Metodele moleculare genetice de diagnostic a bolilor ereditare ale sănătății competente cu privire la

Metodele de tehnologie ADN sunt utilizate pentru a determina localizarea într-un anumit cromozom al genei mutante responsabile pentru originea anumitor forme de boli ereditare. Deoarece gena este un segment de ADN și mutația genelor - deteriorarea structurii primare a ADN-ului (o mutație este înțeleasă de către toate modificările în secvența de ADN, indiferent de localizarea lor și influența asupra viabilității individuale), boala apoi sondare preparate de cromozomi pacient metafaza moștenit, este posibil să se stabilească localizarea genei anormale. Metodele de genetica moleculara pentru a crea posibilitatea de diagnosticare a bolilor la o structură ADN modificat, ele permit să se verifice localizarea disfuncțiilor moștenite. metode genetice moleculare pot detecta mutații asociate cu înlocuirea chiar și o singură bază.

Cel mai important pas de a identifica gena - izolarea sa. ADN-ul poate fi izolat din orice tip de țesut și celule conținând miez. Etapele de izolare ADN-ului includ liza rapidă a celulelor prin centrifugare, cu îndepărtarea fragmentelor de organitelor și a membranelor celulare, distrugerea enzimatică a proteinelor și extragerea lor din soluție cu fenol și cloroform, concentrația de ADN prin precipitare în etanol.

Laboratoarele genetice ADN adesea izolate din leucocite din sânge, pentru care pacientul este luat 5-20 sânge venos ml într-un tub steril cu o soluție de anticoagulant (heparină). Apoi leucocitele separate și prelucrarea acestora se realizează în etape stabilite mai sus.

Orice segment de ADN monocatenar sau ARN-ul este capabil de a lega (hibridiza) cu lanțul său complementar, cu guanina este întotdeauna asociat cu citozina, adenina cu timina. De la formarea moleculei dublu catenar. Dacă o monocatenar copie a unei gene clonate pentru a eticheta o etichetă radioactivă, o sondă. Sonda capabilă să preia segmentul de ADN complementar, care este apoi ușor de identificat prin autoradiografie. Sonda radioactivă este adăugată la droguri intins cromozomi permite sa localizeze gena pentru un anumit cromozom cu o sondă ADN poate identifica anumite porțiuni într-o analiză Southern blot. Hibridizarea are loc atunci când locul de testare ADN-ul conține o genă normală. În cazul în care există o secvență anormală de nucleotide, adică structurile cromozomiale corespunzătoare conțin o genă mutantă, hibridizare nu va avea loc, ceea ce permite determinarea localizarea genei anormale.

Pentru sonde de ADN folosind metoda genei clonare. Esența metodei constă în aceea că fragmentul ADN corespunzător oricărei gene sau regiune a genei inserate în particula de clonare, de obicei, o plasmidă bacteriană (circular extracromozomial ADN-ul prezent în celulele bacteriene și care transportă genele de rezistență la antibiotice) și apoi bacteriile având o plasmidă cu un genom uman integrat, propagat. Datorită proceselor de sinteză, este posibil să se obțină plasmidici miliarde de copii ale genei umane sau o porțiune a acesteia.

obținute ulterior copii de ADN marcate cu eticheta fluorocrom sau radioactiv este folosit ca sonde pentru a căuta secvențe complementare între piscina ADN investigat.

În prezent, există mai multe tipuri de metode care utilizează sonde ADN pentru diagnosticul de mutatii genetice.