Metode pentru vopsirea preparatelor histologice

Toți coloranții utilizați în tehnicile histologice sunt clasificate în 4 tipuri: acide, bazice, neutre și indiferente. coloranți acizi - sunt acizi și sărurile acide (eozină și fucsin acidă) structura Paintable numita oxyphilic (având o afinitate pentru coloranți acizi).

Aceste componente proteice citoplasmatice și structura noncellular (fibre de colagen).

coloranți de bază. Sărurile bazice (hematoxilină și azur2 carmin). Structura Dyeing - Această structură, sau alți acizi nucleici bogați - nucleul, ribozomului, componenta amorfă a substanței intercelulare.

Coloranți neutre - amestecul celor doi coloranți: principal (azuriu 2) și acid (eozină). Structurile de detectare coloranți acizi, culoare eozină; Exemplu - în granule specifice de eozinofile. Nucleele celulelor au fost colorate cu azurie 2.

coloranți Indiferent - Sudan III, Sudan IV. Sudan grăsime pata picături (în care este dizolvată).

Tehnici generale de colorare

1. Hematoxylin -eozinom - cea mai comună metodă de colorare. Acesta combină coloranti bazici sau acizi. Prin urmare, dezvaluie aproape toate celulele si multe structuri non-celulare. Nucleele capătă o culoare albastru-violet, citoplasmă - o culoare roz-gălbui.

2 Acoperirea hematoxilina de fier (pentru metoda Gendengayna). Medicamentul este pretratat (decapată) alaun zheleznoammiachnymi, și apoi tratat cu gematoksilinom.Struktury capătă o culoare maronie-gri. Buna Structura identificată de bază, celulele de frontieră, fibre musculare.

Identificarea structurilor de țesut conjunctiv non-celulare.

1. Pictură de van Gieson. Pigment - o soluție amestec de acid picric și fucsin acidă.

fibre de colagen (conținute în substanța intercelulară a țesutului conjunctiv) sunt vopsite în culoare roșu aprins, iar elementele altor țesuturi (de exemplu fibre musculare.) - galben.

2. Acoperirea prin metoda Mallory - colorant este tricolor - un amestec de fucsin de acid, anilină albastru, portocaliu, iar cei doi acizi. Fibrele de colagen ale țesutului conjunctiv se colorează în albastru închis; multe alte structuri (nucleu, fibre musculare, eritrocite) - portocaliu sau roșu.

3. Impregnarea de argint. Preparatul a fost tratat cu soluție amoniacală de argint, și apoi - cu agenți reducători.

Ca rezultat, argintul eliberat este depus pe anumite fibre ale țesutului conjunctiv. Reticular (argyrophilic) fibre devin, fibre de colagen negru - brun, nuclee de celule - lumina maro.

4. colorat orseinom. Fibrele elastice ale țesutului conjunctiv sunt colorate de culoare roșu închis și, alte structuri - într-un ușor roz.

5. Culoarea hematoxilină-picrofucsin. fibre elastice vopsite acid picric culoarea galbenă a fibrelor de colagen - roșu, nuclee de celule - colorat în hematoxilină culoare violet închis.

6. Metoda Colorare SHmorlja. Folosit pentru colorarea oaselor și a dentinei. bucăți Pre de material supuse decalcifiere și apoi păstrate într-o soluție de alaun de potasiu.

Pereții cavității și tubulii osoasă (căptușite cu o rețea de fibre de colagen) sunt vopsite într-o culoare maro inchis, restul de fundal - maro deschis.

4. Culoarea celulelor tisulare și sanguine conjunctiv. Colorat azur2-eozină: Elemente bazofilici azurom2 vopsite în albastru inchis, oxyphilous - culoare roșu deschis.

frotiuri de colorat pe metoda Romanovsky. Dye - la fel ca și în cazul anterior (azur2-eozină).

Eritrocitele deveni un roșu pal, citoplasmă leucocite - granule albastre sau albastre, citoplasmatici sunt colorate în funcție de natura lor.

Identificarea elemente ale sistemului nervos.

1. Impregnarea de nitrat de argint. Fixarea în materialul formol se realizează cel puțin 7 zile.

Sigilarea nu este o probă este realizată prin turnare în parafină, și prin congelare

Când pictura felie a fost tratată secvențial cu soluții de nitrat de argint, formol, un argint amoniacal.

Elementele sistemului nervos (fibre, celule, etc.) sunt vopsite în culoarea neagră țesutul înconjurător - culoare maro deschis.

2. Culoarea albastră toluidina pentru metoda Nissl. Albastru de toluidină pata de conectare moderat bazofile în albastru. Cu detectat aglomerări de substanță bazofile (așa numita substanță Nissl) în citoplasmă celulelor nervoase.

3. Pictura verde metil - pironin prin metoda Brachet. Metoda utilizată pentru a identifica ARN.

Citologie - știința celulei. Ea studiază structura și funcția celulelor țesutului. Cell - este unitatea structurală de bază a unui organism format dintr-un nucleu, citoplasmă și membrană celulară limitată.

În 1838 g de celule Schwann și Schleiden formulat teoria.

Teoria celulara include prevederi:

1. Celula este cea mai mică unitate de viață.

2. Celulele diferitelor organisme au o structură similară.

3. Propagarea celulelor are loc prin divizare.

4. Celulele organisme multicelulare funcționează în strânsă asociere unul cu celălalt, ele formează țesuturi și organe.

Principalele componente ale celulei: a) citoplasma; b) miezul.

Structura citoplasmei includ:

1. tsitolemmy, Hyaloplasm 2., 3. organite 4. incluziuni.

Se compune din 3 componente principale:

- strat nadmembranny - glycocalyx

Chimică plasmolemma compoziție: proteină (60%), lipide (40%), glucide (10,5%). baza de Plasmolemma moleculelor bistrat lipidice. Fiecare strat este format din molecule de fosfolipide și colesterol în parte. Fiecare moleculă de lipide disting: a) un cap hidrofil; b) cozile hidrofobe. Ele comunică cu fiecare strat și să formeze bilipidny. cap Hidrofil în contact cu mediul extern și intern.

Proteinele membranei sunt împărțite în:

Conform funcției proteinelor sunt împărțite în:

Metode de transport al substanțelor prin plasmolemma:

1. simpla difuzie

2. transport activ

3. Transportul veziculară (endocitoza, exocitoza)

Tipuri de contact celulă-celulă:

1. simplu contact - celulele interactioneaza macromolecule glycocalyx datorate.

2. Contact desmosomal. Celulele sunt conectate între ele prin intermediul desmoglein proteine ​​si desmoplakin.

1. Contactul intim. Celulele au fost foarte apropiate, împerecherea cu proteine ​​speciale.

2. Nexus - celule converg în regiunea de 2 nm și penetrat de canale - conexon.

3. Contacte sinaptice. Sinapsa distinge cu membrana presinaptică, fanta sinaptică si membrana postsinaptică. Semnalul este transmis chimic - mediator.

Glycocalyx este un compus glicoproteine ​​și glicolipide.

Hyaloplasm - partea interioară a citoplasmei structură, este un coloid, dar se poate deplasa în gel și metoda sol. Se compune din apă și diverse biopolimeri, constituie cea mai mare parte a proteinelor.

Organite - structuri permanente citoplasma celulelor având structura specifică și care exercită o funcție specifică.

1. organite generale se găsesc în toate celulele;

2. Special - disponibil în anumite celule.

organite generale sunt împărțite în: membrana și non-membrană.

organite speciale împărțite în: organite citoplasmatice și suprafața celulei.

Prin membrană organite includ mitocondriile, reticulul endoplasmic, complexul Golgi, lizozomi, peroxizomi.

Pentru non-membrană organite includ ribozomii, centrul celulei, microtubuli, microfibrile, microfilamente.

Structura și funcția organite cu membrană

Grosimea membranelor organitelor bilipidnyh mai puțin (7 nm) decât plasmolemma (10 nm). Membranele organite interacționează unele cu altele.

Forma mitocondriilor poate fi ovale, rotunde, alungite. Peretele este format din două membrane mitocondriale. Formele de membrane interioare se pliază în interior - criptelor. In interiorul mitocondriile sunt ADN-ul mitocondrial și ribozomi.

Funcția de mitocondrie - educația energetică.