Determinarea concentrației de hemoglobină

Cele mai importante metode de determinare a concentrației de hemoglobină - colorimetric. Ele sunt utilizate pe scară largă în practică, datorită simplității și accesibilității lor.

Metoda hematitul (metoda Sali). Pe baza conversiei hemoglobinei atunci când este adăugat în sânge hlorgemin acid clorhidric (clorură de hematita) de culoare maro, intensitatea culorii este proporțională cu conținutul de hemoglobină. Soluția rezultată de clorură de hematita diluată cu apă până la un standard de culoare în funcție de concentrația de hemoglobină cunoscută.

Determinarea se efectuează într-un colorimetru simplificat - gemometre Sali. Acest dispozitiv constă dintr-un material plastic cu trei mufe trepied verticale. Fantele laterale sunt 2 tuburi sigilate cu un lichid etalon. La gemometra jack secundar introdus tub deschis în sus de sticlă gradată de același diametru ca și standardele de culoare. Tubul gradat are o scală cu gradații indicând cantitatea de hemoglobină în grame la 100 ml de sânge, adică, în Procente gram (z%). Când gemometre au pipete speciale pentru apă și tijă de agitare.

Tubul gradat turnat la numărul de fisiune etichetat „2 g%“ (marcă circulară inferioară), 0,1 g% soluție de acid clorhidric.

Apoi câștigă sânge în pipeta capilară la o marcă „0,02 ml“ suge gura prin tub de cauciuc (asigurați-vă că coloana de sânge sa încheiat exact la nivelul etichetei nu este rupt și bule de aer). Ștergând exteriorul lână vârful pipetei, se înmoaie într-o eprubetă cu 0,1 g% soluție de acid clorhidric și sânge atent suflat. aspirație repetată și suflare lichid de clătire topsheet pipetă. Tubul a fost agitat și, observând timpul, a pus într-un trepied de mai multe ori. Pentru conversia completă a hematita clorură de hemoglobină necesită cel puțin 5 minute. După 5 min gemometr ridicat la nivelul ochilor, și compararea culorii lichidului de testat cu standardele de culoare. De obicei, (cu excepția cazului în anemie extrem de severă) este mai închisă decât tuburile standard. Folosind pipeta non-graduate la soluția de testat a fost adăugată în picături la apă distilată și se agită cu o baghetă de sticlă și în comparație cu standardele. De îndată ce culoarea lichidului probă va fi identic cu standardele de culoare, spune ce diviziunea scara corespunde nivelului lichidului (la meniscul inferior) in vitro.

Industria produce gemometry crustei conținând gram-procente.

Pentru rata de ideală luarea concentrației de hemoglobină în sânge egală cu 16,67% g sau 166,7 g / L.

În cazul în care toate regulile gemometrom lucrează cu unul și același pacient în determinarea hemoglobinei în sânge porțiuni diferite rezultate divergente obținute în intervalul ± 0,3 g% (3 g / l).

Metoda Tsianmetgemoglobinovy ​​este cea mai exacte, cele mai multe țări au adoptat ca un standard.

Ea se bazează pe transformarea hemoglobinei în cyanmethemoglobin atunci când este adăugat reactiv de sânge. concentrația de Cyanmethemoglobin se măsoară fotometric. Ca soluție utilizare Drabkin reactiv (NaHCO3 - 1 g, KCN - 0,05 g, K3 [Fe (CN) 6] - 0,2 g apă distilată, - până la 1 litru) sau orice altă cu efecte similare.

Sub influența glandular hemoglobină potasiu sinerodistogo este oxidat la methemoglobina (Hb), care este apoi transformat prin potasiu în cyanmethemoglobin cianinei (hemoglobincyanide). Cea mai mare diluție comun de sânge în reactiv Drabkin lui - 1. 250 (0,02 ml de sânge și reactiv 5 ml). După 20 de minute necesare pentru conversia completă a hemoglobinei în hemoglobincyanide, ekstiktsiyu măsurată la o lungime de undă de 540 nm și o grosime a stratului de 1 cm față de apă pe un SF-4 sau FEC-M și photoelectrocolorimeter ca.

În prezent, a stabilit standarde puternice tsianometgemoglobinovye în fiole, concentrația de hemoglobină definită cu precizie corespunzătoare.

Au fost examinate soluțiile rezultate pentru photoelectrocolorimeter și trasează curba de calibrare prin reprezentarea grafică a densității optice din scala instrumentului (cifre cu tambur roșu) pe ordonată, iar concentrația de hemoglobină în grame pe litru pe abscisă. a crea o foaie de lucru bazată pe curba de calibrare, indicând concentrația de hemoglobină care corespunde acestei indicații FEC.

Colorimetrele Acolo, special concepute pentru determinarea hemoglobinei - hemoglobinometers. Cele mai multe dintre ele folosite tsianmetgemoglobinovy ​​metoda. Masuratoare de hemoglobina poate funcționa independent sau în combinație cu contoare de particule. Deci, globinometer „Coulter“ (Franța), care poate fi utilizat singur, dă dovadă directă a hemoglobinei în grame la 100 ml. Instrumentul are o înaltă precizie și reproductibilitate g ± 0,1% (1 g / l).