Factorii necesari pentru transcrierea

1.Matritsa. care este nepereche catena ADN. Spre deosebire de transcriere replicare are loc într-un fragment de ADN particular.

2.Substraty. Pentru sinteza ARN necesită patru tipuri de ribonucleotide-5'-trifosfații ATP, GTP, CTP, UTP. Diferența dintre legătura energetică # 945; și # 946; fosforic -ostatkami acidă furnizează energie pentru procesul de fuziune.

3. Transcripția este mediată de enzima ARN polimeraza dependentă de ADN. Dlyasinteza ARN complementar cu o catenă de ADN, molecula de ADN elicoidal înnădite într-o regiune scurt pentru a forma transcripțional „balon“. În timpul transcripție în fragmentul de E.coli derulat aproximativ 17 pb. Deoarece ADN-ul este dublu-catenar molecula, mișcare bule de transcriere determină răsucirea moleculei de ADN. Helix a ADN-ului este limitată la proteinele de legare a ADN-ului. Ca rezultat, mișcarea ARN-polimerazei supercoils pozitive au format înainte cu bule de transcriere și supercoils negativ în spatele. Acest proces este observat in vivo și in vitro, in bacterii.

ARN polimerază E.coli este formată din 5 subunități (bb a2 „# 969;, G.M. 390.000) și a șasea s-subunitate. Enzima este compus din 6 subunități, numite holoenzimă. Se constată că subunității b este implicată în legarea trifosfați de ribonucleotide, B'subunitatea - în legarea enzimei la matricea ADN-ului, o subunitate este implicată în inițierea transcrierii; funcție # 969; subunitate nu este cunoscută. Structura fără subunități de enzime s-numita ancoră-enzimă. Acest factor este o secvență strict definită de nucleotide în promotorul contribuie la o legare mai puternică a polimerazei la secvențe specifice de ADN promotor și participă la dezvelirea dublu helix ADN-ului, astfel încât unul dintre circuitele ar putea servi ca șablon. s-subunitate nu este implicată în etapa de alungire. Diferite s-subunitare recunosc secvențe de nucleotide diferite in promotor. Cele mai multe s-au subunități s 70 (MM 70000).

În celulele eucariote, există trei polimerază ARN nuclear - I, II, III. ARN polimeraza I este în nucleol și în principal implicat în biosinteza ARNr; ARN polimeraza II - realizează sinteza ARNm și ARN polimerazei III este responsabil pentru sinteza ARNt si 5S-ARNr.

sinteza ARN implică trei etape: inițiere, alungire și terminare.

1. în etapa de inițiere a polimerazei ARN folosind s-subunitate acționează printr-o serie de disociere aleatoare și asociere găsește promotor are loc aderarea la molecula de ARN total a polimerazei. După sinteza lanțurilor de ARN de aproximativ 8 ribonucleotide s subunitatea holoenzimă este separată și unit cu o altă moleculă de ARN polimerazei. lanțuri ARN sintetizati au la capătul 5 'este în mod tipic reziduul de GTP sau ATP (rrrA sau rrrG). Spre deosebire de primeri ADN sintetic în acest caz nu este necesar. În consecință, ARN catena nou format are o grupare trifosfat la capătul 5 'și o grupare OH liberă la capătul 3' terminal.

2. La etapa elongație a ARN polimerazei sintetizează o catenă de ARN în direcția 5'®3 „antiparalel la catena matriță a ADN-ului (adică, ADN-ul șablon este copiat în direcția 3'®5“). In timpul transcriere a nou sintetizate formele catenare de ARN un porțiuni scurte temporare de helix hibrid ADN-ARN. Imediat ce următoarea bucată înnădite porțiunii ADN transcrisă își recapătă conformația dublu catenar.

Rata maximă de alungire este de aproximativ 50 de nucleotide pe secundă. Spre deosebire de ADN-polimerazei ARN polimeraza nu verifică corectitudinea lanțului nou polinucleotide. În acest sens, fiabilitatea transcrierii semnificativ mai mică decât fiabilitatea replicare. Rata de eroare în sinteza ARN-ului este de aproximativ o eroare în 10 4 -10 5 nucleotide, 10 5 ori mai mare decât pentru sinteza ADN-ului. fiabilitate mult mai mici ocoleste sinteza ARN celular care o gena este sintetizat cu mai multe copii ale transcripte ARN.

3. Încetarea semnalului de sinteză a moleculei de ARN este o secvență specifică de nucleotide, situate în interiorul catenei de ADN de codificare. procesul de terminare în eucariotele nu sunt suficient studiate. La terminare există E. Coli două mecanisme: 1) cu o proteină specifică, numită factor r-2) mecanism r independent.

După terminarea sintezei complexului ancorei-enzimă lanț ARN este separat de matrița de ADN și contactarea unei noi molecule s-factor poate recunoaște regiunile promotor adecvate și a trece la sinteza de noi molecule de ARN. Aceeași catena de codificare poate fi simultan citit mai multe molecule ale ARN polimerazei, dar procesul este ajustat astfel încât în ​​orice moment dat fiecare moleculă transcrie diferite segmente de ADN.