Diagnosticul mamitelor subclinice - aplicarea unor metode eficiente de diagnostic, tratament și
Diagnosticul mamitelor subclinice
mastita Latent este diagnosticată prin examinarea laptelui un test de diagnosticare rapidă, urmată de confirmarea diagnosticului și tasării defalcare bacteriologic.
Vacile de la fermă ecranate pentru mastita latentă o dată pe lună. Examinati portii de lapte după muls.
Metode de laborator se bazează pe metode directe și indirecte pentru numărarea celulelor somatice.
Prin metoda directă includ numărarea a sticlei-Preskottu Breeden, care este un control și pentru numărarea automată a celulelor somatice în lapte.
Când acest diapozitiv microscop curat este plasat pe o hârtie căptușită cu tablă în pătrate cu latura de 1 cm. Eșantionul de lapte sunt amestecate bine cu ajutorul unei micropipete și depus pe 3-4 diapozitiv pătrat la 0.01 cm 3. desen o picătură de lapte este distribuit uniform pe suprafața unei baghete de sticlă pătrată sau ac de disecție. Pătarea uscate cu aer, fixate și aplicarea simultană primul metanol degresate timp de 10-15 minute și apoi amestecul alcool-eter pentru a se usca. Soluție de lucru cu cerneală frotiu pătată Romanowsky-Giemsa (3-4 ml dintr-o soluție comercială la 100 ml de apă distilată) prin underplating sau poziție verticală fereastră timp de 20-30 minute. După colorarea frotiul se spală cu apă și se usucă la temperatura camerei. Numărarea celulelor somatice sunt sub microscop cu obiectiv de imersie. Fiecare navigare frotiu 100 de câmpuri. Numărul de celule numărate înmulțită cu un factor care ia în considerare valorile cristalinului și ocularul și determinarea valorii lor în 1 cm3 de lapte. Pentru îndepărtarea coeficient utilizând câmpul determinată cu diametrul obiect metru de vedere al microscopului și calcularea suprafeței de un câmp de vedere conform formulei 2. yar apoi calculat cât de mult domeniile de vedere al microscopului sunt aranjate pe o suprafață de 1 cm 2. Acest rezultat este convertit în volum.
Exemplu: determinarea ratei de conversie la 7 și un obiectiv ocular 90. Câmpul vizual 17 divizii situate obiecta metru. Dimensiunea o divizie - 0,01 mm. Diametrul câmpului vizual - 17 x 0.01 mm = 0,17 mm, raza - 0.085 mm. Zona de un câmp vizual - 3.14 0.085 x 2 = 0,023 mm 2 sau 0,00023 cm2 suprafață de câmpuri de vedere va fi egală cu 0,00023 cm2 = 0,023 x 100 cm 2. Pe o suprafață de 1 cm2, astfel de situri vor fi: 1: 0,023 = 43,48. Luat volum de lapte 0,01 cm3 până la 100 de ori mai mic decât raportul 1cm 3, în acest caz, va fi egală cu 4348 (43,48x100).
Pentru rezultatul final este media a două repetiții.
Privind metodele directe pentru numărarea celulelor somatice includ metode de camera pentru NM Khilkevich, II Archangelsky și colab. VI modificare Slobodjanik, numărate folosind un dispozitiv electronic "Fossomatik". Contoare de particule electronice: tselloskop "Coulter Contoare" pikoskel, hemocytometer conductimetrică marca GTSMK-3 și altele.
Celulele somatice indirecte determinate utilizând reactivi de diagnostic belomastina, mastidina, dimastina, mastoprima, proba Whiteside care conține compuși activi de suprafață (surfactanți). Tensioactivii perturba membranelor celulare, ADN-ul eliberat din miezuri și introduceți-l într-o reacție pentru a forma un jeleu. În funcție de gradul de educație cheag de gelatinos judecat indirect asupra numărului de celule somatice din lapte. Laptele de reacție cu un reactiv de diagnostic efectuat pe plăcile de control al lactatelor sau PLA-1 PLA-2 având patru lune respectiv fracțiuni de ugerul vacii. Determinarea celulelor somatice utilizând reactivi de diagnostic efectuate în lapte de la lobi ugerului individuali sau muls vaci.
După fiecare studiu trebuie să fie spălate o placă laptoasa control.
Testul cu belomastinom. Reacția se bazează pe capacitatea unui surfactant pentru a forma un gel cu lapte care conține celule somatice. In laptele de studiu (secreție) a ugerului vacilor, diagnosticum diluat cu apă distilată sau fiartă într-un raport de 1: 3 (100 ml belomastina adăugat 300 ml de apă). Timpul de utilizare a soluției de lucru de 8 luni.
Pentru a efectua teste cu o placă lune belomastinom lactic de control (MCP-1) din lobii ugerului respective mulse la 1 ml de lapte și 1 ml din soluția de lucru diagnosticum prin pipetă. Amestecul a fost agitat cu un reactiv de baghetă de sticlă de lapte în termen de 9-10 secunde. Rezultatele reacției:
Reacția negativă (-) - amestec lichid rămâne omogen;
reacție îndoielnic (-, +) - filet mucoase formate din amestec;
reacție pozitivă (+) - amestecul devine consistența unei mase scarbosi sau un cheag gelatinoasă.
Pentru monitorizarea rezultatelor tratamentului pacienților cu lapte mastita de animale testate timp de 10-14 zile după administrarea medicamentului.
În colectarea laptelui cu o reacție negativă a conținut de 1 ml la 500 de mii de celule somatice, îndoielnice - de la 500 mii la 1 Mill.;. cu pozitiv - mai mult de 1 milion.
Eșantionul conținând 2% soluție mastidina. Pentru a prepara o soluție mastidina 2% până la 100 ml dintr-o soluție 10%, industria de origine fabricate, se adaugă 400 ml apă distilată sau fiartă. În placa lune lactic de control (PLA-1-PLA 2) din lobii ugerului respective nadaivayut la 1 ml de lapte și 1 ml de soluție 2% preparată mastidina folosind o pipetă sau distribuitor mașină lichid. Amestecul a fost agitat cu un reactiv de baton de lapte în fiecare lune PMC-1 alternativ timp de 10-15 secunde. Când utilizați PMK-2 cu reactivul amestecarea laptelui se realizează simultan în toate lune, prin rotirea plăcii rotative în plan orizontal. Să ia în considerare reacția densitatea jeleul:
Reacția negativă (-) - lichid omogen;
reacție îndoielnic (-, +) - urme formarea aspic;
reacție pozitivă (+) - cheag clar vizibil, care poate fi aruncat din bagheta lune cu agitare.
Pe PMC placă 2 pentru reacții negative:
(-) - un amestec omogen;
(-, +) - când reacția îndoielnică în timpul rotației plăcii cu fundul de filamente Lune sesizabile subțiri (toroane), cu nici o tendință de formare a cheagurilor;
(+) - reacție pozitivă aspect distinct sau slab formează rapid un cheag dens concentrat sub placa de rotație în semiluna centru.
Determinarea pH-ului asupra laptelui culoare cu soluție 2% mastidina:
lila pal, afumat - pH normal de lapte (pH = 6,5-6,8);
aproape alb - aciditate ridicată de lapte (pH mai mic de 6,5);
întuneric violet - lapte a crescut alcalinitate (pH mai mare de 8).
Proba cu 5% mastidina de sodiu. soluția mastidina se prepară folosind apă distilată sau apă fiartă caldă.
probe de formulare și menținerea reacției zheleobrazovaniya se efectuează ca în studiu cu 2% soluție de lapte mastidina.
Determinarea pH-ului culorii laptelui:
portocaliu, roșu-portocaliu (roșu-portocaliu) - lapte reacție normală (pH = 6,5-6,8);
galben - creșterea aciditate lapte (pH mai mic de 6,5);
roșu - alcalinitate ridicată de lapte (pH mai mare de 6,8);
alcalinitate pronunțată a laptelui (pH mai mare de 7,0) - cărămizii și purpurii.
Proba cu 1% soluție mastoprima. Prepararea Mastoprim reprezintă pulbere gălbuie constând dintr-un amestec Sulfanol (4 părți) cu hidroxid de sodiu (1 parte). soluție mastoprima a fost preparată în apă distilată.
probe de formulare și menținerea reacției zheleobrazovaniya se efectuează ca în studiu cu 2% soluție de lapte mastidina.
Testul cu dimastinom (. Mutovin pe VI) Dimastin include reactiv 2: un akrilsulfonat surfactant și bromcresol indicator violet.
Testul cu acid rozolovoy. Milky bine controlează placa de luare de 10 ml de lapte și se adaugă soluție de acid rozolovoy 1 ml 0,1% în alcool 65%. În mod normal, conținutul devine o culoare roz deschis. În patologia conținutului de colorat are o culoare de la lumină la roșu închis.
Testul cu diagnostician mastita. Compoziție mastitelor diagnostician includ: 100 ml apă, 5g Sulfanol-30-trinolinfosfat, bromtimol albastru - 0,02 g, 1% rozolovoy soluție de acid 0,5 ml.
În godeurile de control al plăcii lactic face 1 ml de lapte și 1 ml de reactiv și se amestecă. amestec omogen - laptele de la vaci sănătoase; prezența unui cheag dens ca un gel, masa vâscoasă sau rareori mâzgă - reacție pozitivă la mastitelor latentă.
eșantion bromtimol Erast. Reactiv: 0,1 g bromtimolblau + 100 0 96 ml alcool. Ia 5 ml de lapte și 1 ml de reactiv într-un tub de testare este agitat. De culoare gălbuie normală, galben, galben-verde, galben-verde. Patologie - lumina verde, verde, verde stralucitor, albastru-verde și albastru
eșantion de bromtimol de Logvinova. Reactiv: 0,1 g indicator bromotimol 20 + 0 96 ml alcool + 80 ml apă distilată. Ia 1 ml de lapte și 1 ml de probă bromotimol în dispozitiv Lune pentru determinarea calității laptelui. Dacă culoarea albastră a amestecului, reacția este pozitivă. Dacă gălbui sau fără modificări, reacția este negativă.
Testul cu benzidină. Acesta este utilizat pentru a detecta sânge în pigmenții de lapte. Tubul a fost turnat 5 ml de soluție de apă oxigenată 3% și 2 ml dintr-o soluție saturată de benzidina în acid acetic glacial. După agitare perfectă amestecul se adaugă 2-10 picături de lapte. O reacție pozitivă - amestecul a fost pictat mai întâi în verde, și un minut în culoarea albastru închis; negativ - un amestec de lumină cu un precipitat floconos albicios.