Pentru a studia morfologia microorganismelor

Pentru a studia morfologia microorganismelor: a) prepararea de medicamente, b) agenți de colorare.

microorganisme Studiere morfologie.

Bacterii. Morfologia bacteriilor depinde de condițiile de creștere în mediu nutritiv, temperatură și alți factori. Cel mai tipic al morfologiei bacteriile din culturi tinere. Forma bacta-RII împărțit în formă sferică, tijă în formă și încrețite.

Proprietățile morfologice includ nu numai forma, ci și dimensiunea celulelor, prezența sporilor și capsulelor, mobilitatea și natura bacteriilor culoare-ki Gram. Pentru a studia morfologia bacteriilor prezente în produsul laborato- Ries-finite.

Prepararea medicamentelor. Preparatele (frotiu) au fost preparate din culturi bacteriene. Cultura pură bacteriană - este într-o celulă microbiană descendenți, adică rasplodka un tip de micro-ba (fără alte impurități), crescute pe un mediu nutritiv ...

La prepararea de medicamente dintr-o cultură de bacterii cultivate pe medii nutritive, trebuie să urmați regulile de sterilitate. tuburi de cultură luate în mâna stângă este plasat între degetul mare și arătător și a avut loc într-o poziție înclinată. bucla Bacto-riologicheskuyu (metal sau platină sârmă pe tija), luând mâna dreaptă și se calcinează în flacăra ars-ki sau lampa spirit. Degetul mic de la mâna dreaptă este îndepărtată dop de bumbac-tifon din tub și țineți-l fără a atinge-ing surround de obiecte în jurul flăcării arzătorului. Marginile tubului ușor obzhi-ait flacăra, făcând buclă sterilă într-un tub de testare, se răcește, fără a atinge pereții interiori. Apoi câștigul o cantitate mică de cultură, bucla este îndepărtată din tubul care este astupată, care transportă prin flacără pre-arzător. Wading-ku pus într-un trepied și să înceapă să frotiu de pregătire.

Pentru prepararea preparatului din bulion de cultură la un loc curat, degresată picătură de sticlă diapozitiv se aplică cu o buclă sterilă și este suspendată uniform distribuie pe suprafața de sticlă sub formă de dimensiune frotiu 1.5-2.5 cm.

În cazul în care medicamentul este preparat dintr-o cultură crescută pe un mediu solid, prima pe sticla cauza o picătură de apă sterilă, și apoi, în picătură contribuie cu o cantitate mică de cultură și triturat.

După aplicarea culturii pe flacoane din sticlă calcinate în flacăra arzătorului și produsul este uscat în aer, apoi fixat pe flacara efectuarea de 3-4 ori cu spatele sticlei (cursa în sus), prin flacăra arzătorului. La fixarea microorganismelor mor și sunt atașate la sticla. Mort stand-ing pictat mai bine decât vie.

Acoperirea de droguri. specimene fixate au fost colorate pentru că atunci când este privit sub un microscop frotiuri necolorate celule microbiene nu sunt vizibile. Pentru colorarea bacterii Laboratories riyah-lucrătorilor utilizate (apoase), soluții de coloranți de anilină (albastru de metilen, fucsin miez, Șofranină, malachit verde etc.). Vopseaua se toarnă în sticle speciale cu picurator.

Bacteriile colorate cu metode simple și complexe.

Metoda de vopsire simplă se efectuează după cum urmează: pe-Fix Rowan tampon aplicat 2-3 picături de soluție apoasă de colorant la (de exemplu, albastru de metilen, sau magenta) și colorate timp de 2-3 minute. Apoi se spală vopseaua, se spală bine cu apă medicament vayut uscat și între foi de hârtie de filtru și examinate la microscop. Pentru agenții de gătit și colorare sunt utilizate pentru setarea agenților de spălare (Fig. 2). Bottle este plasat pe suport, se spală preparatele podului se află pe cupa de scurgere.

Când metoda coloratie complicată realizată bi-inel sau mai mulți coloranți. bacterii complexe colorare metode se bazează pe proprietățile fizico-chemic cal ale celulelor microbiene. Aplica-le, sunt pentru un studiu detaliat al structurii bacteriilor și a diferențelor lor. Cea mai comună metodă de vopsire bacterii complexe este metoda Gram, propusă în 1884. Pentru Gram pata un frotiu fixat pe o bandă de hârtie de filtru este plasat, violet de gențiană aplicat 2-3 picături de 1-2 min,

Hârtia îndepărtată cu ajutorul unei pensete, drenată de vopsea și reziduul a fost turnat 2-3 picături de soluție Lugol timp de 1-2 min. Apoi, soluția a fost golită și un frotiu se aplică câteva picături de etanol rectificat 30-40 s. Apoi frotiul a fost spălată cu apă și colorate cu magenta (2-3 picături de soluție timp de 1-2 min). Medicamentul a fost spălat bine cu apă și se usucă cu hârtie de filtru și examinat la microscop cu obiectiv de imersie.

Unele dintre bacterii prin metoda de colorare Gram în culoarea purpurie (Gram-pozitive), cealaltă - de culoare roz (gram-negativ). Diferența se datorează colorarea inegale a bacteriilor compoziția chimică a peretelui celular. Bacteriile gram pozitive murein mai lungi (până la 95%) decât în ​​Gram (5-10%).

1) Pereții celulari ai murein bacteriene gram-pozitive asociate în principal cu polizaharide, printre ele ocupă un loc important de acid teicoic. O astfel de compoziție chimică a peretelui celular ține ferm vopseaua violet și decolorat cu alcool.

Pereții celulelor de bacterii gram-negative și murein asociate în principal cu lipide. Acid Teyhoenye nr. Celulele microbiene ale acestor bacterii nu este capabil să mențină cu fermitate o culoare violet. In tratamentul alcoolului decolorat și magenta colorare suplimentară conferă celulei culoarea roz.

Colorarea disputa. Pentru colorarea disputa în laboratoarele Paul adesea formează o metodă de Muller, Shsffera-Fulton și colab.

Metoda lui Muller este după cum urmează. Pe frotiul fixat deasupra flăcării se aplică câteva picături de soluție apoasă 5% de acid cromic timp de 3-5 min. Apoi, se spală cu apă și se usucă. Plasat pe banda frotiu de hârtie de filtru și 3-4 picături aplicate Peel fucsin carbolice colorate cu reincalzire (înaintea vaporilor apariție-TION) în decurs de 3-5 minute. Vopseaua se spală și se frotiul decolorat cu soluție de acid sulfuric 5% timp de 30-40 de secunde. Unge din nou, se spală cu apă și colorate cu soluție de albastru de metilen, timp de 1-2 mim. După spălare cu apă și uscare, hârtie de filtru Valnju frotiu examinat la microscop. Sporii sunt colorate roșu, partea vegetativă a celulei - in albastru.

Metoda Schaeffer-Fulton este după cum urmează. Frotiul fix colorat cu soluție apoasă 5% de malachit verzi încălzite până când vaporii timp de 1-2 minute. preparat a fost apoi spălat în continuare cu apă și colorate cu 0,5% safranina într-o soluție apoasă timp de 1 min. reziduurile de cerneală Smy-vayut apă și se usucă cu tampon de hârtie de filtru. Microscopia sub microscop uita sporilor verzi, forme vegetative - roșu.

Acoperirea capsulelor. Laboratoarele desfășoară adesea studii pentru a identifica depozitele de capsule. Capsula este slab percepută de culoare și metode simple de colorare nu este detectat. Capsule bine Shiva okra metoda metoda Romanowsky-Giemsa Muromtseva et al. Romanowsky-Giemsa este după cum urmează. frotiu fix colorat cu vopsea fabrica de fabricație, care constă din azurie și eozină. Vopseaua se diluează cu apă de 1:10 și vayut timp de 20-30 min pictat-medicament. Apoi frotiu se spală, se usucă cu hârtie de filtru. Capsula este vopsit în roz, corpul celulelor microbiene - în albastru.

Conform Metodei Muromtseva medicament fix pătat vopsea terminat Muromtseva 20-30, se spală cu apă și se usucă. Capsulele sunt vopsite în roz pal, celule microbiene - în albastru închis.

Matrite. Pentru a studia morfologia preparatelor din ciuperci au fost zdrobite de picături, și pentru a determina mobilitatea microbi - mijloace de cădere zdrobit și agățat picătură. Apoi, medicamentele examinate sub un microscop de lentile-TION 8 și 40 la condensator ușor coborât.

Metoda picătură concasat este pe baza următoarelor criterii. La mijlocul lui smântânit pur diapozitive filmate buclă bacteriologic picătură Coy culturii microbiene crescute într-un mediu nutritiv lichid, cu atenție și acoperite cu o lamelă de acoperire. Arunca un strat subțire umple spațiul dintre capac și sticlă obiectul NYM.

Pentru prepararea preparatului dintr-o cultură de microbi matur TION pe un mediu nutritiv dens aplicat inițial pe o picătură de sticlă de apă sterilă și apoi în a face cantități mici de microorganisme studiate și acoperite cu o lamelă de acoperire.

Agățat drop metoda este după cum urmează. Cultura microorganismelor determina bucla bacteriologic pe foaia de sticlă, și se aplică pe o lamelă de sticlă cu locașul (orificiul). Marginile sondelor unse în prealabil cu vaselina pentru a atașa sticla capacului. Vizualizarea la microscop pentru preparare este plasat pe lamelei scenă de sticlă în sus, t. E. Lentila. Picătură atârnă liber în Lune, și pentru o lungă perioadă de timp nu se usuce, pentru a permite o lungă perioadă de timp pentru a observa mobilitatea celulelor microbiene.

Studiind morfologia ciupercilor pe o lamelă de sticlă, se aplică o picătură de apă și de două culturi ace preparoval-TION (ace încorporate într-un băț de lemn) pentru a face o mică bucată de miceliu de fungi. Lui atenție împărțit în pahar fără a distruge hifelor, sporangiofori, conidiofore, sticla capac acoperire vayut și examinate la microscop.

Mucor (capitatum Mold) - matrițe de celule individuale. Sporangiofori aranjate individual, rar arbuști. Brăzdat miceliu în partea superioară formează o multitudine de capete negre. Sporii gri, rotunde sau ovale, cu translucide microscop.

Penicillium - matrite conidiofore sunt partiții, ramificate în formă de perii, sunt dispuse la capetele ramurilor sterigmata, iar pe ele un rotunjite spori, netede în lanțuri (conidii). Miceliu este scăzut, crește într-un mediu nutritiv. colonii de mucegai sunt colorate în verde.

Aspergillus - mucegai ciuperci, konidienosets unicelulare fără partiții. Sterigmata situat pe îngroșarea în formă de club de conidiofore. Din sterigmata se extind în lungul sporilor raze (conidia) forma rotundă neagră.

mucegai lactate - miceliu este de culoare albă cu partiții. End break strand miceliu, spori formând o circulară, un oval, și forme dreptunghiulare clorhidric (oidii).

Acinar mucegai - Konidienosets multicelulare. Plecare de la el în jurul conidia oval verde-oliv Raspaud Laga acumulărilor acinare. colonii de mucegai sunt negre.

Ciocolata mucegai - Conidiile de culoare maro ciocolatiu, formează lanțuri lungi în formă de bile.

Pentru a studia morfologia microorganismelor - 3.5 din 5 bazat pe 4 voturi