Aparate, metode și mass-media pentru anaerobi cultivarea

Acasă | Despre noi | feedback-ul

Exsicator - un pahar de sticlă cu capac suprapusă. În fundul ei există un recipient suplimentar, care este umplut cu un amestec de pirogalol și hidroxid de sodiu sau hidrosulfit de sodiu și bicarbonat de sodiu. In grid stand este pus culturi și capac se pisa prin petrolatum. Desicator a fost plasat într-un termostat.

Metoda Fortner. Într-un vas Petri cu agar nutritiv pour
1-2% glucoză. plăcile de mijloc sunt tăiate cu o lățime steril bisturiu canelură de aproximativ 1 cm O jumătate ceașcă de cultură însămânțate de aerobi (sarcin, E. coli), al doilea -. cultura anaerobi sau investigate pentru imaginile lor prezență. Plăcile inoculate închise, sigilate și plasate cu susul în jos într-un incubator. Creștere rapidă aerobi, absorbind oxigenul, creând astfel condiții favorabile pentru creșterea microorganismelor anaerobe.

Metoda Peretz. Într-un vas Petri steril a fost plasat tije de sticlă, care se depun pe plăci de sticlă sau lame de sticlă. Într-un tub de testare cu 20 ml de topit și răcit la temperatura de 50 0 C cu IPA 10% glucoză (pH 7,0-7,2) este realizat și materialul de testat s-a adăugat 2-4 picături de 10% hidrosulfit de sodiu în soluție de carbonat de sodiu 10%. Conținutul tubului amestecat rapid și turnat în paharul cu speranța că agarul a umplut spațiul dintre placa de sticlă și fundul cupei. Plăcile au fost incubate la temperatura de 37 0 C 24-48 ore. anaerobi Colonii cresc sub placa de sticla.

Metoda Veyon-Vignal. Tubul conținând 0,5% topit și răcit la 40-45 0 C diabet agar introduce materialul de testat și amestecat. Dacă este necesar, materialul este diluat prin transferarea următoarele 2-3 tuburi cu agar-agar topit. Tuburile se câștigă în pipete Pasteur. După umplerea pipetei alungite capătul etanșat și capătul opus sigilat cu tampon de vată sterilă și înglobate în parafină. Tuburile sunt plasate în termostat; 2-3 zile în colonii pe agar cresc adânc, vizibile în lumină transmisă, care poate fi izolat. La acest tub incizată deasupra nivelului unei colonii țintă fișier nadlamyvayutsya, o colonie este îndepărtată și subcultivat buclă pentru acumularea în cultură pură în mediu de cultură adecvat.

Metoda Bittner. Pentru a acoperi capsula Petri cu semănarea materialului de testat, sau anaerobii izolat culturi atașat un pachet de hârtie de filtru care conține pirogalol, CO3 K2, și talc. Cupa sigilat cu ceară sau bandă. Pachetul de conținut umezit datorită condensării rezultat, iar ingredientele reacționează, care este însoțită de absorbția de O2 și de eliberare a CO2.

Gaz-pac (Generbaganaer). Sistemul Generbaganaer constă din pachetul impermeabil la aer din material plastic și generatoare transparent, care cuprinde un amestec de substanțe de neutralizare a oxigenului. Secvența de operare: scoate generatorul din pachet, amplasat în partea inferioară a ambalajului etanș la aer, apoi plasați cupa (sau eprubete) și cu culturi prin intermediul unor cleme speciale pentru a închide pachetul. Incubare la temperatura de 37 0 C.

Miercuri Kitty Tarotstsi. Conține bulion de carne-peptonă, 0,5% glucoză și 0,15% agar. Pe fundul tubului este plasat pentru adsorbția O2 bucăți de ficat fierte sau tocate strat 1-1,5 cm și se toarnă 6-7 ml de mediu. Mediu înainte de seed regenerată (încălzit timp de 15-20 min. Într-o baie de apă pentru a îndepărta aerul și apoi se răcește rapid). După însămânțare mediul este turnat ulei de parafină și plasat într-un incubator.

diabet agar semisolida (bar ridicat). tubul
6-7 ml topită și răcită la 40-45 0 C semilichidă agar nutritiv conținând 0,5-1% glucoză, făcând materialul de testat și amestecat. Culturile sunt plasate într-un incubator.

Mediul pentru controlul sterilității (SCS). Multe creșterea microorganismelor anaerobe posibile numai pe medii cu potențial redox scăzut. Prin urmare, în mediu adăugat agenți, cum ar fi acidul tioglicolic sau sarea sa de sodiu, cisteina, acid ascorbic reducător. funcții de reducere sunt efectuate de către alte componente ale mediului: glucoză, peptonă. SCS conține un bulion nutritiv, un preparat de vitamine CED, NaCl, Na2 CO3, glucoza, tioglicolat de sodiu, cisteină, agar (0,75%). Mediul a fost turnat în eprubete în 6-7 ml.

Izolarea culturi pure de bacterii - aerobi dintr-un material care conține un amestec de microbi zanimaetkak tipic de 3 zile și produs prin următoarea schemă:

Ziua 1 - microscopie frotiu materialului testat colorat Gram - microflora previzualizate cu amestecul. Însămânțarea buclă de material pe un vas Petri cu mediu nutritiv metoda bar pentru a obține colonii izolate. Plăcile inoculate au fost plasate într-un incubator pentru o zi.

Ziua 2 - studiul coloniilor cultivate pe plăci, selecția de colonii izolate, descrierea și frotiu microscopie lor de colonii izolate (colorația Gram) pentru a testa omogenitatea microbilor din colonii. Subcultura colonii izolate pe agar înclinat pentru a produce o cultură pură. Culturile sunt plasate într-un incubator pentru o zi.

Ziua 3 - pentru a verifica puritatea culturilor, cultivate pe panta prin microscopie frotiu, Gram-colorată. Când omogenitatea testat izolarea bacteriilor unei culturi pure poate fi considerată încheiată.