Diagnosticul de laborator al difteriei

Difteria - o boală infecțioasă acută cauzată de difterie bacilul (Corynebacterium diphtheriae), harakterizuyuscheesyamestnym leziuni fibrinoase ale membranelor mucoase și a rotoarelor nazale (diphthera - film), precum și intoxicația severă cu înfrângerea sistemului cardiovascular, sistemului nervos si a glandelor suprarenale. Diagnosticul de laborator al difteriei efectuate în conformitate cu schema 14.

Diagnosticul 14.Mikrobiologicheskaya de conducere de difterie

Metoda microscopica nu este utilizat în prezent, de fapt, din cauza conținutului său scăzut de informare datorită subiectivismului contabilității și se realizează numai la cererea medicului curant. Microscopia supuse frotiuri colorate prin colorare Gram, albastru de metilen, prin Neisseria (pentru a detecta incluziuni volutin). Difterie bacillus (Corynebacterium diphtheriae) colorarea Neisseria conțin polar situat albastru profund, aproape negru, volutin includerea și aranjate ca și cifre romane V sau X, în timp similar cu ei difteroizi si bacterii lozhnodifteriynye (Corynebacteriumpseudodiphtheriae) boabe volutin nu și situate în o palisadă. Conceput ca o metodă directă flyuorohromirovaniya tije difterie korifosfinom, colorat volutin includerea în culoarea roșu-brun, iar citoplasma de culoare verde sau galben, care îmbunătățește metoda de microscopie eficienta.

Metoda bacteriologice -Contravaloarea principala metodă de diagnostic de difterie. Materialul de testat este inoculat cu unul dintre suporturile speciale nutritiv pentru cultivarea tije difterie, cel mai adesea pe mediul Clauberg (Gly-IPA cu Cerinu, defibrinat de sânge și telurit de sodiu, întârzierea creșterii microflorei nonpathogenic concomitentă). La mediu Clauberg Corynebacterium diphtheriae formează două tipuri de colonii:

a) gri-negru cu striuri radiale la suprafață asemănătoare cu daisy ECE-curent sau rozeta (biovar gravis);

b) negre, rotunde, colonii convexe colonii datorate telurit de recuperare (biovar mitis).

În frotiu tipic din coloniile de bacili difteria prezintă tije clavate Gram-pozitive, aranjate într-un V sau cifre romane X conținând volutin boabe (Fig. 16). Restul coloniilor subcultivate cu sângele IPA pentru a izola o cultură pură.

Fig. 16. difterie - Corynebacterium diphtheriae. Colorarea Neisseria. Locație în cifre romane X, sau V, prin includerea volutin poli. X900

Identificarea culturilor izolate se realizează luând în considerare în primul rând proprietățile cheie (toxigenității, tsistinazy prezență). Toxigenicitatea determinată în mod tipic utilizând reacția de precipitare în gel ( „cupă“ metoda). Pentru a face acest lucru, un vas Petri cu mediu nutritiv (IPA, ser de cal 15-20%, 0,3% maltoză, 0,03% cistină) benzi suprapuse de hârtie de filtru impregnată cu un ser anti-difteric toxic (5000 AU / ml) ceașcă de uscat 30 minute într-un cuptor, apoi brăzdat cultură perpendicular studiată fâșie de hârtie. Ca un control toxigenic cul-rotund. Culturile sunt incubate într-un incubator la 37 0 C timp de 18-20 ore. În prezența toxigenicitatea la articulații cu anticorpii antitoxice curent în linii de Sina precipitat alb mediu de cultură format asemănătoare cu antenele. Pentru a determina bacteriile difterie toxigenicitatea dezvoltat de asemenea ELISA și PCR.

Tsistinazu din culturile izolate (eșantion Pisa) este determinată prin metoda de injecție de însămânțare bucle studiu cultura cistina pe IPA cu azotat de plumb. Culturile sunt plasate pe timp de noapte într-un incubator la 37 0 C. în prezența unui mediu format tsistinazy înnegrire (formarea PbS), în timpul injectării, în jurul căreia apare nor maro.

Cultura izolată să identifice și să diferențieze de proprietăți similare Corynebacterii nonpathogenic biologice (Tabelul 16).. Pentru a determina bucla cultura ureazei în studiu este introdus într-un tub care conține o soluție alcoolică de uree și indicator roșu fenol. Tubul a fost incubat timp de 30 minute într-un cuptor la 37 0 C, cu prezența conținutului ureazice al tubului este vopsit în roșu.

La alocarea culturii nontoxigenic da reacția de aglutinare cu ser difteric pentru a detecta speciile de antigen Corynebacterium diphtheriae.

Serologică - RA, Phragmites pentru a identifica anticorpi în serul pereche de pacienți cu difterie.

Tabelul Proprietăți 16.Biologicheskie corinebacterii