detecție cantitativă - studopediya

În funcție de concentrația care orentirovochno considerată după spectrul de îndepărtare în UV, o cotă parte de eluați etanol (V4) și transferat într-un flacon de cântărire din sticlă. Etanolul a fost îndepărtat sub un curent de aer cald, reziduul uscat se dizolvă în 0,2-0,5 ml de etanol și se adaugă la 3 ml de soluție de acid clorhidric 2N. În plus serial la 0,5 ml dintr-o soluție 0,5% de sulfamat de amoniu. După adăugarea fiecare soluție de reactiv a fost agitat viguros. Azo culoare magenta este format după 15 minute după adăugarea a 1 ml dintr-o soluție 0,1% din N- L-naftiletilendiamindihlorida. Colorație este stabil timp de zile.

Absorbanța soluției colorate se măsoară cu un spectrofotometru sau photoelectrocolorimeter la 500 nm într-o concentrație strat 1cm cuvetă tolschennoy absorbant a fost determinată prin formula în organele .:

număr X de compus izolat în mg per 100 g corp;

O densitate optică măsurată a soluției;

E 1% 1cm - rata de absorbție specifică (220)

Alte denumiri scrisoare sunt prezentate în text.

Determinarea indicelui de absorbție specifică.

Cele trei tuburi de calibrare dimensionale (pentru determinări în trei exemplare) în 5 ml se pipetează 0,1 ml (100mcg) preparare standard de soluție alcoolică (1 mg / ml), se adaugă 3 ml de soluție de acid clorhidric 2N și hidrolizată timp de 30 de minute pe baia de glicerol la 125-135 ° C sub reflux. La terminarea frigiderului hidrolizei se spală cu 1 ml de soluție de acid clorhidric 2N și apoi cuplarea hidrolizată a fost ajustat la 5 ml din acesta.

Din fiecare digera in masurarea tubului se face la 0,1; 0,25; 0,5% 0,75; 1 ml (2,5, 10, 15, 10 mg substanță) a fost ajustat cu soluție de acid clorhidric 2N până la 3 ml și au reacționat Formarea colorantului azoic așa cum este descris mai sus. După determinarea densității soluției colorate la 550 nm, rata de absorbție specifică a fost calculată cu formula;

E 1% 1cm = A / C • L; unde

În densitatea optică a soluției;

C-concentrația soluției în procente de greutate;

L-absorbant Grosimea stratului în cm.

Studiu privind compusul cu metaboliții nativi.