Aglutinarea (PA), precum și mecanismul de stabilire a metodelor

Aglutinarea - o încleiere și precipitarea microbiene sau a altor celule (RBCs) de anticorpi în prezența unui electrolit. Efectul vizibil al reacției (fenomenul de aglutinare) - formarea unui precipitat care se numește aglutina.

Această reacție este utilizată pentru serodiagnosis și seroidentifikatsii. RA este utilizat pentru serodiagnosis (detectarea anticorpilor în serul pacienților) tifoide paratifoidă (reacția Widal), bruceloza (reacția Wright), tularemie și leptospiroza. RA este utilizat pentru a seroidentifikatsii (determinarea tipului de patogen izolat de la un pacient) în infecțiile intestinale, tusei convulsive, holera și altele.

1. Antigenul (aglutinogen) - acest ansamblu (nu distrus) microbiană sau alte celule (antigen insolubil corpuscular.). Agglyutinogeny - este o suspensie de celule microbiene vii sau ucise sau alte orice celule. Antigeni pot fi fie necunoscute sau cunoscute. Necunoscut aglutinogen - o cultură microbiană izolată din corpul pacientului, care trebuie determinată. antigen Cunoscută - diagnosticum - preparare diagnostic - suspensii de specii microbiene ucise cunoscute în ser fiziologic. Această suspensie a fost turbiditate (opac) ca Celulele microbiene nu se dizolvă, și rămân intacte. aglutinogen Cunoscut va fi utilizat pentru detectarea în ser a anticorpilor pacienților necunoscuți.

2. Anticorpul (aglutinina) - este în serul sanguin. Anticorpii pot fi, de asemenea, atât necunoscute și cunoscute. anticorpul necunoscut să fie determinat, în serul sanguin al unui pacient uman. Anticorpii cunoscuți sunt diagnostice de seruri imune. numit aglutinare seruri. Ele sunt folosite pentru a seroidentifikatsii, și anume pentru a determina necunoscute antigen - tip de cultură microbiană.

3. Electrolit - 0,9% soluție de clorură de sodiu.

Metode de setare RA.

1. estimat (placă) PA - efectuate pe sticlă. Aplicata pe sticla culisa 2 picături de ser și soluție 1 picătură izotonică. Într-una din ser și picături în bucla picătură se face izotonică prin cultura microbiană și se amestecă. O picătură de microbi izotonice - controlul antigenului. o picătură de germeni de ser - controlul anticorpilor. o picătură de ser pentru microbi - experiență. Dacă serul conține anticorpi antigene microbiene sunt amestecate cu ea, anticorpii și antigenii se vor lega în mod specific unul de altul, și după 1 - 3 min, în picătura experimental va aglutina fulgi. controlul antigenului trebuie să fie tulbure și control anticorp - transparent. Rezultatele reacției de contabilitate realizată prin apariția fulgilor aglutineze. În cazul în care fulgii cad - reacția este pozitivă, adică, Anticorpul și antigenul corespunde antigen-anticorp poate fi determinată sau invers. În cazul în care există este neclară - reacție negativă.

2. Testul de aglutinare expandat - realizat în eprubete. pregăti inițial 2-hkratnye reproducere ser uman pacient de la 1:50 la 1: 1600. Tubul 6 este turnat la 1 ml de soluție izotonică de clorură de sodiu. Primul tub este format din 1 ml de ser pacient la o diluție de 1:50 a fost agitat pentru a da diluție 1: 100, urmat de 1 ml de diluție de 1: 100 este transferat într-un tub de testare și a doua diluție preparată 1: 200, etc. Două tuburi sunt lăsate pentru controlul antigenului și ser. Controalele serice sunt adăugate doar ser la o diluție de 1:50 în controlul antigenului - numai antigenul. În timpul tuturor celorlalte eprubete au fost adăugate 0,1 ml de antigen - diagnosticum (O- sau H) și a pus toate tuburile într-un termostat la 37 ° C timp de 18-20 ore. Contabilizarea reacția se realizează rezultate cu privire la natura, cantitatea precipitatului format (aglutinează) și turbiditatea. Contabilitatea se efectuează numai în următoarele rezultatele controalelor: serul de control - controlul transparent, antigen - noroios. Despre anticorpi da sediment fin granulate. H-anticorp - grosier. Conform ultimului tub de testare, care este încă aglutinare, set titrul de diagnosticare.

Când serodiagnosis de boli, este important să nu numai detecta anticorpii specifici pentru un anumit agent patogen, dar, de asemenea, pentru a descoperi numărul, și anume, stabili astfel titrul de anticorpi, atunci putem vorbi despre prezența bolii cauzate de acest patogen. Aceasta se numește un titru de diagnostic și titru. De exemplu, pentru diagnosticarea febrei tifoide necesitatea de a identifica anticorpi titrului - 1: 400, dar nu mai puțin. Chiar și rezultate mai precise oferă pereche de anticorpi de detecție creștere syvorotkah.Syvorotku pacient luate la debutul și după 3 - 5 sau mai multe zile. În cazul în care crește titrul anticorpului nu mai puțin de 4 ori, prin urmare, putem vorbi despre boala actuală.

În cazul în care reacția de aglutinare utilizate pentru a pune seroidentifikatsii, utilizarea aglutinarea titru seric de diagnostic sau diluat la jumătate din titlul lor. RA este considerat pozitiv dacă aglutinarea este detectată la o diluție de titru seric aproape de diagnostic.