Diagnosticul de laborator al febrei aftoase

0 C virus uscat persista timp de 2 ani.

Diagnosticul de laborator yaschuraosnovana privind datele epizootii, semnele clinice ale bolii, modificări patologice și studii de laborator. Suspiciune de FMD provoca orice animale susceptibile de boală, caracterizate prin apariția unei erupție veziculară în cavitatea bucală și pe extremitățile mamari, hipersalivație, smack, recepție împiedicată și de mestecat pentru furaje, iar atunci când este privit din gura - aftelor detecție și eroziuni. În plus, să acorde o atenție la yaromotu lung, afte pe buză și în zona de decalaj mezhkopytnoy, uneori spadenie pantof excitat, afte pe mamelonul si dureri in timpul ultimei mulsului și suge un reflex protector NYM puternic exprimat.

diagnostic Ehpizootologicheskij - o, înfrângerea electorală este extrem de contagioasă numai animalele biongulat. Metodele FMD diagnostic de laborator vor varia în funcție de faptul dacă detectarea precoce necesar și tipurile de identificare (varianta) a virusului (diagnostic precoce), sau detectarea și identificarea specifice febrei aftoase AT animalelor convalescente (diagnostic retrospectiv).

Diagnosticul de laborator se bazează pe izolarea virusului, afișare, identificarea și tipizarea virusului febrei aftoase.

Izolarea virusului. Eficiența izolarea virusului din materialul patologic este crescut folosind metode de purificare și concentrare a suspensiilor conținând virusuri. Datorită ușurinței de punere în aplicare, costul, și cel mai important, posibilitatea de rezultate rapide, care să permită determinarea simultană a unui model și variantă aparținând virusului epizootică, cel mai des utilizate sau RGC RDSK. Cu toate acestea, atunci când cantitatea livrată de material viral este insuficient pentru cercetare sau RNC eșuează hemoliza sau întârzierea nespecific, apoi pune pe boioprobu RNC (cel puțin 2 capete) în vârstă de 18 luni, care introduc 0,1 ml din suspensia obținută; materialul în mai multe puncte ale limbii membranei mucoase și firimiturile membrelor; Volumul total al materialului de testat 2-3 ml. Apariția AFL la locul materialului cu confirmare ulterioară a RNC indică prezența celulei de încărcare. Cu toate acestea, metoda este costisitoare și este asociată cu riscul de eliberare a virusului în afara instituției. Prin urmare, în practică de diagnostic, este folosit foarte rar. Cele mai multe Biotestări utilizate pentru 4-6 zile puii de șoarece cu vârsta, cobailor, cu o greutate de cel puțin 500 g și o cultură primară de celule de rinichi de viței, purcei, miei, vite și celule transplantate tiroidiene - BHK-21, IB-RS-2. Biotestare la șoareci este convenabil și economic. ID5 din tulpina de testare asupra puilor alăptați și vite deopotrivă. soareci iziți sunt mai sensibile la virusul febrei aftoase decât porci de guineea. Cu toate acestea, trebuie să se țină seama de faptul că evaluarea rezultatelor titrare pe șoarecii de fraieri adesea dificil.

Cobaii sunt ușor infectate prin administrarea intradermică de material care conține virusul în suprafața plantară a membrelor posterioare, la o doză de 0,2-0,5 ml. Infectarea cel puțin 5 goluri. Leziunile primare, de obicei, au apărut după 2-5 zile (ca maturare). Leziunile secundare - vezicule in cavitatea bucala - dezvolta de obicei dupa infectarea cu tulpini adaptate la cobai.

Pentru a izola virusul culturi primare utilizate cel mai frecvent de celule de rinichi de porci sau viței tripsinizate. Observarea culturilor infectate sunt celule 7 zile mikroskopiruya-le de zi cu zi. degenerare specifică a celulelor în care confirmă specificitatea lui la CRN indică prezența celulelor de sarcină din materialul testat.

Indicarea și identificarea virusului. Ca metodă rapidă este acum utilizat pe scară largă PCR. Această metodă rapidă și sensibilă a celulelor de sarcină de detectare în țesuturi prin gena enzimatică amplifikaschi ARN polimerazei.

RSKpo la 100% hemoliză. Este folosit pentru a determina tipurile și tensometrică subtipuri (variante), animal cauzat boala, si pentru a testa celulele de sarcină tulpini industriale și vaccinuri în fabricarea tulpinilor de laborator într-o operațiune de cercetare.

relație antigenic (R), mai mult de 70% indică faptul că tulpinile proprietăților antigenice identice între ele și aparțin aceluiași exemplu de realizare, de la 10 la 70% - în diferite variante (subtipuri) și mai puțin de 10% - de diferite tipuri.

RSK pe o hemoliză 50%. utilizate cu succes în laboratoarele de cercetare și instituții ale industriei biologice. Ea a dezvoltat o metodă de studiere a statusului imun al animalelor vaccinate împotriva febrei aftoase în RSK. Acesta vă permite să-spe cialist la nivelul monitorizării regionale de laborator veterinar pentru co-picioare stud imun într-o reacție simplă și fiabilă.

PHA. Aceasta este o metodă simplă, rapidă, sensibilă pentru identificarea celulei de încărcare. Conform reacției-chuvst pheno- depășește metoda general acceptată, dactilografiere dinamometric la RNC 8-16 ori. Esența aceasta constă în faptul că AT-eritrocite încărcate sunt aglutinate prin contact cu FMD AG tip omoloagă.

Typing tensometrică tip VYa.Opredelenie prin imunitate încrucișată. Testul de eco-imunitate la CRN, în scopul de a determina celula standard de accesorii câmp de încărcare tulpina se efectuează numai în cazul în care testele de laborator au relevat un nou tip de celule de sarcină, nu întâlnite anterior în țară. Determinarea tipului de celule de sarcină prin Ordre posibil și cobai imuno încrucișată.

Tulpinile sunt considerate identice dacă vaccinul protejează animalele de la dezvoltarea procesului de infecție generalizată sub tulpina utilizată. În cazul în care tulpinile Immunoi-CAL diferentele vaccinate animalele infectate cu o tulpină heterolog, bolnav formă generalizată de febră aftoasă.

La stabilirea tipului de crestături în cultura de celule de sarcină aparține tipului, ser față de care împiedică CPP. O variantă a eritroimmunoadsorbtsii universal (UEIA), care permite determinarea celule de sarcină AG în titruri mai mari decât RSK și APH.

ELISA. Foarte pentru a identifica atat 146S-, celule de sarcină 125 și componente. Această metodă este de 500 de ori mai sensibil decât RSK în studiul probelor epiteliului aftos. SET-lena înalt grad de specificitate și sensibilitate ELISA pentru identificarea și dactilografierea tuturor celulelor de sarcină 7 serotipuri în țesuturile epiteliale. Debitul de mare sensibilitate ELISA opțiunea sandviș (pe baza fosfatazei alcaline), care este eficient-Ness este superior 207-219 ori, cu substraturi cromogene - în 4-64 ori.

ELISA poate fi utilă în sistemul de diagnostic de laborator al febrei aftoase în tulpinile de diagnostic de investigare-Vania. Pentru a identifica AT către celula de încărcare ELISA poate fi utilizată pentru a pro-sânge uscat pe hârtie de filtru. Volumul inițial de sânge heparinizat este 7.65 microlitri.