Un procedeu de preparare a unui ser de diagnostic

Invenția este destinată producerii de seruri hiperimune foarte specifice. Animal producător imunizate materialul antigenic de cinci ori avirulente intravenos. Simultan administrat intramuscular ca o timalin imunomodulator. In a treia injecție de administrat antigen ciclofosfamidei imunomodulator intramuscular. este preparat din sânge și ser separat. Invenția crește activitatea specifică a simplifica seruri de diagnostic și reduce complexitatea procesului de preparare a acestora, cu un randament ridicat al produsului din titlu.

Invenția se referă la biotehnologie și poate fi utilizat în producerea de seruri hiperimune foarte specifice în timp ce reducerea costurilor forței de muncă și a animalelor producătoare de deșeuri.

O metodă de obținere a unui ser bruceloza diagnostic aglutinare, care cuprinde imunizarea iepurilor care produc celule vii virulenți Br.abortus 146 și 565 Br.melitensis tetrasubstituit de trei ori peste 1 săptămâni ori a 4-in 2-3 saptamani, exsanguinare totală după 2 săptămâni injecția finală, primele trei injecții efectuate în amestec cu un volum egal de adjuvant Freund complet. titru seric este mai mic de 1: 1600.

[Diagnostic Ser aglutinare brucella uscat. Regulamentul de producție N 273-82. Odesa Enterprise bakpreparatov].

Atunci când se utilizează culturi virulente vii necesită regim strict anti-epidemice, ser insuficient activă, metoda este laborioasă, consumatoare de timp.

Procesul este lung și laborios.

O metodă de obținere a serului diagnostic plagă specific speciei [II Derteva și colab., lucrare Sb.nauchnyh în instalații anti-ciumă. - Saratov, 1966, p. 151-162]. imunizarea producătorilor de animale se efectuează trei cursuri, cu pauze de două săptămâni între ele. În primele două cicluri de injectare se efectuează de 3 ori după 4 zile în 6 injecții treia rată după 4 zile. In fiecare doza de antigen curs crește cu fiecare injecție. Animalele au fost sângerat 7-9 zile după ultima injecție.

Titrurile aglutinare de ser 1: 50-1: 200. Serul nu este specific, o metodă de preparare a unui foarte lung și laborios.

O metodă de obținere a serurilor de antrax de spori anticorpi luminescente producție [ser de spori de antrax diagnostic adsorbit uscat luminescent. Regulamentul de producție SNIPCHI N 156-80].

In aceasta metoda, imunizarea iepurilor se efectuează sporii avirulent Bac. anthracis 10 ori cu un interval de 3 zile, injectarea subcutanată 5 5 IV cu creșterea dozelor de microbi. 7 zile după ultima injecție se efectuează sângerarea și Serum de preparare. Titrul Producerea FIND ajunge la 1: 3200.

Serica insuficient activ.

Astfel, toate metodele cunoscute pentru prepararea mono diagnostic sau seruri polivalenți au dezavantaje comune de activitate derivată insuficientă complexitate serurile a procesului de producție, randament scăzut al produsului țintă datorită deșeurilor animale ridicate producătoare care nu oferă posibilitatea de producție în masă de produse de diagnostic.

Scopul invenției este acela de a crește activitatea specifică a simplifica seruri de diagnostic și de a reduce complexitatea procesului de preparare a acestora, cu un randament ridicat al produsului din titlu.

Scopul este atins prin faptul că animalele Quintuple producătoare imunizați cu material antigenic avirulent intravenos, administrat intramuscular simultan ca o timalin imunomodulator, oa treia injecție se administrează intramuscular suplimentar ciclofosfamida, separate de sânge și ser preparat.

În ceea ce privește metoda inventivă prototip obține ser diagnostic are următoarele caracteristici. Utilizare ca imunomodulator Thymalin contribuie semnificativ la titrurile de anticorpi specifici din ser prin creșterea numărului de celule producătoare de anticorpi prin stimularea funcției de macrofage și celule T helper. Ciclofosfamida, fiind un imunosupresor clasic, de asemenea, activeaza magrofagi stimularea fagocitară citotoxice și supresiv (în principal referitor la T-limfocite) funcția [DN Lazarev Alehin RO stimulent imunitar. M. Medicine, 1985, p. 67-70, 147-150]. O astfel de selectivitate în imunostimulator acțiune, pe de o parte, și anume imunosupresor selectiv în acțiune - pe de altă parte, sunt combinația optimă de produse din ambele grupuri și moduri de utilizare a acestora pentru a activa anumite mecanisme imunitare și dezactiva altele.

Posibilitatea de utilizare practică a metodei propuse este ilustrată prin exemple de seruri de fabricație utilizând setul complet de caracteristici ale invenției revendicate.

Exemplul 1. Prepararea de ser de diagnostic ciuma. Iepurii producãtoare administrate intravenos la fiecare patru zile de cinci ori fracție 1 Yersinia pestis la doze crescătoare: 0,1 mg; 0,15 mg; 0,2 mg; 0,25 mg; 0,3 mg. În același timp, au fost injectați intramuscular cu 5 mg Thymalin, iar oa treia injecție intramusculară a introdus suplimentar 100 mg de ciclofosfamidă. În a 7-a zi animalele să sângereze. Activitatea în RNIF seruri ajunge la 1: 16.384 sau mai mare, în care serul au o specificitate mare.

Exemplul 2. Prepararea diagnosticului seric al bruceloza. Iepuri producãtoare injectați intraperitoneal la fiecare patru zile poligruppovoy fivefold antigen solubil din B.abortus 19, B.melitensis Rev-I, B.suis 61 în doze crescătoare de 1 mg; 1,25 mg; 1,5 mg; 1,75 mg; 2 mg. În același timp, au fost injectați intramuscular cu 5 mg Thymalin, iar oa treia injecție intramusculară a introdus suplimentar 100 mg de ciclofosfamidă. Activitatea în RNIF seruri ajunge la 1: 16384 sau mai mare.

Exemplul 3. Prepararea de ser antrax antisporovoy diagnostic. Toate operațiunile asociate cu imunizarea, producătorii de iepuri sunt executate în aceeași ordine ca și în prepararea unui ser diagnostic Brucella. Antigenul solubil în apă preparat dintr-o tulpină Bac dispută. anthracis I CO, tratate prin autoclavare la 1,5 atm timp de 2 ore. Activitatea în seruri RNIF 1: 16384-1: 32768.

Exemplul 4. Prepararea ciumei diagnostic poligruppovoy, tularemie, bruceloza, Sapna, ser melioidoznoy.

Toate operațiunile asociate cu imunizarea, producătorii de iepuri sunt executate în aceeași ordine ca și în prepararea unui ser diagnostic Brucella. Agenții Antigeni injectat în complex, la următoarele doze: ciumei - 0,1 mg; 0,15 mg; 0,25 mg; 0,3 mg, și antigene de tularemie, bruceloza, răpciugă și melioidosis - 1 mg; 1,25 mg; 1,5 mg; 1,75 mg; 2 mg. Activitatea în RNIF seruri ajunge la 1: 16.384 sau mai mare pentru fiecare component constituent.

Exemplul 5. ser diagnostic dysenteric Prepararea poligruppovoy. Antigenul poligruppovoy solubil în apă preparate din tulpini tipice fiecărei shigelloza specii (Sh.dysenteriae, Sh.flexneri, Sh.boydii și Sh. Sonnei) și injectat în aceeași secvență și aceleași doze ca în prepararea unui ser diagnostic Brucella. Activitatea în RNIF seruri ajunge la 1: 16384 sau mai mare.

Exemplul 6. Prepararea de ser de diagnostic treponemala. Antigenul ultraozvuchenny treponemala solubil în apă a fost injectat în aceeași secvență și aceleași doze ca în prepararea unui ser diagnostic Brucella. Activitatea serului FIND ajunge la 1: 16384 sau mai mare.

Astfel, invenția este posibil.

Atunci când se compară cu metoda prototip a relevat următoarele avantaje: reducerea considerabilă a duratei procesului de imunizare cu 49-54 până la 27-30 zile prin eliminarea etapei de preparare a animalelor pentru imunizarea și injectarea simultană a antigenului și imunomodulatori, randament crescut de produs dorit, datorită unei creșteri a producției de anticorpi la animale care produc și de a reduce consumul de materiale antigenice, o creștere semnificativă a activității specifice în seruri FIND 1 512 - 1: 2048 până la 1: 16.384 - 1: 32768. Utilizarea invenției în domeniul biotehnologiei va permite de a organiza producția de masă de seruri foarte specifice pentru producerea de produse de diagnostic.

Un procedeu de preparare a unui ser de diagnostic, care cuprinde imunizarea multipla de animale producătoare de material antigenic avirulent în combinație cu imunomodulatori, colectarea sângelui și separarea zerului, caracterizat prin aceea ca imunomodulatori folosite timalin si ciclofosfamida, imunizarea este efectuată de cinci ori, un material antigenic se administrează intravenos, imunomodulator timalin - IM simultan cu injectarea de antigen, în care ciclofosfamidă este administrată numai o dată la a treia injecție.