Deshidratarea și umplere material - practica histologist

După fixare, formol pentru care a fost utilizat, piesele au fost spălate de 6, 12 sau 24 de ore în apă curgătoare de la robinet pus pe un tub de cauciuc al cărui capăt este cufundat în borcan gura larg, acoperit cu un tifon. Pentru desicatoare spălare convenabil de a utiliza diferite dimensiuni, prevăzute cu o macara: gaură în capac exicator coborât furtun prin care este alimentat cu apă, și într-un robinet desicator este drenat.

În cazul zăvorului inclus acid picric, materialul trebuie să fie clătit în mai multe schimbări de alcool de 70%, după fixarea folosind clorură mercurică - iodat în alcool 70%.

Dacă este necesar, bucățile de țesut înainte de deshidratare poate fi redusă asieta. Dacă materialul după fixarea nu este imediat supus cablajului, poate fi lăsat în alcool de 70-80%.

deshidratare METODE țesut

Înainte de turnarea materialului în parafină sau celloidin trebuie deshidratată. Există mai multe metode tradiționale de deshidratare. Cel mai comun este deshidratat în alcooli de creștere a concentrației, începând cu 70%. De obicei, se folosesc alcooli baterie. constând din două porțiuni 96 și două% - 100% alcool. Durata procesului de deshidratare în alcooli medie 48 de ore, în funcție de calitatea materialului (țesut adipos) și bucăți de mărime, precum și de numărul lor. Când utilizați aparatul pentru o cantitate de alcool de umplere este crescut, iar atunci când se realizează bucăți de bateria manual de alcool lor cu atenție și șters cu o cârpă de hârtie de filtru sau un tifon, care permite să se schimbe alcoolii în bateria mai puțin frecvent.

Procesul deshidratării poate fi accelerată prin scuturarea ocazional bucăți în bănci cu alcooli sau prin plasarea lor într-un incubator la 37 ° C Alcoolii din bateria trebuie să fie înlocuit în timp util. Alcoolul adecvat permite probei de control cu ​​apă. Cutiile turnate dintr-o cantitate mică de alcool s-a adăugat 1 picătură de apă. Turbiditatea soluției indică necesitatea de a înlocui alcool în baterie.

fără impurități acetonă (puritate analitică) este utilizat pentru a accelera Deshidratarea adăugarea în prealabil gel de silice pentru a îndepărta apa reziduală sau acetonă distilată. Deshidratarea este efectuată la 2-3 schimburi de acetonă de la câteva ore până la 1 zi, în funcție de obiecte.

Deshidratarea țesuturilor este posibilă utilizând 99% alcool izopropilic, care se amestecă în mod direct, fără solvenți intermediari parafină (xilen, cloroform, etc.).

Are aceeași dioxan proprietăți, dar din cauza toxicității ridicate nu a găsit aplicarea pe scară largă în patohistologice art

Pentru deshidratare glicerol [Becker GM 1958; . Wolf J. 1939, etc.] piese de țesut au fost plasate succesiv în 60%, 80% și 100% glicerol, timp de 3 - 4 ore, apoi un amestec format din părți egale de 100% glicerină și xilen.

efect pronunțat asupra ratei de deshidratare are radiații cu microunde. Obiecte în etanol 70% a fost introdus pentru 20 de secunde într-un cuptor cu microunde (2,5 Hz / 500 V), și apoi doobezvozhivayut în alcool absolut timp de 30-60 minute.

Material secționată și biopsie adesea deshidratată în dispozitive de tip AT-5 și altele., urmată de impregnare cu toluen, cloroform sau un amestec al acestora cu parafină. Astfel, se aplică două porțiuni de etanol 96% și două 100%. Durata totală de 48 de ore de deshidratare. Avantajul folosirii utilajelor este acela că în ele materialul este în mod constant amestecate și este în suspensie. Cu toate acestea, aparatul nu este în mod automat după o scădere bruscă a tensiunii de alimentare, ceea ce poate duce la uscarea excesivă a unor cantități mari de material.

Material pentru obținerea subțire (până la 6 microni) secțiuni histologice trebuie fixate și spălate este turnat în mediu dens preîmbibate în felii sale de țesuturi. În funcție de metoda de dizolvare Mediu de înglobare se separă în solvenți organici solubili și solubili în apă. Primele includ parafina, polimeri pe bază de ceară de plastic, celloidin, la al doilea - gelatină, polietilenglicoli, polieteri, metacrilați, etc. Unele

Umpleți țesutul în parafină.

Parafina - un amestec de hidrocarburi de înaltă moleculare saturate, distilate din petrol; Se dizolvă în anilină, benzen, ulei de bergamot, celosolv, cloroformul, decalină, dioxan, butanol, propanol, toluen, tricloretilenă, xilen. Fiecare dintre acești solvenți pot fi utilizate ca mediu intermediar între alcool și parafină. Punctul de topire al diferitelor parafinelor din 27 până la 62 ° C. Tehnica histologică utilizată parafină cu punct de topire de 56 ° C Companiile străine produc parafină personalizate pentru studii histologice care conțin diferiți polimeri din plastic, cum ar fi dimetil sulfoxid. Numele lor comerciale "Paraplast", "Paraplast plus", "Gistoplast C", "Gistozes".

10% formalină 24 ore

formol alcool 24 h

Carnoy 2-4 ore lichid

12-24ch alcool 96-100%

clătirea cu apă curentă 12 -24 h