Diagnosticul de laborator al infecției cu HIV, referate gratuite, eseuri și disertații

1. Determinarea virusului și antigenele sale sau copii ARN ale materialelor de la pacient sau infectate cu HIV.

2. Diagnosticul serologică bazat pe detectarea anticorpilor specifici la suprafață (gp120 și gp41) și interior (p18 și p24) proteinele HIV.

3. Identificarea patognomonice (specifice) pentru schimbările de infectare cu HIV in sistemul imunitar.

4. Diagnosticare laborator infecții oportuniste (boli asociate cu SIDA).

1. Diagnosticul virusologic. Materialul pentru izolarea HIV -
T-limfocite măduvă de sânge, oase, leucocite, ganglionii limfatici, țesutul cerebral, saliva, sperma, lichid cerebrospinal, plasma de sânge. Materialul rezultat Infect imortalizate pentru limfocite T (H9). Indicarea HIV în cultura celulară realizată de CPP (a symplasts formare) și tehnici de imunofluorescență, microscopie electronică, pentru ...
exprimat activitatea revers transcriptaza. Metode moderne de cercetare permit una pentru a detecta celulele limfocite infectate cu 1000.

Detectarea antigenelor virale infectate limfocitelor T se realizează cu ajutorul anticorpilor monoclonali.

In ultimii ani, critic în determinarea severității și prognosticul HIV este definit ca numărul de copii de ARN HIV în plasma sanguină prin reacția în lanț a polimerazei (PCR) - așa-numita încărcătura virală. Dacă pacienții care nu primesc tratament, incarcatura virala este sub limita de detecție (aceasta este mai mică de 5000 de copii ale ARN HIV în 1 ml de plasmă) indică absența progresiei sau incetini progresia bolii. Contagiozitate în timp minim. încărcătura virală mare (mai mult de 10 5 copii ale ARN / ml) la pacienții cu un CD4 limfocite în 300 l de 1 indică întotdeauna progresia bolii.

2. diagnosticul serologic. În prezent, cea mai răspândită.

Material pentru studiu - ser.

Diagnosticul serologic al infecției cu HIV în ELISA prima faza, folosind sisteme de diagnosticare immunoenzyme standardul. Metoda de screening. Principiul metodei se bazează pe versiunea clasică ELISA directă. Imunoabsorbant pentru antigene HIV sunt plăci de polistiren. La efectuarea unei sonde de placă de testare, la o diluție de ser și se incubează. După legarea la plăcile AT AG spălate triply din proteinele nelegate. După aceea, placa de puțuri de luare de conjugat - anti-imunoglobulină umană marcat cu o enzimă. Formarea unui complex specific AH + AT identifică introducerea substrat enzimatic (orto-fenilendiamina și soluție de peroxid de hidrogen). Ca urmare a enzimei pe substrat variază proporțional substanțe colorante identificat mediu în anticorpii eșantion. Rezultatele iau în considerare un fotometru. Prezența anticorpilor virus-specific în ser, în viitor, trebuie să fie confirmată prin examinarea metodei blotting imunitar.

Blotul a imun - testul de control pentru a detecta și diferenția între anticorpi la diferite proteine ​​HIV. Ea se bazează pe separarea proteinelor HIV în greutatea moleculară prin electroforeză în gel de poliacrilamidă. In următoarele antigene HIV sunt transferate pe membrană de nitroceluloză. Apoi, membrana de nitroceluloză a fost tratat cu antigene HIV testate ser. Când acest anticorpi virus-specific formează un complex cu un anumit AG (gp120, gp41, p24 p18). Faza finală a studiului - detectarea complexelor antigen-anticorp cu diferite proteine ​​HIV. La aceasta s-a adăugat în conjugat - proteine ​​anti-umane, enzimă marcate sau eticheta radioizotop. În acest caz, la site-urile de etichete fixe complexe imune. Astfel, în serul pacientului detectat (sau nu a fost detectat) anticorpi virus-specific tuturor sau mai multor antigene HIV.

3. Evaluarea statusului imun. Studiul își propune să identifice:

1) Raportul de celule CD4 / CD8 (normal = 2> în SIDA - 0,5 și <);

2) conținutul celulelor CD4 (<200 клеток/мл.);

3) prezența leucopenie, trombocitopenie, limfopenie;

4) crește concentrația de Ig A, Ig G și CIC în serul sanguin;

5) reducerea limfocitar răspuns proliferativ la mitogeni de celule T;

6) absența reacției DTH a pielii mai multe antigene anamnestici (starea de anergie).