Structura ADN și ARN

1. Molecula de ADN este o spirală formată din două lanțuri polinucleotidice de torsiune în raport cu cealaltă și despre comună axa (fig. 3.1).

2. Structura primară a lanțurilor ADN - este ordinul dezoksiribonukleozidmonofosfatov interlace (dNMP) în lanțul de polinucleotide. Mononukleo-Chida comunică între ele 3“, 5'-fosfodiester obligațiuni-TION. Capetele lanțurilor polinucleotidice diferă în structură: gruparea fosfat 5'-end situat la capătul Z'catenei - liber OH-grup.

3. Lanțul polinucleotide într-o moleculă de ADN dublu catenar aranjate antiparalel. Se referă în lanț inul sunt ținute împreună prin legături de hidrogen între baze complementare nitros E A-T și G-C. baze complementare se află într-un plan care este substanțial perpendicular pe axa principală a elicei.

Între bazele unei molecule dublu catenară având interacțiuni hidrofobe care stabilizează dublu helix.

Lanțuri sunt complementare, dar nu sunt identice între ele, compoziția nucleotidică a diferitelor circuite.

4. Fiecare moleculă de ADN este ambalat într-un cromozom separat. Cromozomii contin o varietate de proteine asociate cu secvențe de ADN specifice. Toate leagă ADN-euka proteine Ryota pot fi împărțite în 2 grupe: histone și proteine non-histonice. Un complex de proteine cu ADN-ul nuclear al celulelor este numit cromatinei.

6. Proteinele non-histonice - sunt diferite tipuri de proteine evaluate de control al suspensiei, care se leagă la secvențe ADN specifice și enzime implicate în biosinteza matricei.

7. Structura primară a ARN-ului - o procedură pentru ribonukleozidmonofosfatov întrețesere (NMP) în lanțul de polinucleotide. Mononucleotidele legate împreună 3“, obligațiuni 5'-fosfodiester. Distinge ARNt, ARNr și ARNm; toate tipurile de ARN au un lanț de polinucleotide.

8. porțiuni selectate ale lanțurilor de ARN formează un ralizovannye spin-loop - „ac de păr“ - prin legături de hidrogen între bazele azotate complementare A-U și G-C.

1. Pentru a izola ADN-ul din omogenatul a fost îndepărtat fragmente și membranele organitelor celulare prin centrifugare. Proteinele sunt distruse
proteaze extrase din soluție (proteinaza K cel mai frecvent utilizate). ADN-ul a fost apoi precipitat, de exemplu, cu etanol și după îndepărtarea supernatantului
lichid ADN-ul a fost dizolvat într-o soluție tampon.

2. Molecula de ADN conține de dimensiune medie 150 000 000 de perechi de baze și are o lungime de 4 cm.
Prin urmare, moleculele de ADN sunt sensibile la forțele de forfecare care apar în soluție și în procesul de izolare ADN din țesuturi ea ruetsya fragment. moleculă de ADN obținut este mult mai puțin originală, dar încă foarte mare - mii

și dacă zecile de mii de perechi de baze. Astfel de molecule sunt incomod pentru cercetare, și ei trebuie să fie în plus £ ragmentirovat.

Pentru fragmentare folosind restricție - enzime izolate din bacterii. In bacterii, aceste enzime sunt implicate în distrugerea străinului pentru ADN-ul lor. Enzimele de restricție „recunosc“ secvență specifică de 4-6 nucleotide (situsuri de restricție), care se găsesc în ADN-ul uman. Există mai multe enzime de restricție diferite, fiecare dintre care „învață“ site-ul său de restricție (fig. 3.3).

Folosind un set de enzime de restricție poate tăia o moleculă de ADN în fragmente de lungime dorită. De exemplu, pentru studierea structurii primare a fragmentelor adecvate de aproximativ 300 de perechi de nucleotide bp Prin urmare, întregul ADN molecula 150.000.000 bp Ar trebui să fie tăiate la 500 000 de bucăți și fiecare dintre fragmentele studiate separat.

reacție în lanț a polimerazei (PCR). Constând conferinței Denia unele de cercetare necesită un număr mare de ADN bine purificat-Vysokomol acous-. Metoda PCR face posibilă pentru a sintetiza selectiv in ADN-vitro și porțiuni mici, timp de 3-4 ore pentru a obține mai multe copii ale testului Milli nou fragment. Obiectele de a izola ADN-ul poate fi sânge, biopsie tisulară, saliva, urina, lichid amniotic, etc. Detaliu metoda și aplicarea sa în ADN-ul diagnostic vor fi discutate în subiect 3.10.

Hibridizarea. Pentru a studia specificitatea speciilor de metode de hibridizare de acid nucleic este utilizată. Ea se bazează pe abilitatea ADN-ului la Denaturarea sub încălzire (80-90 ° C) și renativatsii răcire ulterioară. Puteți utiliza metoda de ADN-ADN și ADN-ARN. Metoda Hibridizarea poate stabili asemănări și diferențe în structura primară a acizilor nucleici din probe diferite.

Cele mai populare:

Tratamentul bolilor de sex feminin Tratamentul nbspnbspnbspnbspnbspnbspnbspnbsp imbinarilor nbspnbspnbspnbspnbspnbspnbspnbsp DENTAR TRATAMENT