site-ul personal - reacții de culoare de proteine chimie
Reacțiile de culoare sunt folosite pentru a determina substanțele naturale de proteine, identificarea proteinei și determinarea compoziției lor de aminoacizi în diferite fluide biologice. În practica clinică de laborator, aceste metode sunt folosite pentru a determina cantitatea de proteină din sânge aminoacizi plasma acizi în sânge și urină, pentru detectarea tulburărilor metabolice ereditare sau dobândite la nou-născuți.
Reacție №1 «reacție biuret la legătura peptidică“
Principiu: o reacție de biuret bazat pe capacitatea legăturile peptidice (-CO-NH -) formează cu sulfat de cupru într-un mediu bazic compuși complecși colorați, dintre care intensitatea culorii depinde de lungimea lanțului polipeptidic. Soluția de proteină dă o culoare albastru-violet.
Reactivi: 1) albe ou, 1% proteine soluție (ou de pui filtrat prin tifon și se diluează cu apă distilată 1:10); 2) hidroxid de sodiu, soluție 10%; 3) sulfat de cupru 1% soluție.
Progresele în determinarea: a face un tub de 5 picături de soluție de proteine de ou, 3 picături de hidroxid de sodiu și 1 picătură de sulfat de cupru a fost agitat. Conținutul tubului de testare devine de culoare albastru-violet.
Reacție №2 «ninhidrină“
Principiu: Esența reacției este formarea unui compus colorat în albastru și purpuriu și ninhidrină constând în produși de hidroliză aminoacizi. Această reacție este caracteristică grupărilor amino din poziția α, care sunt prezente în aminoacizii naturali și proteine.
Reactivi: 1) albus de ou, soluție de 1%; 2) ninhidrină soluție apoasă 0,5%.
Progresele în determinarea: a face un tub de 5 picături soluție albușul de ou, se adaugă 5 picături de soluție ninhidrină și se încălzește până la fierbere. Dezvoltă de culoare roz-violet, care trece timpul în albastru-violet.
№3 «ksantoproteinovaya reacție“ Reacție
Principiu: atunci când este adăugat la soluția de proteină de acid azotic concentrat și încălzirea colorația galbenă apare, care, în prezența alcaliilor trece în portocaliu. REZUMAT reacția este nitrarea inelului benzenic aminoacidul ciclic cu acid azotic pentru a forma compușii nitro pentru a precipita. Reacția detectează prezența proteinelor în aminoacizi ciclici (fenilalanină, tirozină, triptofan).
Reactivi: 1) albus de ou, soluție de 1%; 2) acid azotic concentrat; 3) Hidroxid de sodiu, soluție 10%.
Proceedings definiții: 5 prin adăugarea prin picurare soluție de albuș de ou se adaugă 3 picături de acid azotic este încălzit (atenție!). Se pare precipitat galben. După răcire (de preferință în precipitat), 10 picături de soluție de hidroxid de sodiu, o culoare portocalie.
№4 «Adamkevicha reacție» reacție
Principiu: aminoacidul triptofan în mediu de acid, care interacționează cu acizii aldehide, produși de condensare formează o culoare roșu-violet.
Reactivi: 1) nediluat albus de ou; 2) un concentrat (acid acetic glacial); 3) acid sulfuric concentrat.
Proceedings definiții: una sub formă de picături de proteină adăugat 10 picături de acid acetic. Bascularea peretele tubului se adaugă, cu atenție, în picături, aproximativ 0,5 ml de acid sulfuric, astfel încât lichidul nu este amestecat. Pe picioare tuburile în marginea lichid apare inel roșu-purpuriu.
reacția №5 «Reacția Nogier“
Principiu: Aminoacizii care contin sulfhidril - SH. supus la hidroliză alcalină cu sulfură de sodiu Na 2 S. Acestea din urmă, care interacționează cu plumbite de sodiu (format în timpul reacției între acetat de plumb și hidroxid de sodiu), formează un precipitat de sulfură de plumb PbS negru sau maro.
Reactivi: 1) albus de ou, soluție de 1%; 2) reactiv (până la 5% soluție de acetat de plumb Foll a fost adăugat un volum egal de soluție de hidroxid de sodiu 30% pentru a dizolva precipitatul format).
Proceedings definiții: 5 prin picurare la soluția de proteină de ou a fost adăugat 5 picături de reactiv Foll și refluxat timp de 2-3 minute. După un repaus de 1-2 minute apare un precipitat negru sau maro.