O orientare
• Diagnosticul microbiologic al tifoidă și para-tifos
Material pentru studiu: bazat pe patogeneza singularități-Tei a febrei tifoide, în prima săptămână a bolii, în timpul agenților patogeni bacteriemie izolate din sânge (pentru a obține cultura de sânge), din a 2-a săptămână de boală - de la isprazh-Neny (obținerea de cultura scaun) , urina sau bila.
Examenul bacteriologic (Schema 13.2.1).
Obținerea de culturi sanguine. In ziua 1 din vena cubital a exproprierii pacient și 5-10 ml de sânge a fost inoculat într-un balon cu 50-100 ml Rappaport mediu selectiv conținând bulion colic (pentru a suprima creșterea altor bacterii), glucoză și un indicator Andred flotor pentru detectarea gazelor. Având în vedere relația sânge-sheniya și sunt necesare pentru mediul de a suprima acționează bactericide-sange-proteine. Culturile sunt incubate la 37 „C timp de 18-20 ore. La a 2-a zi în timpul creșterii de supraveghere Salmonella etsya turbiditatea și culoarea schimbarea mediului. În timpul creșterii bacteriilor paratiroid foznyh (biovari paratyphi A, C schottmuelleri), împreună cu modificările specificate apar bule gaz la de topire. pentru a accelera răspuns al mediului Rappoport face unguente Set și preparate „agățat“ picătură. în prezența cult ry Gram tije motile negativi pure și schimbarea culorii a mediului (sau prezența gazului) da un prim răspuns preliminar. Apoi, cultura din mediul Rappoport subcultivat într-un tub de testare cu mediul Russell crede în primul rând în acest sens, că din sânge izolat cultura pură și puteți trece imediat la său de identificare-TION. În același timp, miercuri Rappaport face culturi pe mediu Endo pentru a obține colonii izolate, în scopul de a verifica puritatea culturilor izolate.
A treia zi, sărbători fermentarea glucozei în mediu Res scurgerea de noroi și setați reacția orientativă aglutinare pe ste adeziv. Datele obținute da un al doilea răspuns preliminar pozitiv. Pentru a investiga în continuare coloniile neselectate incolore cu mediu Endo și le replasate miercuri sau Russell agar nutritiv oblici (pentru trolul con rezultatelor). Cultura pură este subcultivat pe mediu „pestriță“, seria și reacția serotipiruyut agglyuti națiune pe sticlă cu un amestec de seruri de grup și apoi
adsorbit monoretseptornymi O- și N-serurile Salmonella-TION. Diagnosticul final se bazează pe biochimice (Tabel. 13.2.1) și proprietăți antigenice.
Tabelul 13.2.1. Proprietățile biochimice ale Salmonella - agenți cauzatori ai febră tifoidă și paratifoidă
Salmonella ± R (-) K K K - - -
Citrobacter - R (-) K K K K (±) la (±) K
Hafnia + - - K K K (+) - K
Cheie: (+) - reacție pozitivă; (-) - prin reacție negativă; ± - reacție variabilă; K - formarea de acră-te; R (-) - formarea de acid (rare); K (±) - formarea de acid (variably).
Izolat în cultură pură de bacterii utilizate pentru sensibilitatea op-determinare a agenților antimicrobieni.
lizotipia. Folosind un set de fagi standard, pentru a determina VI tipurile 78 de fagi S.enterica biovar typhi. În acest caz, o condiție necesară este prezența în cultura FZ-antigen. Culturile S.enterica biovar paratyphi B (schottmuel-Leri) diferențiate de 11 tipuri și subtipuri de fagi.
Noțiuni de bază cultura scaun. Scaunele sunt inoculate cu unul din mediile diferentiale de diagnosticare (Endo și Levine) sau mediu de îmbogățire elective (Mueller seleni-
sau agar bismut-cuantic-sulfit). Pentru însămânțare bucla fecale este introdusă în tub cu o soluție izotonică de clorură de sodiu și se prepara o suspensie. După decantare de bulgări mari bucle sus-Penza este aplicat pe suprafața unui mediu de agar - o jumatate de cana. Materialul a fost triturat Spar-lem pe unul, și apoi încă o jumătate de cană pentru a obține depozite de colonii izolate. Culturi au fost incubate la 37 ° C timp de 18-20 ore pe coloniile naturale Ziua 2 de studiu cultivate pe plăci. (Fig 13.2.1 ;. O inserție), passaged 2-3 colonii incolore (din mediu sau Endo Levin) sau colonii negre (bismut sulfit de agar), miercuri, Russell și tuburi cu agar nutritiv. teșită În absența coloniilor suspecte pe plăcile fac insamantarea Mueller selenitovoy mediului pe cupa cu mediul Endo pentru a obține colonii izolate mediu sau. Pentru a accelera răspuns sute vyat aglutinarea indicative pe sticla cu ma-materiale sub luate din colonii incolore. Următoarea face același lucru ca și în identificarea culturii de sânge.
Metode de diagnostic rapid: imunochimice, biochimice și de cercetare-CAL biologice moleculare. cercetare moleculara-biologica. Analizat mate-rial derivat dintr-un focar de infecție este utilizat pentru ADN patogen Detect-zheniya prin PCR. În cazul unor depozite descoperite de molecule corespunzătoare pot pune un diagnostic preliminar-TION.
1 ml de ser (fără diagnosticum) nu ar trebui să fie fulgi. Atunci când reacția de aglutinare spontană nu este luată în considerare. Dia Titrul gnostic reacție Widal este de 1: 200. Pentru studiile de serologie convalescent agenții și rionositeley detecție bacto utilizate pe scară largă reacție indirectă GEMAG-AND-glyutinatsii cu care anticorpii din ser sanguin uman pentru a determina prezența K / -antigenu. Ca antigen eritrocitar P utilizat? -diagnostikum, pre-resents o suspensie de eritrocite umane 1 (0) din grupul tratat cu formalină și Fz'-sensibilizate antigen-prefectura S.enterica biovar typhi. Se prepară diluții de ser de test de la 1:10 la 1: 1280. Când reacția pozitivă eritrocitele inferioară acoperită a tubului sub forma unui disc cu marginile zimțate-TION, iar lichidul supernatant a rămas limpede. Cu reacție negativă la fel ca și în controlul, Erith ROCIT-depus pe fundul tubului și au forma unui disc cu margini netede ( „butoane“). Valoarea de diagnostic are pasive hemaglutinare Q-titrului pornind de la 1:40 și mai mare. Toate persoanele ale căror ser dă un rezultat pozitiv în RNGA cu eritrocitare F / f-diagnosticum-curse considerate ca un operator de transport suspectate S.enterica biovar typhi și supuse examinării repetate lea bacteriologic.
• Diagnosticul microbiologic al salmonella
Material pentru studiu: scaun, într-o formă generalizată - sânge.
METODE DE DIAGNOSTIC: Diagnos-tic microbiologic salmonella nu este fundamental diferită de febra tifoidă dia-gnostici și germen. Serodiagnosis nu se aplică, din cauza numărului mare de serotipuri excita-teley.
• Diagnosticul microbiologic al iersinioza intestinale
Material pentru studiu: scaun, într-o formă generalizată - sânge, urină, spinării os-evreu.
Examenul bacteriologic. Material Insamantarea DIF-diferentiale-diagnostic (Endo Agar, MacConkey, SBTS agar cu bromotimol albastru și bilă) și selectiv (CIN-Arap cefsulodin antibiotic și novobiocinei) medii solide sau mediu de îmbogățire lichid (tampon-Kase-inovo- drojdie bulion, 1%, apă peptonată pH 7,6-7,8). Culturile sunt incubate la temperatura de 25 „C, timp de 24-48 h. Identifi-Katsiya cultura pură pe baza proprietăților tinctoriale morfologice și ogy, mobilitatea, (Gram
tije Tel'nykh cu capete rotunjite și colorarea bipolară caracteristică, nesporogeni, peritrichous), caracteristici culturale biochimice.
Metode de diagnostic rapid: imunochimice, biochimice și de cercetare-CAL biologice moleculare. cercetare moleculara-biologica. Materialul de testat obținut de la locul infecției este utilizat pentru detectarea ADN-ului patogen prin PCR. În cazul detectării moleculelor corespunzătoare pot fi livrate pre-diagnosticate în prealabil.
Serodiagnosis. Valoarea de diagnostic are anticorpi tensiune Detect la antigeni patogeni NAI-mai multe serotipuri comune de suprafață (03, 04, 05, 06, 08, 09) în RA. RA este considerat a fi pozitiv într-un titru de cel puțin 1: 160. De asemenea, a dezvoltat teste ELISA.
• Diagnosticul microbiologic al dysbiosis intestinale
Material pentru studiu: fecale. METODE DE DIAGNOSTIC:
Examinarea microscopica. Acesta are o valoare indicativă. La dysbacteriosis exprimate brusc în pre-frotiurile au anumite microorganisme (de exemplu, fungi drojdie, stafilococi, etc ..) Împotriva sushchest-reducătoare microflora gram venoase.
Examenul bacteriologic. A efectuat un studiu cantitativ-ing compoziția microflorei intestinale. Pentru aceasta, materialul de testat a fost preparată prin diluarea Yu -2. 10 -4. Yu -6, etc. Culturi primare 0,1 ml din fiecare diluție a paralelei pro-plaguing pe mai multe medii de cultură (Endo, agar de sânge, VSA, agar Sabouraud și colab.), și se incubează la 37 ° C Contoriza numărul de colonii și se determină numărul de CFU în 1 g de material. 2-3 colonii din fiecare reportate specii pentru izolarea și identificarea culturilor pure de microorganisme de screening.
Pentru detectarea anaerob Bifidobacterium spp. dimensională fac materialul culturi de diluții de 10 „7 și mai sus, în pro-tag modificat cu 13-15 ml de Blaurock mediu în co-devenire care intră bulion de ficat, peptonă - 1%, lacto-in - 1% clorură de sodiu - 0 5% cistină - 0,01%, agar - 0,75% Tween-80 - .. la 0,1% creșterea Bifidobacterium spp h se produce turbiditate 24-48 pe întreg mediu pentru a forma fâșii sau colonii individuale au fost pregătite. frotiurile și colorate de Gram metoda. Izolarea culturilor pure de Bifidobacterium spp. este foarte consumatoare de timp și NYM aproape opțională. identificarea reprezentanților genului, dacă este necesar și efectuate asupra proprietăților biochimice.
Pentru a evalua rezultatele testelor bacteriologice
se compară cu datele obținute în microorganisme cantitative Niemi care conțin sunt normale. Criterii orientative pentru microflorei normale ale colonului sunt prezentate în tabelul. 13.2.3.
Tabelul 13.2.3. Criterii pentru regulile florei intestinale