Putrefacție (proteolitice) bacterii
Ele sunt patogeni majori de deteriorare a produselor lactate, cauza descompunerea proteinelor (proteoliza), prin care pot exista diverse produse alimentare malformații în funcție de adâncimea de defalcare de proteine. Antagonistii rot sunt bacterii care produc acid lactic, produs de descompunere, astfel putredă procesului are loc în cazul în care produsele lactate nu este procesul.
Proteoliza (proprietăți proteolitice) studiul însămânțarea microorganismelor din lapte, agar lapte, gelatină carne-peptonă (NRM) și laminate în serul sanguin.
Proteina din lapte coagulat (cazeină) sub influența enzimelor proteolitice pot fi rabatate cu separarea serului (peptonizarea) sau dizolvat (proteoliza).
Lactate agar în jurul coloniilor de microorganisme proteolitice a unei zone largi de iluminare de lapte.
Recolta MNR produce o injecție în coloană a mediului. Culturi cultivate 5-7 zile la temperatura camerei. Microbii având proprietăți proteolitice lichefieze gelatină. Microorganismele nu au capacitatea de a crește proteolitice în MNR, fără diluare.
Culturile asupra bacteriilor proteolitice serului din sânge spiralat provoca de asemenea lichefiere și microbii nu au această proprietate, nu se schimba consistența sa.
In studiul proprietatilor proteolitice ca capacitatea microorganismelor de a forma indol, hidrogen sulfurat, amoniac, t. Proteinele E. alipi de gaz produs final.
bacterii putrefacție sunt foarte răspândite. Acestea se găsesc în sol, apă, aer, intestinele de oameni și animale, cu privire la produsele alimentare. Aceste microorganisme sunt bacillus aerobe și anaerobe formatoare de spori, bacterii anaerobe cromogenice și facultativi bessporovye.
Formatoare de Spore. Prin aerobi putrefactie ești. subtilis -Saint te baghetă. mesentericus - bastoane de cartofi, tu. Megatherium - varza te baghetă. mycoides - ciuperci tine bagheta. cereus și altele.
Prin sporul anaerobi putrezite sunt bacterii din genul Clostridium (Cl. Putrificum, Cl. Sporogenes, Cl. Perfringens și alte specii).
bacterii aerobe și anaerobe de formare a sporilor aparțin aceleiași familii Vasillaseae.
Toate spore putrezită sunt destul de mari bete groase atingand dimensiuni de 0,5-2,5 x 10 (y clostridiană - 20) microni, vopsite Gram pozitive, motilitate până la sporulare, capsulele nu formează. O excepție este CI. perfringens - staționare capsule care formează coli. Celulele sunt aranjate aleatoriu, voi. cereus și tu. mycoides-chain
Cele mai multe celule sunt bacilul fân scurt. Noi bacili spori sunt, de obicei, situat central, în -subterminalno clostridii. Recente de multe ori iau forma unei rachete de tenis, o lingură sau o barcă. Cl. sporogenes aproape toate celulele conțin spori (Fig. 29). Celulele Cl. perfringens, de regulă, nu conțin spori și adesea aranjate într-o palisadă, sau V. numeral roman
aerobi spori care formeaza cresc bine pe un mediu nutritiv comun. În MPB acestea provoacă opacifierea mediu, de multe ori - formarea de film și floc. Tu. cereus nu cauzează turbiditate și formează un ușor precipitat cu agitare tub creștere sub formă de nor sau lână bulgăre.
Figura 29 # 8209; Spore putredă: tine. subtilis: a - o colonie; B - celule; Tu. mycoides: in - colonie; r - celule; Cl. sporogenes: d - colonii; e - celule
Tu. subtilis produce suprafață încrețită peliculă albicioasă.
Pe MPA bacilul aerobe creste in colonii mari de culoare gri-alb. Tu. mycoides Tapered colonii de formă care seamănă cu ciuperci, prin urmare, stick-uri de nume (din myces grecești -. ciuperci) (risunok29). Unele tulpini ale acestui microorganism a fost izolat pigment maro sau roz-roșu. Pigmentul maro sau maro pot aloca, de asemenea, tulpini tine. mesentericus.
Tu. subtilis produce colonii albicioase ridate uscate. Coloniile de tine. cereus sub microscop mărire mică au margine lokonoobrazny sau cap de tip meduza.
anaerobi formatoare de sporilor crescute în medii de cultură speciale - extract de carne de vită-bulion hepatic (MPPB), mediu Kitty Tarotstsi, precum agar-agar-glucoză din sânge. Acestea provoacă încețoșată agar bulion pentru a forma colonii cu zone rotunjite mici de hemoliză, adică albire - .. Dizolvarea celulelor roșii din sânge.
Spore posedă bine definite proprietăți proteolitice lichefieze gelatină, lapte coagulat și peptonized, cauza hemoliza, secreta amoniac, hidrogen sulfurat, și alocă suplimentar anaerobi și indol. Abilitatea de a fermenta multe glucide, cu excepția Cl. putrificum, care nu are proprietăți saccarolitic.
Bessporovye. Includ bacterii anaerobe cromogenice și facultativi. Prin putrezit pigmentar includ Pseudomonas fluorescens, Ps. aeruginosa (familia Pseudomonadaceae), Serratia marcescens (familia Enterobacteriaceae) (fluoresces respectiv bacilul puroi albastru și minunat). Grupa bacterii anaerobe facultativi cuprind Proteus vulgaris (Proteus coli) Escherichia coli și din genul Escherichia (Escherichia coli) (familia Enterobacteriaceae).
Bessporovye putrezită sunt mici (2,1 x 0,6 m) Gram bacillus motilă negativ, care nu formează spori și capsule. Celulele sunt aranjate aleator. Cele mai multe celule cocobacil scurte sunt minunate bastoane. Proteus are celule Coli polimorfe (Figura 30).
Bessporovye stick-uri sunt practic mezofile. Bacteriile din genul Pseudomonas poate fi de multe ori psihrofil. Microorganismele se dezvoltă bine pe un mediu nutritiv comun. În MPB cauza turbiditate excesivă a bulionului, uneori, apariția filmului, cromogen - schimba culoarea mediului. La MPA ekrashennye formează un pigment de culoare rotunjită colonii translucide strălucitoare (Figura 30).
Figura 30 # 8209; Bessporovye putrezită: Pseudomonas aeruginosa: o - colonie; B - celule; Pseudomonas fluorescens: in - celula
Emit pigment Coli galben-verzui fluorescent, care este solubil în apă și, prin urmare, IPA este colorat în culoarea pigment.
Pseudomonas aeruginosa furnizează, de asemenea, un pigment solubil în apă este o culoare albastru-verde, care este format din doi pigmenți: albastru - și galben pyocyanin - fluoresceină.
coli Minunat colonizează, vopsite în culoarea roșie roșie sau cireșe luminoase datorită insolubile în apă prodigiosin pigment.
Proteus nu formează Coli colonii pe mediul solid și crește în formă de plăci vualeobraznogo blând ( „târâtor creștere“). Escherichia formează un gri colonii translucide mijlocii.
Bessporovye bete lichefia gelatină, coagulat și lapte peptonized, pentru a forma amoniac, hidrogen sulfurat și, uneori, indol. Proprietățile saccarolitic sunt ele slabe.
Proteus are activitate Coli proteolitice ridicată. Acesta se găsește în 100% din probele de produse afectate de putrezire. În acest sens, având în vedere numele generic al Proteus, indicând „omniprezent“, vulgaris nume specific înseamnă „normal“, „simplu“.
Escherichia coli din genul Escherichia are capacitatea proteolitică scăzută. Deoarece nu hidrolizează molecula de proteină întreagă la stadiul de putrefacție este conectat la peptone, divizarea lor pentru a forma amine, amoniac, hidrogen sulfurat. Cauze de coagulare a laptelui, nu lichefiaza gelatina, are o activitate enzimatică ridicată pentru lactoză, glucoză și alte zaharuri.
Pentru cuantificarea microorganismelor proteolitice (cu excepția E. coli), folosind agar lapte. Se prepară separat agar apos 2% și lapte degresat. Ambele suporturi sunt sterilizate separat la 121 ° C timp de 10 minute. În timpul utilizării, agarul topit a fost adăugat un lapte degresat 20% și la cald după amestecarea temeinică amestecul se toarnă în vase Petri.
Pentru a prepara un agar apos în 1 dm3 de apă se face potabilă 20g agar fin măcinat și încălzit până la fierbere. După dizolvarea agar în amestecul fierbinte a fost filtrat printr-un filtru de bumbac, turnat în vasul la 50-100 cm3 închise cu dopuri de bumbac și sterilizate.
Pentru a determina cantitatea de bacterii proteolitice se realizează prin însămânțare 1 cm3 fiecare din diluarea produsului selectat în vase Petri și se toarnă lapte agar. Culturile sunt incubate la 30 ° C timp de 48 ore și apoi numărarea numărului de colonii de bacterii proteolitice (cu zone largi de lapte de albire).
Capacitatea de a scinda proteinele au de asemenea matrițe și actinomicete. Multe microorganisme proteolitice forma enzima lipază care cauzează descompunerea grăsimilor. Capacitatea lipolitică cea mai pronunțată de a avea mucegai, bastoane fluorescente și alte bacterii din genul Pseudomonas.
Ei sunt agenții cauzatori ai fermentația acidului butiric, care a dus la lapte de zahăr și săruri ale acidului lactic (lactat) sunt scindate pentru a forma butiric, acetic, propionic, acid formic, etil, butii, alcooli propil. Ele sunt capabile de proteine care degradează și asimila azotul din proteine, aminoacizi, amoniac și unii reprezentanți - azot molecular din aer.
Bacteriile de acid butirică aparțin genului Clostridium, unind 25 tipuri de anaerobi sol (Cl.pasteurianum, Cl.butyricum, Cl.tyrobutyricum și colab.), care au fost numiți anterior colectiv Cl. amylobacter.
Bacteriile de acid butirice sunt tije Gram-pozitive, de formă cilindrică, cu o dimensiune de 5-12 x 0.5-1.5 microni mobil până la sporulare. Capsulele nu formează spori și se află în faza terminală subterminal. Celulele au forma de cluburi, rachete de tenis sau lingura (Figura 31). Sporii păstrate la fierbere timp de 2-3 minute, nu mor în timpul pasteurizării. Înainte de formarea de spori in citoplasmă celulelor se acumulează granulozei - krahmalopodobnoe iod substanță colorată albastru.
Figura 31 # 8209; bacterii producătoare de acid butiric
Bacteriile de acid butirice sunt anaerobi obligatorii ai. Caracteristicile acestor microorganisme sunt efervescență și miros neplăcut al acidului butiric. Temperatura optimă de 30-35 ° C, limitele de temperatură de creștere a 8-45 ° C.
Într-o cultură de laborator universitar de bacterii producătoare de acid butiric sunt la un cartof mediu. În mic balon gât lung sau tub făcând câteva felii mari de cartofi crude, se toarnă apă 3/4 volum, s-a adăugat 2,1 g de cretă și pasteurizat la 80 ° C timp de 10 minute, apoi se incubează la 37 ° C După 1-2 zile se dezvolta fermentația acidului butiric.
In considerare cantitativă a brânzei spori de bacterii de acid butiric (bacterii mezofile anaerobe laktatsbrazhivayuschih) se realizează pe lactat mediu selectiv gros-acetat (Ch. 18).
bacterii cantitative de acid butiric cont, de asemenea, produc prin diluție limitativă, placare materialul de testat în eprubete cu lapte integral steril sau lapte degresat și parafină (2,1 g). După însămânțare tub a fost încălzit într-o baie de apă timp de 10 minute la 90 ° C, răcit la 30 ° C și se incubează timp de 3 zile. la o temperatură de 30 ° C
Prezența bacteriilor acidului butiric este determinată de formarea de gaz, miros de acid butiric, în prezența preparatului de spori microscopice de tije mari, oferind o reacție pozitivă în granuloase. Granulozei - substanța krahmalopodobnoe este o includere citoplasmatică și colorate cu iod (soluție Lugol) la o culoare albastră.
Clostridium au o activitate proteolitică bine definită și saccarolitic. zahăr din lapte fermentat, absorbi săruri ale acidului lactic (lactat) pentru a da un ulei, acid acetic, acid propionic, acid formic, o cantitate mică de etanol și o cantitate mare de CO2 și gaze cu H2. Ca urmare, formarea de gaz abundente, acestea pot provoca malformații mai târziu umflarea brânzeturilor.
În afară de anaerobă Clostridium fermentația acidului butiric poate provoca bacterii din genul Pseudomonas, în special bastoane fluorescente.
Enterococi numit lactic origine intestinală streptococi, adică. E. Ei sunt reprezentanți ai microflorei normale a intestinului uman și animal și eliberate în mediu în cantități destul de semnificative (în 1 g de fecale la 10 -10 9 persoane viabile), dar acestea sunt de aproximativ 10 ori mai puțin bacterii decât coliforme (CGB). In prezent, enterococii sunt considerate a fi a doua doar la microorganismele CGB sanitare indicative rezervoarele de apă ale studiului, în special eșantioanele de puțuri de apă, piscine, ape uzate, sol, articole de uz casnic.
Pentru enterococi includ două tipuri principale de familie coci Streptococcaceae, Enterococcus genul: Ent. faecalis (biovari Ent. liquefacieus și Ent. zymogenes) și Ent. fecium (biovar Ent. bovis).
În acest fel a făcut parte, anterior aparținând genului Streptococcus: E.durans, E.avium, E.gallinarum, E.casseliflavus, E.malodoratus, E.cecorum, E.dispar, E.hirae, E.mundtii, E .pseudoavium, E.raffinosus, E.saccharolyticus, E.seriolicida și E.solitarius. Astfel, genul Enterococcus cuprinde 16 specii de microorganisme.
Biovar E.liquefaciens de multe ori un rezident al cancerului de san, de aceea este numit mammokokkom (din mamelei Latină glândula -. Fier de lapte).
Enterococi sunt ovale sau rotunde diplococci în dimensiune 0,6-2 x 0.6-2.5 microni, lanțuri, uneori desprăfuire Gram-pozitive, spori și capsulele nu formează imobil. anaerobi facultativi bine multiplicat pe medii nutritive obișnuite, dar trebuie utilizat în medii de cultură cu inhibitori ai suprimarea florei însoțitoare (bacterii coliforme, Proteus și colab.). Cea mai bună creștere a fost observată cu adăugarea de glucoză în mediu, produse de drojdie și alți promotori de creștere. Atunci când cultivarea sa format un precipitat și opacifierea difuză se observă în medii nutritive lichide. media solide colonii enterococi sunt mici, gri-albastru, transparent, rotund, cu margini netede, convexe, cu o suprafață lucioasă. Pe agar cu sânge, în funcție de Biovariant ei pot da hemoliza (Ent. Liquefaciens), schimbarea culorii în jurul coloniilor pe brun-verzui, ca hemoglobina este convertit la methemoglobină (Ent. Faecalis). Temperatura optimă de creștere este de 37 ° C, limite - 10-45 ° C.
Pentru a determina enterococilor utilizat mediu de lapte cu polimixina de Kalina. 100 cm3 de 1,5% agar nutritiv (IPA) se adaugă glucoză - 1 g, drojdie dializat (extract autolizatului) - 2 cm 3. sterilizează la -112 ° C timp de 20 de minute; pH 6,0. Înainte de a umple în capsula Petri se adaugă 100 cm3 de mediu: Crystal Violet - soluție apoasă de 1,25 cm3, 0,01%; solide de clorură de 2,3,5-trifeniltetrazoliu (TTC) până la 10 mg; steril de lapte degresat - 10 cm3; polimixină -200 unități / ml.
Coloniile enterococi tipice pe acest mediu au o formă rotunjită, margine netedă, suprafață lucioasă, cu un diametru de 1,5-2 mm, o culoare roșiatică, cu zona de proteoliza pe un fundal albastru deschis.
Enterococi sunt hemoorganotrofami, tipul metabolismului lor de fermentație, se descompune în glucoză și manitol și gaz de acid, dar nu are activitate catalazei (opusă altor coci Gram-pozitive). Structura antigenică sunt uniforme și fac parte din grupul D clasificare Lensfild.
Caracteristicile enterococi din mezofil streptococi lactici Sherman prin teste sunt prezentate în Tabelul 18.
Tabelul 18 # 8209; Diferențierea enterococilor din streptococi