Lab - diagnosticul de bruceloză
Scopul claselor: pentru a explora metodele de diagnosticare a brucelozei.
Materiale si echipamente: un injector needleless sau set de studii pentru set alergic pentru setarea ace BPO pentru colectarea sângelui, un set de diagnostic, seruri pozitive, antigene, vaccinuri antibrucellar; brucelină VIEV, dezinfectante.
Locul de muncă: Laboratorul de Departamentul de Epidemiologie.
Bruceloza - procedând în mod cronic boli infecțioase a animalelor cauzate de bacterii din genul Brucella, care cuprinde 6 specii distincte: B. melitensis - agentul cauzal al brucelozei la ovine și caprine, B. abortus - bovine, B. suis - porci, reni, iepuri de câmp, B. ovis-oi, câini B. canis-y, B. neotomae - de la șobolanii din lemn. B. melitensis și B. abortus pot migra la alte specii. De la animalele bolnave pot fi infectate cu oamenii pentru care agentul cauzator cel mai periculos de bruceloză de ovine și caprine.
Diagnosticul de bruceloză se bazează pe rezultatele studiilor bacteriologice, serologice, alergice și clinice ale datelor epizootice.
Semnele clinice ale bolii la animale sunt mai puțin frecvente - avort, artrita, bursita, endometrita, vaginită, orhita, epididimita poate apărea în multe alte boli.
modificări patologice bruceloza, de asemenea, maloharakterny. Diagnosticul mai fiabile și precise, de laborator, t. E. Izolarea și diferențierea parazitului.
In studiile de laborator patogen detectat prin trei metode: frotiu, izolarea unei culturi pure a materiei prime și, dacă este necesar, prin bioanalize la cobai.
Frotiuri sunt colorate Gram, Kozlovski, Shuljak autobuz, Stump. Brucella - mici cocobacil Gram-negative, aranjate în perechi sau heap. La colorat de Kozlovski, Shuljak autobuz, celule Stump Brucella roșu.
Pentru cultura de bacterii utilizate hepatic bulion de carne-peptonă (MPPB) și hepatice de glucoză-glicerol bulion (PGGB), agar de cartof și altele. Culturile au fost plasate într-un incubator la temperatura de 37 ... 38 ° C și navigare ... 4 la fiecare 3 zile până la 30 zile. In Brucella bulion pentru a forma turbiditate uniformă și inel parietal mai departe - o peletă mică în partea de jos a tubului. Agar cresc sub forma unor mici colonii convexe lucioase translucide gri. Cultura izolată este identificată în aglutinare (PA) pe sticla cu un ser pozitiv Brucella.
Pentru bioanaliză folosind doi cobailor cu 350 ... 400 g, pretestate pentru metoda bruceloza serologic (rezultat negativ într-o diluție de 1 RA 5).
materie primă suspensie în soluție salină sterilă (1:10) a fost administrat subcutanat la interior porcii de Guineea coapsei, la o doză de 1 ml. 15, 25, 40-a zi de ser sanguin de porc a fost testată în eprubetă RA într-o diluție de 1 la 10 la 1. 80. Într-un RA pozitiv (în creșterea 1. 10 și peste) cobaii sunt uciși, materialul lor sunt explorarea metoda bacteriologică. Atunci când bioanalize RA negativ sunt considerate negative.
În cazul în care studiile de masă sunt serologică importante și metode de diagnostic alergice de bruceloză:
La bovine, iaci, zebus, bivol - ser: RA în eprubete, fixarea complementului (RSK) sau reacția de fixare a complementului unei lungi (RDSK) aglutinarea placă cu antigen Rose Bengal - Test Rose Bengal (BPO), inelul reacția cu lapte (KR), reacția de imunodifuzie cu antigen O-PS (RID);
La oi, capre, cerbi, cerbi, cai, cămile, ser: RA, DGC / RDSK, LSO; alergice;
La porci - sero: DGC / RDSK, LSO; alergice;
La câini și alte specii - ser: RA, RSK.
Reexaminarea animalele pentru metoda serologică bruceloza în 15 ... 30 zile, alergic - în 25 ... 30 de zile.
Vaci (juninci), bivoli, cămile investiga indiferent de perioada de gestație, oi (kozematok) și svinomatok- prin 1 ... 2 luni după naștere, animalele tinere de toate felurile - de la vârsta de 4 luni.
vite mari și mici imunizați împotriva brucelozei, testate în modul și în termenele prevăzute de instrucțiuni cu privire la utilizarea vaccinurilor, și să evalueze starea lor
bruceloză Boala considerată stabilită la alocarea cultura Brucella a bioanaliză pozitive biomaterial sau rezultatele pozitive ale acestor studii serologice animale nevaccinate: Bovine (bivoli, iaci, zebu), cămile și cai - simultan în RID și RA titrul de anticorpi de 200 UI / ml și mai sus; ovine și caprine - RA cu titru de anticorpi de 100 UI / ml și mai sus; cerbi (marals) și câinii cu anticorpi RA titrului 50 UI / ml și mai sus; animale de toate tipurile - în DGC într-o diluție a serului de 1 și 5 de mai sus.
Pentru studii serologice pozitive la animale nevaccinate: Bovine (bivoli, iaci, zebu), cămile, cai, - numai în RA cu titru de anticorpi de 50 ... 100 UI / ml; oi, capre, cerbi (marals) RA cu titru de anticorpi de 25 ... 50 UI / ml - reexaminată după 15 ... 30 zile. La titruri mai mari este considerată boală stabilită;
În cazul în care titlurile sunt aceleași, ele au recurs la cercetări suplimentare (în conformitate cu normele adoptate).
Boala este considerată stabilită dacă bruceloza pretenții în efectivele de bovine identificate animalele vaccinate anterior răspund pozitiv la RA cu titru de anticorpi de 100 UI / ml și mai sus sau (ii) RNC (RDSK) la o diluție de 1 și 5 de mai sus.
turme imunizate de ovine și caprine recunosc bruceloza disfuncțională dacă examenul bacteriologic pozitiv al fetușilor avortați sau bioanaliză pozitive, precum și identificarea între berbeci, samplere și animale vii pozitiv sensibile la RA cu titru de anticorpi de 100 UI / ml și mai mari, RSK la o diluție a serului de 1 și 5 de mai sus.
pacienții bruceloză recunosc dacă test de alergie este confirmat pozitiv RSK.
Brucelina administrat la porci pe exteriorul atriului la o doză de 0,2 ml. Reacția a fost citită la 24 și 48 de ore prin palparea locul injectării. Pacienții cu animale la locul de răspuns inflamator notă alergen sub formă de umflare sau testovatoy consistență densă. În reacția locală sănătoasă este absentă.
Rezultatele studiului de bovine în RID și CD au fost evaluate în conformitate cu instrucțiunile privind formularea și integrarea acestor reacții.
exerciţii
1. Se examinează la microscop produse finite.
2. Descrie creșterea unei culturi a Brucella pe medii nutritive.
3. Evaluarea rezultatelor de pre-set RA in vitro și KR cu lapte.
4. Pune și să ia în considerare pentru bruceloza BPO (fig. 8).