Colorare, QC - microtomie
colorit
Colorarea secțiuni histologice bazate pe elemente de țesut de afinitate inegale la anumiți coloranți. Nucleele celulare au fost colorate cu un miez capabil, și citoplasmă - culorile acide. Prin urmare, distincția principală sau nucleară, și vopsea acide sau difuze.
Cel mai adesea în practica uzuală de patologie se aplică secțiuni de culoare cu hematoxilină-eozină, conform Van Gieson, Perls, Sudan III și altele.
Hematoxilina-eozină. secțiuni colorate în vase Petri mici sau pahare. Această metodă este folosită pentru vopsirea secțiunilor preparate prin orice metodă. In aceasta celula nuclee dobândi un albastru-violet sau albastru închis și citoplasmă și substanța fibroasa - albastru sau roz-roșu deschis. Grăsimi și lipide nu sunt vopsite. Hematiile de mamifere, deoarece acestea nu conțin nuclee sunt colorate doar cu eozină.
felii colorate în vase Petri produs după cum urmează.
1. felie de ac de disecție se transferă din apă în soluție timp de 2-5 min hematoxilina.
2. Se clătește în apă, 2-5 min.
3. Cufundați pentru 10-20 s în soluție de acid clorhidric 1% la 70 ° alcool (în cazul feliei este puternic hematoxilina repictata, trebuie păstrate în această soluție este ceva mai lungă).
4. Se spală în apă pură timp de 5-10 minute.
5. Se spală ușor în soluție alcalină (într-un borcan de apă, se adaugă 1-2 picături de amoniac lichid) timp de 10 minute.
6. Se spală din nou cu apă curată timp de 10 - 15 min. Dacă tăietura după apă alcalină spălat suficient, el interogat slab eozină.
7. Stain cu eozină timp de 3-5 min.
8. Se clătește în apă timp de 1-2 min. 280
9. deshidratate în alcooli de creștere a tăriei - 75, 90, 100 °. În cazul în care reducerea repictate eozină, ar trebui să fie un pic mai mult pentru a păstra în 75 ° alcool.
10. antireflectant karbolksilole.
11. Cu ajutorul unei spatule și se taie acul este transferat într-un diapozitiv de sticlă.
12. Se usucă hârtia de filtru.
13. La secțiunea picătură se aplică sau balsamic canadian de brad si acoperite cu o lamelă de acoperire.
Pictura lui Van Gieson. În secțiunile colorate cu Van Gieson, țesut conjunctiv este vopsit în roșu aprins, restul materialului - galben sau gri-galben. Nucleele sunt colorate în negru sau violet închis.
Colorație produs după cum urmează.
1. Secțiunile au fost intens colorate cu hematoxilina (Hematoxilină mai bine Weigert) și clătite cu apă.
2. Imediat picrofucsin transferat în 3-5 minute (amestec de soluție apoasă saturată de acid picric - 150.0 și o soluție apoasă saturată de fucsin -3,0-5,0).
3. spălat rapid în apă (extracte de apă de cutoff magenta).
4. deshidratată alcool 95 ° timp de 1-2 minute.
5. înălbire în karbolksilole și încorporate în ulei de brad ca atunci când se colorează cu hematoxilină și eozină.
Acoperirea din Sudan III. Sudan III - neutru azokraska solubil în alcool, acetonă și grăsimi nu sunt solubile în apă. Colorarea Sudan III produs pentru determinarea secțiunilor de grăsimi și lipide. Echipament de vopsire urmează.
1. Secțiunile congelate plagued transferate la 0,5 1 min la 50 ° alcool.
2. Secțiunile au fost plasate în soluție svezhefiltrovanny Sudan timp de 10-20 min.
3. clătite cu alcool 50 ° timp de 0,5-1 min.
4. se spală cu atenție cu apă timp de 10 - 15 min.
5. Secțiunile au fost colorate cu hematoxilină alaun Ehrlich sau Boehmer.
6. Se spală cu apă timp de 3-5 minute. Revopsit în secțiunile hematoxilină diferențiate în soluție apoasă 1% de acid clorhidric, se spală cu apă alcalină și apoi cu apă pură.
7. constând în glicerol sau glicerol-gelatină.
8. Se acoperă geamul de acoperire.
de control al calității
pregătirea histologică a oricărei forme trebuie să îndeplinească următoarele cerințe:
1. Păstrați structurile de stat in vivo;
2. Pentru a fi destul de subțire și transparent. Pentru a-l studia sub un microscop cu lumină transmisă.
3. Fii un contrast care este de a fi studiate la microscop a structurii trebuie să fie clar definite;
4. Pregătirile pentru microscopie cu lumină trebuie să fie menținută pentru o lungă perioadă de timp și folosite pentru re-examinare.