particule Metodologia citologie de țesuturi și organe în domeniul științei criminalistice
Institutul de Cercetare de Medicină Legală (Dir - .. profesorul VI Prozorovsky) al Ministerului Sănătății URSS, București
Particulele Metodologia citologice de țesuturi și organe cu probe criminalistice. Antonov SN Sud. Miere de albine. expert. 1978 № 4, p. 33-35.
In experiment, o nouă metodă de formulare a acidului acetic disecției sub un pre-tratament stereomicroscop și prin prepararea filmelor subtiri de orice tesut.
O tehnică pentru studierea țesuturi și organe, în vederea examinării PARTICULE Medicolegal corpusuri delicti
Se sugerează o nouă metodă. Particulele tratate cu acid acetic sunt studiate stereomicroscopically. Obtinerea de filme subtiri din orice țesut este redat posibil.
Descriere bibliografică:
Particulele Metodologia citologice de țesuturi și organe în timpul examinării medico-legală a probelor / Antonov SN // Examinare medico-legală. - 1978. - №4. - S. 33-35.
Încorporați forum:
Aproximativ 20% din studii citologice medico-legale referitoare la definirea regională (organ-țesut) originea și sexul microparticule uscate de țesuturi și organe umane. Identitatea sexuală trebuie să fie determinată și pentru examinarea cadavrului dezmembrat.
Cu toate acestea, din particulele uscate nu este întotdeauna posibil să se prepare preparate histologice de calitate bună chiar și la niveluri ridicate microtehnologie (Kovacs, 1974). Folosind tehnicile adoptate în citologie (măcinarea sau sfărâmarea microparticulelor), vă permite să obțineți medicamente bune sunt țesuturi și organe parenchimatoase nervoase si epiteliale (SE Glizer 1967 1972; Ishizu et al 1974). Particulele de mușchi și țesutul conjunctiv tratabile mai rău. Mai mult, particulele sfărâmate aderă slab la sticlă și prelucrarea ulterioară pot fi pierdute. Utilizări pentru atașarea glicerinei proteină incompatibilă cu detecție Y-cromatină. Din țesuturi solide (oase, cartilagii) preparate citologice preparat anterior.
Am stabilit sarcina de a elabora o metodologie pentru a obține un film subțire uniform de microparticule neotkleivayuschihsya uscate de orice tesut. Am studiat 72 de piese: craniu, coaste, cartilajului articular-sterno claviculare, cortexul cerebral, piele, piept si cap, peretele intestinului subtire, luate de la 16 carcase în ceea ce privește o zi după moarte. Particulele de 1-3 mm grosime din aceste piese au fost uscate și depozitate la temperatura camerei timp de 1 săptămână până la 6 luni. Particulele proaspete și uscate sunt fixate în 10% formalină sau decalcifiază opritorului (5 ml acid trifluoracetic, 10 ml de formol, cu apă distilată până la 100 ml), a fost preparat tselloidinovye parafină și secționate. 150 a fost preparat specimene histologice colorate cu hematoxilină și eozină. Preparatele citologice au fost de asemenea preparate din proaspăt și particulele uscate de pre-tratate cu diferite lichide. Particulele au fost plasate pe o sticlă de ceas și sub stereomicroscop MBS-1 a fost măcinat (disecată). Microparticulele au fost transferate pe lamele de sticlă și tratate pentru obținerea filmelor subțiri. Preparatele uscate au fost fixate cu metanol, colorate cu azur-eozină sau cu un amestec de fluorocrom (SN Antonov, 1975).
Am pregătit și examinate 380 de preparate. Microfotografie au fost efectuate pe placa „Micro“ cu obiectivul 20 și ocularul 10 X X. Figurile de negative imprimate la aceeași mărire.
Pentru a rezolva problema am aflat ce substanțe au nevoie pentru a procesa particulele de țesut și metodele prin care se pot obține în mod constant subțire (1-2) număr de celule preparate.
Este cunoscut faptul că expunerea celulelor sanguine în lichide urme, cum ar fi apă distilată, soluție salină, și lichide care conțin proteine este ineficient și conduce la dezvoltarea microorganismelor care reduc calitatea medicamentelor (SI Lyubinskaya, 1969). Prin urmare, este necesar să se utilizeze alte fluide au proprietatea de a recupera cantitatea de particule pentru a le spăla de hemoglobina, precum fix si decalcifia tesut. Amestecul a fost testat a propus Ratnevskim (1972), soluții de 10, 25, acid acetic 40%, 0,5 și 5% soluții de acid tricloracetic 10% formalină neutră, decalcificare de fixare (Romeys, 1953).
Fig. 1. Instrumente pentru preparare cu particule.
1 - disecarea ac ascuțit; 2 - fagurii cu ace; 3, 4, 5 - instrumente oftalmice.
Pentru a compara efectul acestor soluții și cleme de proaspete și particulele uscate sunt aceleași țesuturi de dimensiuni încorporate în tuburile lor. După o perioadă de 4 ore înainte
4 zile particulele au fost examinate sub un stereomicroscop, disecarea set de scule (Fig. 1). Microparticulele au fost transferate pe lame de sticlă, măcinate sau sfărâmate. Preparatele obținute citologice a fost comparat cu histologica a evaluat gradul de compresie a structurilor tisulare (celulară în principal nuclee), grosimea medicamentelor și adecvarea acestora pentru studiul cromatinei sexuale.
Am constatat că un lichid având o acțiune de fixare, sunt improprii pentru preparate citologice, deoarece acestea își pierd elasticitatea si adezivitatea tesut. Din acest motiv, microparticulele nu pot fi zdrobire la o stare de film subțire, neregulat zdrobite (se sfărâmă) și în timpul prelucrării ulterioare de multe ori vin dezlipi. Preparatele obținute grosime neuniformă, iar nucleul in celule sunt mai comprimate decât în preparatele histologice. Un studiu de cromatinei sex în cele mai multe dintre medicamente nu este posibilă.
Cele mai bune rezultate sunt obținute atunci când sunt expuse la soluții uscate particule de acid acetic, indiferent de concentrație. Acidul acetic se dizolva cauzele hemoglobinei umflarea substanței intercelulare, particulele de volum și de iluminat redus. Crearea condițiilor favorabile pentru studiu sub un microscop stereo. Mai mult decât atât, obiectele păstrează elasticitatea și adezivitate, cartilajelor și a țesutului osos, după 1-4 zile decalcifiază.
Pentru a pregăti filme subțiri uniforme, ferm lipite la slide, am testat următoarea metodă. Microparticulele sunt tratate cu o soluție de acid acetic au fost strivite între două lamele și lăsate să se formeze într-o astfel de clemă. După uscarea sticlei secționat țesut cu un bisturiu pentru a da două produse. Aceste medicamente au fost elemente secțiuni de țesuturi, celule și țesuturi semnificativ mai subțiri au fost mai mari și o mare parte a medicamentului situat în 1-2 straturi de celule (Fig. 2, insert). X și Y cromatinei detectată fără prelucrare suplimentară, care este adesea necesară pentru a identifica cromatinei sex în secțiuni histologice (hidroliză, tripsinizare).
Fig. 2. Preparate din microparticulele uscate. și - secțiunea histologică a pielii de sân; b, c, d - citologic pielii preparate de sân, mușchi scheletic, oase coaste.
Metoda propusă este simplu punct de vedere tehnic și diferit de toate utilizate anterior în care acesta poate fi utilizat pentru a investiga particulele (microparticule) orice site-uri de țesut care sunt în orice stare. Preparatele rezultante sunt, în general, nu necesită o procesare suplimentară pentru a îndepărta excesul de proteine ca preparate histologice și pot fi preparate rapid.
Tehnica dezvoltată se extinde, de asemenea, capacitățile unui studiu de specialitate pentru a aborda întrebări cu privire la prezența unor particule de animale sau de țesuturi umane și apartenența regională. Acesta vă permite să obțineți informații despre caracteristicile morfologice ale țesuturilor microparticulelor în stadiul de prelucrare și disecție sub un microscop stereo, ceea ce este imposibil atunci când se utilizează tehnici histologice. Această informație este importantă pentru formularea preparatelor din acele părți ale obiectului, care sunt mai utile pentru diagnosticul de sex.