza completă a proteinelor obținute amestecuri de aminoacizi. Pentru izolarea lor, separarea și determinarea unui număr de metode. [8]
Metoda electrodializă pentru separarea produsului total de hidroliză de proteină are o serie de avantaje semnificative față de alte metode, deoarece nu necesită o investiție mare de timp și de muncă, costisitoare sau reactivi greu accesibile și, de asemenea, se asigură că separarea produselor de hidroliză proteinei în grupul principal de făcut cu minuțiozitate suficientă. [9]
Este posibil ca, în cazul unei cantități semnificative de azot hidroliza completă a proteinei nu face parte din amida poate forma, de asemenea, amoniac. Prin urmare, un număr de investigatori 114 - 16] A fost făcută o încercare de a dezvolta o metodă specifică de determinare azot, o parte din amida. Pentru cunoștințele noastre, până în prezent nimeni nu a reușit încă să ofere ultramikrometod, care ar putea fi folosite în acest scop. [10]
Pentru a determina N-terminal al lanțului peptidic se obține peptida N-terminală de aminoacizi-ing derivat care este identificat după hidroliza completă a proteinei. [11]
Pentru a determina N-terminal al lanțului peptidic este obținută M - peptida terminală de aminoacid care este identificat după hidroliza completă a proteinei-ing fabr. [12]
Când hidroliza completă a proteinelor produse de aminoacizi. Foarte mare interes este reacția inversă - formarea acizilor amino di -, tri și polipeptide. In această reacție dintre moleculele de aminoacizi având legături peptidice. [13]
organism animal asimileaza numai aminoacizi liberi, dar nu și proteine sau peptide. Atunci când există o digestie completă hidroliza proteinelor la aminoacizi. [14]
Studenții trebuie să știe că hidroliza completă a proteinelor produse alimentare de aminoacizi nu poate fi realizată printr-o singură enzimă, aceasta necesită o acțiune comună a mai multor enzime gastrice suc - pepsina, tripsina, chimotripsina, hidrolizare proteine de alimentare naturale la peptide mari și apoi peptidazei peptide hidroliza în aminoacizi . Teacher definește hidroliza proteinelor enzimatice - procesul de transformare a proteinelor alimentare in aminoacizi, care apar în stomac. [15]
Pagina: 1 2