Metode moderne de diagnostic al leucemiei bovine

ADN - componentă a oricărui organism viu de legare (cu excepția ARN care conține viruși în anumite stadii ale existenței sale). La soareci si oameni, E. coli și ADN-ul unui elefant este dispus pe același principiu - un polimer macromoleculă care constă din unități - nucleotide. Nucleotidele sunt 4 tipuri: A, T, G și C. Toate ființele vii A, T, G, nucleotidele C găsite în ADN, dar în diferite combinații. Mai aproape de fiecare alte specii sunt situate pe scara evolutivă, cu atât mai asemănătoare secvența de ADN-ul lor, în același timp, chiar și membrii unei familii pot găsi astfel de site-uri de ADN, care vor fi strict individuale.

Utilizarea acestor proprietăți biologice au format baza metodei de reacție în lanț a polimerazei (PCR), care, potrivit revistei americane «Știința», este descoperirea cea mai remarcabilă din ultimii ani.

În condiții favorabile, built-provirusul forma noi virioni care pe pochkovyvayutsya din membrana celulelor de a infecta celule noi.

Pentru diagnosticul de leucemie aplica clinic, anatomopatologic, histologice, hematologice, serologice și metode biologice moleculare.

Toate varietate de semne clinice de leucemie pot fi împărțite în specifice și nespecifice.

Majoritatea cercetătorilor indică aspectul inițial al simptomelor nespecifice, iar apoi sunt specifice, care pot fi diagnosticate (N. Rumeanțev, TM Shaternikova 1963; G. A. Simonyan 1963 EM Nym și altele. 1970). Pe masura ce boala se dezvolta la unele animale o scădere a reactivității, letargie. Relativ precoce la pacienții cu leucemie animale înregistrate încălcare a activității cardiovasculare (inima sunete înăbușite, uneori dualitatea lor), puls de umplere slab, posibil aritmie. Printre simptomele nespecifice de leucemie includ guma neregulate, diaree și constipație.

Simptomele clinice specifice caracterizate prin creșterea progresivă a suprafeței (parotide, submandibulare, predlopatochnyh, genunchi cutelor nadvymennyh) și ganglionii limfatici interni, exoftalmie. (V. M. Lemesh și colab., 1987).

Cu toate acestea, la fel ca orice metodă de diagnosticare, RID nu este fără defecte.

Astfel, prezenta stadiu latent leucemie în care anticorpii virusului în sânge, complică diagnosticul bolii. Sa stabilit experimental că după infectarea perioadei infecții latente (perioada din momentul infectării la apariția anticorpilor la antigeni virali) durează de la 2 săptămâni la câteva luni, cu toate acestea, deducând treptat de la animale cirezi RID-pozitiv este teoretic posibil pentru a obține proprietăți de recuperare completă de la leucozei (A . Burny, Bruck C, Cleuter Y. 1985). Cu toate acestea, în îmbunătățirea efective, nu au avut contact cu alte persoane, în câteva luni sau chiar ani izolate animale cu anticorpi la VLKRS (VM Nah- Munson, 1986). Acest lucru poate fi explicat fenomenul caracteristic leucemie toleranței imunologice atunci când este observată fără anticorp virusonosi- mente. toleranță imunologică - o pierdere parțială sau totală a capacității organismului de a se angaja într-un răspuns imun la un antigen specific.

În legătură cu cele de mai sus, în scopul de a accelera vindecarea a cirezilor de vite plin de leucemie, este oportun, împreună cu metodele indirecte ELISA și RIA sunt utilizate care detectează în mod direct un virus sau provirus la animalele infectate.

În prezent, utilizarea pe scară largă a PCR în diagnosticul de leucemie, în opinia noastră, este constrânsă de următorii factori: costul ridicat al echipamentelor și reactivi pentru PCR, absența pe piața de diagnosticare certificate și nu pe deplin conștient de locul de diagnosticare PCR în sistemul de activități anti-leucemice.

Este posibil ca, în ciuda foarte mare sensibilitate de PCR, în procesul de dezvoltare vicleșugurile Leu sunt astfel de perioade când nivelul ADN-ului proviral este minim. În astfel de cazuri, RID este mai informativ. Deci are sens „împodobite“ PCR, Rydberg și IFA negative animale într-o astfel de utilizare combinată a metodelor de diagnostic garantate de recuperare rapidă și eficientă a șeptelului.

O aplicație importantă este investigarea PCR de animale importate situate în carantină pentru a preveni VLKRS livrare de la o țară la alta.

Astfel, există cel puțin trei domenii ale unei aplicații de succes a metodei PCR în diagnosticul leucemiei: purtători de identificare proviral ADN printre animale Rydberg-off și IFA negative în studiul animalelor de fermă nou importate și detectarea vițeilor infectați în vârstă timpurie.

In laboratoarele de biotehnologie SKNIIZH utilizând metoda PCR a fost investigat 1013 probe de sânge pentru prezența ADN-ului proviral VLKRS. Tabelul prezintă diferite ferme de animale infecție VLKRS.

Analizând rezultatele, am dori să rețineți următoarele. Animale de companie doar una dintre ferme (CJSC SCWO) au fost complet libere de purtător ADN proviral LKRS.

Juninci Holstein negru-pestriță rasa în această economie au fost importate din Olanda și au avut nici un contact cu animalele locale. Printre alte animale importate (SA „Plemzavod“ Kuban „n = 354, adus din Ungaria) prin RIA nu au fost identificate pozitiv reactive și PCR nu a reușit să detecteze 1 proviral ADN LKRS purtător. Mai mult decât atât, ADN-ul proviral în probă este identificat și sânge de vițel obținut din PCR animal pozitiv. Purtătorii proviral au fost eliminate din cireadă.

Ferma de „complex de reproducere“ Olginsky „de 97 de probe de analizat au fost obținute 67 de animale Rydberg negative. 15 dintre ei au fost PCR pozitive.

Analizând datele privind transportul de proviral, am constatat că procentul de viței infectați timp de 3-4 luni (pe baza studiilor PCR) corespunde practic la procentul de animale RIA-pozitive ale aceleași servicii, dar la o vârstă mai înaintată (la 3 ani). Acest lucru este cel mai probabil indică faptul că infecția animalelor are loc în primele etape ale vieții (transplacentară și până la 3 luni), iar primele semne imunologice ale bolii apar la majoritatea animalelor după prima lactație.

Prin urmare, în cazul în care separarea a fost realizată de juninci PCR pe provirus media și sănătos în primele 2-3 săptămâni de viață al animalului, puteți restabili starea de sănătate a economiei este mult mai rapid.