Examinarea microscopică, metoda de examinare microscopică

Pentru examenul microscopic accidente vasculare cerebrale, fixate și apoi colorate uscate cu aer.

Materialul de testat a fost împărțit în strat subțire pe suprafața obiectivului sticlă degresată bun. secreții vaginale, aplicat la o lamelă de sticlă mai aproape de marginea înguste, acoperite cu un alt diapozitiv. Sticla apăsați ușor în jos unul de altul.

După aceea, capetele libere ale ochelarilor I și II degetele de prindere de ambele mâini și se diluează în direcții opuse, astfel încât atunci când se deplasează cele două sticlă sprijină una pe cealaltă. Astfel, frotiuri sunt obținute cu un material uniform distribuit.

Uscarea și fixarea frotiurilor
Frotiul pregătită pe o placă de sticlă culisantă și uscat în aer, după uscare este fixat. La fixarea tamponul atașat la suprafața împingătorului și, prin urmare, colorarea ulterioară a preparatului, celulele microbiene nu sunt spălate off. In plus, celulele microbiene moarte pata mai bine decât vie.

Distinge metoda de fixare fizică, care se bazează pe expunerea la temperaturi ridicate într-o celulă microbiană, și metode chimice care implică utilizarea substanțelor chimice care cauzează coagularea proteinelor citoplasmatice.

- Metoda de fixare fizică
Glisiera de sticlă cu o pensetă luând droguri sau I și II pentru degetele de la marginea din dreapta sus și accident vascular cerebral mișcare lină se efectuează de 2-3 ori peste partea de sus a flăcării arzătorului. Toate procesul de fixare nu trebuie să dureze mai mult de 2 secunde. fixare Fiabilitate verificată prin următoarea metodă: suprafață liberă de diapozitive frotiu este aplicat la dorsale a mâinii stângi. Cu frotiu de fixare corespunzătoare de sticlă ar trebui să fie cald, dar nu provoca o senzație de arsură.

- Metoda chimică de fixare
Pentru fixarea frotiului sunt folosite substanțe chimice și compuși - etil (vin) alcool 960, acetonă, un amestec de Nikiforov (un amestec de alcool și eter anestezic în raportul 1: 1), Carnoy lichid (alcool 96% 60 ml de cloroform cu acid acetic 30 ml glacial 10 ml).

De preferință, considerată fixare chimică lentă (acetonă, amestecul Nikiforov, fluid Carnoy lui) [15].

Diapozitiv de sticlă cu tamponul uscat este imersat într-o sticlă cu un agent de fixare, timp de 10-15 minute și apoi se usucă în aer.

realizată suplimentar colorare Gram clasice metoda frotiului. Pentru realizarea acestui colorant coloranți comerciale speciale, cum ar fi de companie sau coloranți BioMerioux preparate în laborator, poate fi utilizat.

Colorația Gram se referă la o metodă de vopsire complexă. Pentru metode complexe de frotiu de culoare afectează doi coloranți, dintre care unul este de bază, iar celălalt este - opțional. Materiale de asemenea, coloranți, diverși agenți de albire utilizate în procesul complex de vopsire: alcool, acizi, etc.

Caracteristică colorația Gram este un tratament diferit al diferitelor microorganisme la vopsește grupe triflică: gențiană, metil sau cristal violet. Microorganismele care aparțin grupei de bacterii Gram pozitive (Gram +), de exemplu stafilococi, streptococi, produce o legătură puternică cu acești coloranți și iod. microorganisme pictate nu decolorează atunci când sunt expuse la un alcool, prin care, după o colorare suplimentară cu bacterii Gram fucsin (+) nu modifică culoarea violet a primit inițial. Gram negative (Gram) microorganisme (Bacteroides, fuzobakterii și colab.) Pentru a forma cristalină sau violet de gențiană și iod metilen este ușor de distrus prin acțiunea unui compus alcool, prin care acestea sunt albite și apoi vopsite magenta achiziționează roșu.

Raportul dintre microorganismelor colorația Gram este de mare valoare diagnostică.

Cristal violet (magenta Tsilya Guides) - Guides soluție: 1 g de cristalin măcinat metil violet într-un mojar cu 5 g de acid carbolic cristalin și câteva picături de glicerină. În timpul de frământat adăugat în porțiuni mici, 10 ml de alcool. Dupa razotret colorantului bine s-a adăugat cu agitare constantă, 100 ml de apă distilată. Soluția de colorare a fost filtrată prin hârtie de filtru umedă. Magenta este foarte stabil și poate fi depozitat pentru o lungă perioadă de timp în sticle de culoare închisă astupate.

soluție Lugol - 2 g de iodură de potasiu se dizolvă în 5-10 ml de apă distilată și apoi se adaugă 1 g de iod cristalin, lăsat timp de câteva ore până când se dizolvă și apoi se toarnă toarnă 295-290 ml de apă distilată.

Magenta alcool-apă (soluție Pfeiffer) - la 1 parte carbolice fucsin Tsilya turnat 9 părți de apă distilată. Soluția nu este foarte stabil, astfel că este preparat în cantități mici, imediat înainte de utilizare.

1. Frotiul fix colorat cu hârtie de filtru colorant de bază - soluția de bază carbolice cristal violet. Colorare durează 1-2 minute.
2. Hârtie îndepărtat, golit excesul de colorant și, fără spălare cu apă de preparare, se toarnă o soluție Lugol timp de 1-2 minute, până când înnegrire a medicamentului.
3. soluție Lugol decantat. Culisa sticla este scufundată de mai multe ori în ceașcă pentru frotiu decolorarea cu spitrtom, procesul de albire este completă atunci când sunt separate de stația de accident vascular cerebral vopsit fluxuri de lichid violet.
4. Medicamentul a fost bine spălat cu apă de la robinet.
5. Dokrashivayut soluție alcoolică apoasă de fucsin.

Colorare durează 1-2 minute.

Gram (+) bacterii colorate colorant de bază într-o culoare violet închis, Gram (-), un colorant suplimentar de detectare capătă o culoare magenta luminos.

Dezavantajele acestei metode ar trebui să includă pete anumite dificultăți în alocarea microorganismelor identificate Gram (+) sau Gram (-) de culoare datorită posibilității lor de colorare neuniforma datorită prezenței în cantitatea vaginal frotiu mare de mucus și o varietate de microorganisme. În acest sens, Mavzyutov AR și colab. Am propus utilizarea diagnosticului microscopic al BV pata cu albastru de metilen [15].

Colorarea cu albastru de metilen
Prepararea soluțiilor:

• Soluția „A“: 2,5 g cristal violet dizolvat în 250 ml de apă distilată (trece 3-4 săptămâni);
• Soluția „B“: 12,5 g de carbonat de sodiu dizolvat în 250 ml de apă distilată (trece 2 săptămâni înainte de depunerea de cristale.);
• Soluție de iod: 1 g de hidroxid de sodiu dizolvat în 7 ml de apă distilată, apoi se adaugă 5 g de iod cristalin și iodură de potasiu la 0,25, la soluția rezultată se adaugă fractionare 243 ml de apă distilată;
• Spălarea albire lichid: 75 ml acetonă se adaugă la 175 ml de alcool etilic;
• Safraninul soluție: 5 g de safranina dizolvat în 15-20 ml de etanol și se adaugă la 250 ml apă distilată.

1. Frotiurile sunt fixate peste flacăra arzătorului. Pe porțiunea de material din sticlă issleduemngo liberă este aplicată simultan 6 picături de soluție „A“ și „B“. Se amestecă cu o baghetă de sticlă și se distribuie uniform pe sticlă. Expunere - 2 min.
2. Îndepărtați resturile de vopsea și soluție de iod se aplică timp de 2 minute.
3. Îndepărtați resturile de iod și poate provoca 10-20 picături de lichid de spălare, manipulare repetată pentru a finaliza albire, agitandu-se constant sticla.
4. Spălat cu apă de la robinet.
5. Dokrashivayut Safraninul 2 min.
6. Se spală cu apă, se usucă, mikroskopiruyut.

Cu acest colorant se produce medicament metilen colorare cu albastru Gram floră pozitiv optime în ton albastru și Gram - culoare albastru-negru intensiv.

Microscopia directă face cel mai bine cu o mărire relativ mică (x ocular 2-7) pentru a mări câmpul vizual și acoperirea maximă a tuturor obiectelor prezente în material.

Dominanța lactobacililor, lipsa de microflora gram negativ, spori, miceliu, pseudohyphae, prezența celulelor albe din sânge și un singur singur „curat“ de celule epiteliale, respectiv, faza a ciclului menstrual.

starea tipică a habitatului normal al vaginului.

cantitate moderată sau mică de bacterii producătoare de acid lactic, prezența bacteriilor Gram-pozitive coci, bacili gram-negative. S-au găsit celule albe din sânge, monocite, macrofage, celule epiteliale.

observate frecvent la femeile sănătoase, rareori însoțite de acuze subiective și manifestări clinice.

Puțin sau nici un Lactobacilli, abundent polimorfa gram-pozitive și gram-negative și microflora coccal în formă de tijă; prezența celulelor „cheie“. Leukocyte Numărul de variabile, neîmplinire sau absența fagocitoza. frotiu model polimicrobiene.

vaginita bacteriana

Un număr mare de celule albe din sânge, macrofage, celule epiteliale, exprimate fagocitoză, morfologic proces inflamator peisaj.

La detectarea: Neisseria gonorrhoeae, Trichomonas, dispute miceliu psevdogifof expus diagnosticul etiologic relevant - gonoreea, trihomoniaza, micotică vaginită [7, 8].

Clasificarea propusă este simplă și informativ combină interpretarea microbiologică a frotiului vaginal, tabloul clinic caracteristic și forma nosologică corespunzătoare.

Cea mai importantă valoare diagnostică în BV este identificarea celulelor „cheie“.

Criteriul celule cantitative de detectare a „cheie“ rămâne dezbătut, deoarece până în prezent nu sunt rezolvate în cele din urmă problema standardelor pentru indicii ale microflorei vaginale. Cu toate acestea, este un fapt cunoscut în rata de prevalență bacterii ale genului Lactobacillus, care permite să-l utilizeze ca studiul principal cu BV. În favoarea acestei indică imposibilitatea dezvoltării florei concomitente excesive și, prin urmare, prezența celulelor „cheie“, menținând în același timp nivelul cantitativ al lactobacili. Acest lucru elimină automat alcalinitatea mediului vaginal, etc. tipic pentru BV. În prezent, există mai multe clasificări ale BV microscopice.

Mavzyutov AR și colab. diferențierea BV oferite de cele trei puteri:
1 grad - compensat, caracterizat printr-o lipsă totală a materialului de testat sub celulele epiteliale nealterate microflorei. Această stare a mucoasei vaginale nu este văzută ca patologică, dar lipsa florei laktobakterialnoy arată posibilitatea fundamentală de a soluționa un gol stints nișă ecologice cu microorganismele organelor genitale externe și formarea ulterioară a BA, din cauza încălcării pe fondul lipsei de bacterii producătoare de acid lactic naturale colonizatoare rezistență la nivelul mucoaselor. Formele descrise pot fi observate la microscop, ca urmare a „excesive“ de formare a pacientului pentru a vizita un medic sau după medicamente intensive de chimioterapie spectru larg de acțiune antibacteriană (cefalosporine, macrolide, etc).
Etapa a 2 - subcompensat, caracterizată prin scăderea cantitativă a lactobacililor, proporțional cu cantitatea tot mai mare de polimorfului gramvariabelnoy florei bacteriene concomitente și apariția în câmpul vizual al unității (1-5) cu celule „cheie“ la un leucocitoza relativ moderat (15-25 într-un câmp vizual). Celulele „cheie“ pot fi prezente ca acoperiri florei bacteriene în afara celulelor epiteliale și bacterii conținând intracelulară datorită fagocitoza nespecifice funcțiilor celulelor epiteliale.
3 grade - decompensat fiind simptomatic potrivit simptomelor BV și caracterizate prin microscopic absența completă a lactobacililor, când întregul câmp vizual este umplut cu celule „cheie“. florei bacteriene în acest caz pot fi reprezentate prin foarte diferite, în absența microorganismelor lactobacili în monocultură sau în diferite și specifice morfo combinații [15].

Una dintre metodele de diagnostic de laborator, care vă permite să aprecieze pe deplin calitatea și cantitatea de microflora vaginala este un examen bacteriologic. Dezvoltarea C a acestei metode a fost schimbat și prezentarea compoziției microflorei vaginale. Îmbunătățirea metoda de diagnostic bacteriologice - îmbunătățirea calității mediilor de cultură, metode de cultură, tehnici diferite pentru izolarea și identificarea reprezentărilor de schimbare microorganisme promovate de criterii reguli. Inițial sa constatat că, în plus față de lactobacili în compoziția microflorei normale pot fi condiționate microorganismele patogene (Staphylococcus, Streptococcus, unele bacterii gram-negative) [13, 14]. Punerea în aplicare de la începutul anilor 70, tehnicile de cultivare anaerobe a adus noi ajustări semnificative la conceptul de microflorei vaginale „normale“. Ca îmbunătățirea tehnologiei și identificarea anaerobe anaerobi stricte a extins în mod semnificativ gama de microorganisme care fac parte din microflora vaginale normale [16, 17].

registru de Internet

ATENȚIE! Atunci când alegeți un timp convenabil pentru tine, păstrați în minte, te rog, de ore de funcționare corespunzătoare sala de tratament.