Studiu de imunodeficiență primară a imunității celulare
Investigarea antigenelor de suprafață ale limfocitelor T. Determinarea antigenelor de suprafață ale limfocitelor T prin flux permite cytometry pentru a studia maturizarea lor, diferențierea și activarea (Tabel. 18.8).
Stimularea in vitro a limfocitelor T. Perturbarea maturarea și diferențierea limfocitelor T cu deficit de imunodeficienta imunității celulare apar la diferite niveluri. Astfel, în imunodeficiențe combinate severe perturbate maturarea limfocitelor T în timus, care se manifestă într-o lipsă de suprafață CD2 antigen a limfocitelor T. În această boală, lipsa CD3 sunt de asemenea posibile. Și CD4 limfocite T incapacitatea de a sintetizeze citokine. Limfocitele Sindromul expus pe membrana limfocitelor T activate sunt antigene HLA de clasă II. Când sindromul sindromul Wiskott-Aldrich expresie a scazut antigenului CD43. implicat în activarea limfocitelor T.
imunodeficiențe severe imunitate mediată celular deficitară este însoțită de disfuncție severă a limfocitelor T. deși numărul absolut și relativ al acestor celule poate fi normal.
Pentru stimulare in vitro a limfocitelor T, folosind următoarele ingrediente:
- Mitogeni - PHA. concanavalin A, etc -. cauza nespecifice (nu datorită legării la receptorii de antigen-recunoaștere), activarea limfocitelor T.
- Antigeni solubili - antigene de Candida albicans. anatoxină tetanică - legarea de memorie antigen-receptorii limfocitelor T pentru a determina activarea specifică a acestor celule.
- Celulele alogenice (culturi de limfocite mixte) activa limfocitele T, ca urs asupra antigenii HLA de clasa II de suprafață.
- Anticorpii la antigenele de suprafață ale limfocitelor T implicate în activarea lor, - CD2. CD3. CD43.
Activarea limfocitelor T sunt de obicei evaluate pe următorii parametri:
Sub efectul mitogeni, antigeni și celule alogenice, limfocitele T în repaus sunt activate, transformate în celule blastice și să înceapă să împartă.
Astfel, activarea limfocitelor a fost evaluată prin încorporarea 3H-sau 14C-timidină în ADN. Reacția limfocitelor stimulatori variază în funcție de doza și durata de incubare, de aceea, înainte de a este necesară cercetarea pentru a construi curbele normale ale nivelului de încorporare a stimulentului dozei izotop și timpul de incubare a limfocitelor. Nivelul de radioactivitate al celulelor a fost determinată prin stsintillyatsioinogo contra și exprimate ca numere pe minut. Rezultatul este evaluat prin nivelul de radioactivitate nestimulate (proliferare spontană) și limfocite stimulate, iar indicele de stimulare (raportul de radioactivitate stimulate limfocite la nivelul de radioactivitate al limfocitelor nestimulate). În plus, este posibil să se calculeze raportul dintre nivelurile de radioactivitate pacientului limfocite stimulate și persoană sănătoasă. proliferare spontană a limfocitelor este crescută la pacienții care au avut mai multe transfuzii de sânge. pacienții cu boli alergice și autoimune. infecții bacteriene și virale. precum și la nou-nascuti.
Cultura mixtă de limfocite este utilizată pentru a evalua capacitatea limfocitelor T recunosc antigenele HLA alogenice B-limfocite și monocite. Stimularea celulelor (celule B alogenice) inactivate prin iradiere sau mitomicina. Reacția limfocitelor pacientului este evaluată prin includerea într-un timidina ADN marcat.
Pentru a evalua imunitatea celulară de imunizare dinitroclorbenzen folosit uneori. Acesta este administrat intradermic și numai în scopuri de diagnosticare. Cu toate acestea, deoarece dinitroclorbenzen are un iritant puternic și un agent cancerigen, studiul este efectuat rar.
Studiile genetice. La pacienții cu insuficiență severă a imunității celulare poate himerismul (existența celulelor genotipuri diferite într-un singur corp). Aceasta apare in contact cu celulele sanguine materne în sângele fătului. transfuzie de componente sanguine, și transplantul de măduvă osoasă. Dacă sângele pacientului conține opus chimerism de celule de sex este ușor de identificat, găsirea de celule cu cariotipuri sex masculin și feminin. În alte cazuri, efectuarea tastarea sânge a celulelor HLA de către pacient. Acest studiu relevă lipsa HLA de clasa II antigeni pe limfocitele T activate atunci când sunt expuse sindromul de limfocite.
microscopie electronică de scanare dezvăluie limfocitele T de pe suprafața care nu există microvilozități, ceea ce este tipic pentru sindromul Wiskott-Aldrich.
biopsie timusul se face într-un număr de cazuri, pentru a confirma diagnosticul de imunodeficiențe combinate severe. La insuficiența celule mediate de imunitate definite clustere retikuloepitelialnyh de celule din timusul, nici corpusculi Hassall și o limită clară între cortexul și medula, o scădere bruscă a numărului de timocite. Thymus biopsie efectuate chirurgii care dețin aparate de această operație.
Ganglionilor limfatici biopsie. Atunci când deficit imun celular în ganglionilor limfatici biopsie a relevat golirea zona paracorticală. Din cauza riscului de infecție și de anestezie rana complicatii ale biopsia ganglionilor limfatici se efectuează numai atunci când alte teste de laborator nu permit pentru a confirma diagnosticul.