Testele serologice în diagnosticul de laborator al bolilor infecțioase

În apărarea organismului împotriva antigenelor străine sunt mecanisme imunologice cruciale care anticorpii si celulele imune. Baza mecanismelor imunologice - reacția specifică între anticorpi sau limfocite (formate sub influența corpului prins în antigen) și antigen. Funcțiile principale ale anticorpului - legare la antigen și îndepărtarea ulterioară a acesteia din organism.

Cu toate acestea, astfel de reacții între anticorpi și antigeni pot apărea în afara corpului (in vitro), în prezența electrolitului și posibile numai în prezența complementarității (similaritate structurală, afinitate) de antigen și anticorp.

Având un anticorp specific împotriva unui antigen specific poate recunoaște și identifica de alte antigene și anticorpi serici împotriva unui antigen cunoscut.

reacție antigen-anticorp în fenomenul specific vitro însoțită de apariția - aglutinarea, precipitarea, liza.

Astfel, toate testele serologice utilizate în două scopuri:

1) Detectarea anticorpilor din serul pacientului utilizând antigene standard de-diagnosticare (pentru diagnosticul serologic al bolilor infecțioase);

2) pentru a identifica antigene necunoscute prin seruri standard, cunoscute conținând specificitate anticorp specific (pentru identificarea serologică a agenților patogeni).

De exemplu, în cazul în care serul pacientului reactioneaza cu un anumit antigene microbiene - înseamnă în serul pacientului are anticorpi împotriva acestui microorganism.

Diagnosticul serologic - luat antigen etalon (diagnosticum), care este o bacterie vii sau inactivate, virusuri sau antigenele lor (componente) în soluție izotonică.

Identificarea serologică - folosind antiseruri standard care sunt obținute de la animale imunizate (cantități mari de anticorpi apar în sângele animalelor, ca urmare a agentului imunizări multiple).

Aglutinarea - reacție serologică între anticorpii (aglutinine) și antigenele (agglyutininogenami) situate pe suprafața celulei bacteriene, și se formează ca rezultat al antigen-anticorp complex (aglutina).

Mecanismul de aglutinare - sub influența ionilor de electrolit scade taxa de suprafață negativă a celulelor bacteriene și astfel încât acestea să poată ajunge mai aproape de distanță, la care are loc adeziunea bacteriilor.

Macro- și microscopice aglutina aspect:

1) La aglutinare (somatice) - bob, microscopie - poli celule Bacterii lipite împreună pentru a forma o rețea.

2) Vi-aglutinare (Capsule) - granulată, microscopie - lipirea se produce de-a lungul suprafeței celulei bacterii.

3) H-aglutinare (flagelate) - aglutinele interactioneaza cu flageli imobilizând bacterii prin microscopie - krupnohlopchataya, adeziunea celulelor bacteriene in flagella.

reacția aglutinare este utilizat pentru detectarea anticorpilor în serul pacienților, cum ar fi bruceloza (reacția Wright Heddelsona), febra tifoidă și paratifoidă (reacție Widal) alte boli infecțioase, precum și determinarea agentului patogen izolat de la pacient. Aceeași reacție este utilizată pentru a determina grupa de sânge utilizând anticorpi monoclonali împotriva alloantigene eritrocite.

Diferite forme de realizare se aplică reacția de aglutinare: dislocat, orientarea, et indirect al.

Pentru a determina anticorpii în pacient pozeze aglutinare dislocat: din diluțiile ale serului pacientului se adaugă o suspensie de bacterii ucise (diagnosticum) și, după câteva ore de incubare la nota cea mai mare ser de 37 ° C, diluare (titru) la care a avut loc aglutinare, adică a format un precipitat.

Caracterul și rata de aglutinare depind de tipul de antigen și anticorp.

Dacă este necesar să se determine agentul patogen izolat de la un pacient, set reacție indicativ de aglutinare folosind anticorpi de diagnostic, adică efectua serotipare patogen. reacția orientând se realizează pe o lamelă de sticlă. K 1 picatura de ser imun diagnostic la o diluție de 1:10 sau 1:20 au fost adăugate în cultură pură a agentului patogen izolat de la pacient. Dacă apare un precipitat floconos, atunci reacția se efectuează în eprubete cu diluții crescătoare de ser de diagnostic a fost adăugat la fiecare ser de doză W 2 picături de agent suspensie. Reacția a fost considerat pozitiv dacă aglutinarea observată la reproducere, aproape de un titru seric de diagnostic. Controalele (ser diluat soluție izotonă de clorură de sodiu sau a unei suspensii de microbi în aceeași soluție) precipită sub formă de fulgi, care trebuie să fie absent.

Alte bacterii înrudite pot fi aglutinate același ser aglutinant de diagnostic, ceea ce le face dificil de identificat. De aceea antiseruri aglutinant sunt adsorbiți, dintre care anticorpii reacționează încrucișate sunt îndepărtate prin adsorbție bacteriile lor inrudit. In astfel de anticorpi seruri stocate specifice numai o anumită bacterie. mod de preparare monoretseptornyh seruri aglutinare de diagnostic au fost solicitate A.Kastellyani (1902).
reacție indirectă (pasiv) hemaglutinării (IHA), se bazează pe utilizarea de celule roșii din sânge (sau latex) adsorbite pe antigenele lor de suprafață, sau anticorpi care interacționează cu anticorpii corespunzători sau antigene din serul pacienților cauzează lipirea și pierderea eritrocitelor la partea de jos a tuburilor sau a celulelor sub formă de precipitat crestată . RNGA este utilizat pentru diagnosticarea bolilor infecțioase, determinarea gonadotrofinei în urină la stabilirea sarcinii pentru detectarea hipersensibilitate la medicamente și hormoni în alte cazuri.
inhibare a hemaglutininei (HAI), bazată pe blocarea, inhibarea anticorpilor virali ai serului imun, rezultând într-un virus pentru a aglutina celule roșii din sânge își pierd proprietatea lor. HAI utilizat pentru diagnosticul multor boli virale, agenți care (virusurile gripei, rujeolei, rubeolei și căpușe al encefalitei.) Poate aglutina eritrocitele de diferite animale.
Aglutinarea pentru determinarea grupelor sanguine sunt utilizate pentru a stabili sistemul ABO via RA hematiilor folosind un anticorp la grupa de sânge A (II), în (III). Controlul este ser care nu conține anticorpi, adică AB (IV) antigenelor de grup sanguin conținute în celulele roșii din sânge din grupele A (II), în (III); Controlul negativ nu conține nici un antigen, adică folosind grupa eritrocite 0 (I).
Într-o reacție de aglutinare pentru a determina serul Rh Rh utilizat (cel puțin două loturi diferite). În prezența testului pe membrana celulelor roșii din sânge Rh antigen aglutinarea acestor celule. Controlul sunt standard de celule rosii din sange Rh-pozitiv și Rh-negative ale tuturor grupelor sanguine.

Aglutinarea pentru determinarea anticorpilor antirhesus (reacția Coombs indirect) este utilizat la pacienți cu hemoliza intravasculara. Unii dintre acești pacienți prezintă anticorpi Rh, care sunt incomplete. Acestea interacționează în mod specific cu celulele Rh-pozitive roșii din sânge, dar nu provoacă aglutinarea lor. Prezența acestor anticorpi incomplet a fost determinată într-o reacție Coombs indirect. Pentru aceasta anticorpii Rh în eritrocite Rh + S-au adăugat ser antiglobulină pozitive (anticorpi împotriva imunoglobulinelor umane), provocând aglutinarea eritrocitelor. Prin reacția Coombs diagnosticate: stări patologice asociate cu liza intravasculară a eritrocitelor origine imună, de exemplu, boala hemolitică a nou-născutului: Rh pozitiv eritrocite se leaga de sange fetal circulant anticorpi incomplet la factorul Rh, care a trecut prin placenta mamelor rh negativ.

Reacție koagglyutinatsii - varietate RA: celule patogene determinate de stafilococi pretratate ser imun diagnostic. Stafilococii conținând proteina A care are o afinitate pentru imunoglobuline adsorbi nonspecifically anticorpi antimicrobieni, care apoi reacționează cu microbi adecvate centre active, izolate de la pacienți. Ca rezultat koagglyutinatsii fulgi formate constând din Staphylococcus, anticorpi din ser de diagnostic si microb definit.

Schema de reacție setarea aglutinare.