Prepararea frotiu de sânge
Acasă | Despre noi | feedback-ul
2.8.1 frotiuri de sânge Metodikaprigotovleniya
Metoda № 1: lamelă de sticlă steril atingând picătură de sânge la locul de injectare. Nu atingeți sticla pentru piele deget.
Metoda № 2: Sânge luat dintr-un capilar de sticlă individuale sterile Panchenkova Pătarea face sticla sfărâmată, punând-o la un unghi de 45 ° la diapozitivul în fața picăturii. După ce a adus sticla să renunțe la acest lucru, așteptați până când fluxul de sânge departe coastele lui de-a lungul, apoi o simplă mișcare rapidă a măcinarea este realizată din sticlă im--ed, fără a lua de la subiect înainte de a usca toate paie. Nu puternic apăsat pe sticlă. deoarece în timp ce celulele sanguine lezate.
Efectuat dreapta, frotiul are o culoare gălbuie (subțire) nu ajunge la marginile sticlei 1-1,5 cm și se termină într-o piesă ( „mustati“, „măturică“). Frotiurile au fost uscate cu aer și etichetate în creion (nume de scriere).
frotiu uscat Colorare efectuat după fixarea pe termen preliminar.
Cerințe pentru frotiu
picătură 1.Vsya de sânge ar trebui să fie utilizate pentru a murdări
2.Mazok ar trebui să ia aproximativ 3 \ 4 din slide
frotiu margine 3.Good ar trebui să fie exprimate
4.Mazok ar trebui să fie translucide și să aibă un ton gălbui
1 alcool .Metilovy (3-5 min) (Uniform)
2.Smes Nikiforov de părți egale de etanol absolut și eter (30 min).
3. Colorare zăvor mai - Grünwald (3 min) - (uniform)
Semnificația clinică a lichidelor de reținere: blocare previne celule roșii din sânge de la hemoliză și stabilește un frotiu pe sticlă.
Major vopsea hematologică:
albastru de metilen și un derivat al acestuia - azuriu I (Metilen azuriu) și azuriu II (un amestec de părți egale Azure I și albastru de metilen) la acid - eozină galben solubil în apă
Reactivi pentru colorarea frotiurilor Nocht. 1. Soluția de bază Azure II: 1 g de colorant a fost dizolvat în 1000 ml apă distilată. Lăsați în vase de sticlă de culoare închisă, timp de 12-14 zile la temperatura camerei și apoi utilizate. 2. Soluția de bază de potasiu eozină 1 g de colorant a fost dizolvat în 1000 ml de distilat, o apă izolată. Este lăsat în bol de sticlă-TION la temperatura camerei, timp de 12 până la 14 zile și apoi utilizate. 3. tampon fosfat (amestec Weisz) pH 7,4-7,5: amestecarea 0,49 g-ka Lija fosfat monocalcic anhidru (KH2 P04) și 0,909 g de fosfat de sodiu dibazic anhidru (Na2 HPO, t) și baia de apă distilată 1000 ml. Soluție eozina 4. Work-azuriu: amestecat înainte de utilizare de 25 ml din soluția stoc, Azure II, 20 ml dintr-o soluție de eozina de potasiu și 55 ml de soluție tampon (proporțiile de coloranți pot varia, acestea sunt plasate în loturi proaspete empiric prigotov-lenii de soluții stoc) .
Reactivi pentru colorarea frotiurilor Pappenheim. 1. O soluție de albastru de metilen eozină pentru Mayu - Grunwald. Când la prezența soluției finale de colorant poate fi preparat prin dizolvarea a 1 g de colorant uscat în 1000 ml alcool metilic. Solutia este gata pentru consum după 4 zile. 2. Lucru eozina soluție azuriu pentru Nocht.
Echipamente speciale. Cuvetă pentru fixarea și colorarea frotiurilor cu container shta-tivom (fără a utiliza tăvi de smalț stabilite pentru „șine“ ale perechii de panouri de sticlă tije conectate prin tuburi de cauciuc).
Fixarea frotiuri. Blocarea frotiuri sau turnat într-un vas sau castron cu gura largă astupate. frotiuri uscat cu aer au fost plasate într-un recipient care este coborât în celulă cu o clemă (sau pus într-un vas) timp de 5-10 minute. După îndepărtarea containerului este con cu sticla din celula (sau sticla este scos cu ajutorul unei pensete și plasate într-un stativ), sunt lăsate în aer să se usuce.
Colorare Nocht.
Fix-uscat frotiurilor Rowan, fără a scoate din recipient într-o cuvă a fost plasată într-o soluție de lucru de cerneală pentru o perioadă de timp aleasă pentru fiecare lot de colorant (20 până la 45 min). In absenta containerului mobil cu sticla incinte schayut orizontal pe „șinele“ (frotiu kver-xy) și a fost turnat cel mai mare strat (3-4 ml per frotiu) soluție de lucru de colorant. După îndepărtarea containerului din sticlă a celulei cu un colorant și premise-schayut-l într-o cuvă cu apă de la robinet (în absența cuvetei spălați vopseaua de ochelari fără a scoate-le din „șine“, apa de la robinet). frotiuri uscate pe aer.
Colorat Romanovsky - T și m e s
Produsă în același mod ca și pentru Nocht: ca un colorant utilizat gata hoață tracțiune Romanowsky-Giemsa, care ajută la temperarea înaintea upot diluat la rata de 1 picătură de cerneală per 1 ml de apă distilată (1:10). Timpul de colorare este stabilită empiric pentru fiecare lot but-gemeți colorant (25-40 min) = 30 min
pictura combinată May-Grunwald-Romanov-sky-Giemsa pentru Pappengemu.
Pe nefixate dye frotiu de încărcare a fost pipetată gata - opritor May-Grunwald, care reprezintă o soluție de albastru-eozină metilen în alcool de metilen, timp de 3 min. După 3 minute, o vopsea de acoperire hoț întindere adăugat într-o cantitate egală de distilate de rânduri și vopsire a continuat timp de 1 minut. După aceea, vopseaua se spală și se usucă cu aer frotiu. Frotiu uscat dokrashivayut Romanovsky soluție apoasă de vopsea proaspăt preparată pentru 8-15 min. (= 10 min).
Tehnica numărului de leucocite 2.9.1
Cel mai numeros grup de celule albe cuprind granulocitelor, adică granulare celule albe din sânge. Granulata, acestea sunt numite, deoarece citoplasma lor se găsește set-set de boabe mici. Prin celule albe sanguine granuloase cuprind eozinofilele, de exemplu, leucocite prin colorare cu coloranți acizi (persoană sănătoasă pe conturile lor (1 -5% din totalul celulelor albe), bazofile colorate cu coloranți bazici (în mod normal, nu sunt mai mult de 1% din numărul total de leucocite) și neutrofile , colorarea Xia colorant neutru și alcătuiesc majoritatea leucocitelor variază recent în gradul lor de maturitate și împărțit în tinere celule albe (0-1%), de vârstă mijlocie globule albe -. înjunghiere (1-6%) și mature sau neutrofile segmentate (47- 72%).
Eozinofile și bazofile sunt „transportatori“ importante biogen amine TION - histamina în exces care reacțiile alergice vyzy-Vaeth, manifestate în special sub forma de urticarie si astm.
O altă varietate de leucocite - agranulocytes, adică leucocite lipsite de granule fine, granule. Aceste monocite prin purtarea, care pot fi formate nu numai în măduva osoasă, dar, de asemenea, in ganglionii limfatici, elementele unui tesut co-edinitelnoy. Prin agranulocytes rang limfocite, formate de preferință în limfatiches-cal noduri. In monocite umane sanatoase co-stavlyayut C3-9%, limfocite - 19-37 din numărul total de celule albe din sânge.
Cu o activare puternică a hematopoiezei poate scapa I imature celule de leucocite din sânge (până la explozie).
WBC - este procentul diferitelor tipuri de leykotsitov.V apar în mod normal: neutrofile - palochkoyadernye- 1-6%. segm.- 47-72 și t. d
În procesele patologice în sânge poate detecta precursori și celule stab: metamyelocyte. și mieloblasti.
Creșterea de neutrofile din sânge în natură, dar pentru boli infecțioase acute, boli maligne de intoxicație, adică cuprind pe toți cei care tind să se introducă în corpul de microbi, produsele de acumulare în ea resturile celulare, substanțe străine (cunoscute ca neutrofilele în organism funcționează fagocitare și funcția bactericid). Este deosebit de pronunțată în leucemii. În sângele pacienților care suferă de leucemie, și așa-numitele teste leukemoid a relevat celulele normale albe și progenitoare - mielocite, promielocite și mieloblasti.
Apariția neutrofilelor imature în sânge (un număr mare de neutrofile stab, metamielocite tineri mielocite, promielocite) este cunoscut sub numele de deplasare stânga neutrofilice. Expresia lui reflectă severitatea procesului patologic. În multe infecții severe și a proceselor septice supurative modificat prin creșterea numărul de leucocite, numărul de neutrofile înjunghiate, metamielocite și mielocite. O astfel de schimbare nucleară din stânga are loc, în special cu angina, un acut-penditsite, colecistită, pneumonie severa, tuberculoza prefectura active, abces pulmonar, meningita purulenta, difterie, septicemie.
Un număr semnificativ de neutrofile cu nuclee crescut de segmentare caracterizat prin deplasarea la dreapta neutrofilice. Se observă în iradierii, unele alte boli.
Pentru că, în profunzime evaluare suplimentară a formulei leucocitare forfecare (stânga, dreapta) recurg adesea la cuplu curse indicele de forfecare (SI) în neutrofile structura de bază diferite. Sub indicele de forfecare este de obicei înțeleasă ca fiind raportul dintre (mielocite + metamielocite + neutrofile stab) / neutrofile segmentate. Rata IP este 0,06.
Când leykopenicheskih reacții au scăzut cantități de neutrofile în sânge. Acest lucru este observat la hipo-și anemie aplastică, boala radiatii. Pentru aceste stări sunt caracterizate prin producerea de celule opresiune de către măduva osoasă, SIS utilizarea tematică a unor medicale pre-Paratov: sulfonamide, amidopirina, hipnotice și altele.
Modificări în conținutul individuale
celule albe din sânge
2.Eozinofily. Creșterea - eozinofilie - eozinofile sanguine mai mult de 5-6%. Eozinofilia asociate cu antihistaminic-antitok-clasică și fagocitare de eozinofile. Eozinofilia-vstre chaetsya, de obicei, cu diferite boli alergice și sindromul-max :. astm bronșic, urticarie, edem angioneurotic, etc. Baza pentru boli constă alergeni eozinofile eozinofilie de aspirare natura histamină. Moderat observat eozinofilie-poate fi administrat în timpul recuperării din Zabolev-TION infecțioase și inflamatorii ( „recuperare zori“). Crescută a eozinofilelor la 10-35% observată la dat penicilină. Descrie cazuri de eozinofilie autoimune, atingând uneori 60-70%, a cărei natură rămâne clorhidric necunoscute. Eozinofilia este de asemenea observat în aceste boli de sange: Chlamydia, și leucemie mieloidă cronică (creștere este absolut primul număr de eozinofile în procentul normal - bazofile, Asociația eozinofilica). Diminuarea - hypoeosinophilia sau aneozinofiliya - are loc atunci când: boli infecțioase acute în mijlocul bolii în diferite situații de stres (infarct miocardic, da), sindromul Cushing, leucemie acută (eozinofilica basophilic-disociere), B | 2 anemie -folievo-deficiență (până la tratament).
3.Neytrofily. Creștere - neutrofilia - apare când Zion procese inflamatorii sau infecțioase cronice, leucemie (leucemie mieloidă cronică și mieloze) leukemoid reacții. Acest lucru se întâmplă de obicei, schimbare-coș nuclear al neutrofilelor la stânga, adică crește numărul de neutrofile este invizibil-împerecheat - forme de străpungere și, chiar și tineri mielocite în sânge ne-rifericheskoy (neutrofile imature în leucocite pune cotele unui catâr-stânga). De obicei, acesta este combinat cu o creștere a numărului total de celule albe din sânge se numește regenerare schimbare stânga. Izves-spoturi și deplasarea la dreapta - reducerea numărului de neutrofile stab, și a crescut forme gipersegmentirovannyh de pescuit continut (pentru B12 -fo-Lie-deficit de anemie). Reducerea numărului de neutrofile - neutropenia - de obicei asociată cu o scădere a numărului de globule albe observate la opresiune funcțională sau organică granulocytopoiesis. Neutropenia apare în infecții virale, bryush dl febră, bruceloza, malarie, sepsis sever, B | 2 -folievo-deficit de anemie, de droguri leykopeniyah aleykiliyah (anemie aplastică). Spre deosebire de schimbare a spus nucleare de regenerare a neutrofilelor lăsat acolo și degenerative deplasare la stânga a neutrofilelor. Acesta se află în faptul că doar crește numărul de forme de bandă de neutrofile (nu tinere), modificări degenerative (vacuolizarea citoplasmei, pycnosis). Atunci când se întâmplă acest lucru off-line neutropenie și leucocitoza. schimbare degenerativ la stânga are loc atunci când supresia măduvei osoase (tifos, tuberculoza), și sugerează reducerea de apărare al organismului.
4Limfotsity. Creștere - limfocitoză relativă atunci când toate leykopeniyah neutropenie dependentă (febră tifoidă, gripă); limfocitoză absolută - este adesea observată în timpul recuperării de boli infecțioase, precum tuberculoza in benigne, sifilis, tuse convulsiva, leucemie limfocitară. Reducere - limfopenie relativă - cu (pneumonie cerc, infarct miocardic) leucocitoza, leucemia mieloidă; limfopenie absolut rare (boală radiații).
5.Monotsity. Creștere - monocitoză relativă - are loc în aceleași cazuri ca limfocitoză relativă (neutropenie); monocitoză absolută are loc în timpul recuperării de boli acute infecțioase, helminthiasis, infecții cronice - tuberculoza, sifilis, mononucleoza infecțioasă. Diminuarea monotsitopeniya - apare in sepsis sever, mielo relativă - și limfom.