Cutura embrioni in vitro
Cultivarea embrionilor este un pas important in procedurile FIV. Cu privire la modul de succes va fi depinde de implantarea embrionului ulterior. Tehnicile de cultivare sunt în mod constant îmbunătățite, acordând o atenție deosebită acordată mediului de cultură. medicamente moderne sunt cele mai asemănătoare în compoziție condițiile naturale ale organismului matern.
Care este cultura embrionului?
Cultura embrion este procesul de creare a condițiilor de fertilizare a ovulului și dezvoltarea sa ulterioară. Toate etapele au loc în condiții de laborator într-un mediu special având o compoziție în mod substanțial aceeași ca lichid în tuburile uterului si uterine.
Pornind de embrion cultivarea are loc într-o zi după îndepărtarea din foliculul organismul feminin. Embriolog evaluează fertilizarea ofensatoare și stabilește data presupusă a transferului de material in uter.
Cultivarea prelungită a embrionilor - una dintre cele mai recente evoluții în acest domeniu al științei. Esența acestei proceduri este că cultivarea este continuată timp de 5 zile la stadiul de blastocist, cu o capacitate mare de fixare pe un perete al uterului. Abilitatea de a ajunge la un nivel de dezvoltare a fost văzută ca dezvoltarea unor substanțe speciale care mimează micromediul a corpului feminin.
Mediul nutritiv pentru cultivarea embrionilor dezvoltat din 1912. Inițial au fost o soluție de sare fiziologică. Mai mult de un secol a fost îmbunătățit compoziția acestor substanțe. In 1985, menținându-le în albumina - o sursă de aminoacizi - a devenit un progres major și a permis să crească până la embrioni 2-3 zile.
Acest mediu este numit fluid Tubal uman. Analiza ulterioara a aratat ca dezvoltarea ovulului fertilizat nu este una și aceeași substanță, dar diferite. Acest lucru a dus într-un mediu în două etape, care sunt în prezent în uz.
Cele mai recente de dezvoltare, îmbunătățirea calității procedurii - cultivarea embrionilor în mediul EmbrioGen. Acesta conține GM-CSF - factor de stimulare a coloniilor de macrofage granulocite, care este prezent în concentrații mari în uter înainte și în timpul atașării embrionului la perete, precum și în timpul sarcinii Sway. La femeile cu infertilitate este practic inexistentă.
EmbrioGen miercuri îmbunătățește calitatea și viabilitatea materialului FIV transferate crește probabilitatea de implantare de succes și de gestație ulterioară. Este indispensabil pentru pacienții care nu au avut succes in incercarea de fertilizare in vitro. și în cazurile în care este posibil să se facă gardul doar una sau două ouă.
Cultivarea embrionilor începe a doua zi după puncție cu extragerea ovulelor și fertilizare. Cultivarea are loc în mai multe etape:
- Etapa de ou matur - 1 zi. Embriolog evaluează succesul de fertilizare, separă materialul de calitate scăzută. Această etapă a pro-nuclee. Transferul greu de practicat, dar este posibil celulele krikonservirovat.
- Stadiul unui ovul fertilizat cu doi pronuclei - a 2-a zi. Prin acest timp, zigotul se formează (fuziune a genomului masculin și feminin), apare prima strivirea. Oul devine un embrion. A evaluat calitatea gradului de fragmentare, forma și dimensiunea blastomeres.
- Etapa embrion 4 celule - a treia zi. In cele mai multe cazuri, în momentul în care embrionul este un 6 sau 8 blastomeres. Activarea genomul propriu, cu privire la modul este de succes și în timp util depinde de etapele ulterioare de cultivare. Atunci când un set de cromozomi există erori, dezvoltarea este oprit ( «in vitro bloc de dezvoltare").
- Etapa embrion 8 celule - a 4 zi. Începând cu stadiul de morulă: spațiul dintre celulele sigilate, suprafața devine mai fina. Embrionul în acest moment este format din 10-16 blastocysts. Până la sfârșitul celei de a 4 zi în morulă apare cavitatea - începutul cavitație.
- etapa Compact morulă - 5-a și ziua a 6. Volumul cavității ocupă jumătate din morula - embrionul devine blastocist. Se compune din masa de celule interioare și trophoblast, care prevede implantare.
Avantaje și dezavantaje ale fiecărei faze de cultivare
În fiecare zi de cultivare, există puncte pozitive și negative pentru transferul embrionului în organismul feminin:
- 1 zi. Avantajele unui astfel de perioadă scurtă de timp că potențialele efecte negative ale condițiilor de cultură este minimă. problemele de transport în uter, datorită faptului că embrionul fiziologic în acest moment trebuie să fie în trompa uterină (nu in uter). În plus, este dificil de evaluat calitatea acesteia.
- 2 ore. Pro este faptul că embrionul nu este lung în afara mediului natural și putem face o selecție primară de copii de înaltă calitate, de când a început strivire. Contra: Încă nici o modalitate de a separa embrionii cu tulburarile de gene nu se pot face diagnosticul genetic preimplantare.
- 3 ore. Punctul pozitiv este că este posibil să se separe embrionii, care au rămas în urmă de dezvoltare sau se oprește. Dezavantajele sunt aceleași ca și în ziua 2.
- 4 zile. moment pozitiv în acea perioadă că embrionul a ajuns la stadiul în care există mișcarea sa de trompe în uter, și anume introducerea sa în cavitatea să fie aproape de fiziologic. O astfel de embrioni lung cultivarea «in vitro» ajută la depășirea „unitate de dezvoltare“ - „într-o eprubetă (sticlă)“ strivire oprire Pe acest termen este deja posibil pentru a efectua diagnosticul genetic preimplantare (PGD). Dezavantajul: este dificil de a evalua morulae de calitate.
- 5 zile. În această perioadă de 2 ori probabilitatea de blastocite implantare a crescut în comparație cu embrionii cu două sau trei zile. A existat o selecție a celor mai puternice și de înaltă calitate copii, au cunoscut o „dezvoltare bloc» «in vitro», PGD pot fi efectuate pentru a evalua calitatea blastocysts. Dezavantajul poate fi numit că, dacă toți embrionii sa oprit într-un stadiu anterior, pacientul experimentat stres sever, se confrunta cu pierderea de oportunități pentru a obține gravidă.
efecte secundare
În timpul procedurii de FIV nu toate ouăle devin embrioni. Conform statisticilor, acest indice ajunge la o medie de 60-70%, cu o fertilizare standard si 80-90% cu injectarea intracitoplasmatică de spermă în ou.
La stadiul de blastocist, gata pentru transplant in uter, dezvolta aproximativ 40% dintre embrioni. Și este medie, în practică, există cazuri cu o probabilitate mai mică de succes.
Cultivarea embrionilor «in vitro» are loc la o constantă calitate de copii de evaluare Embriologul. Pentru o lungă perioadă de timp mediu pentru dezvoltarea ovulului fertilizat a fost lăsat să crească nu mai mult de 3 zile. A fost posibil să se obțină o cantitate mai mare de material, dar nu a fost posibil să se evalueze cu exactitate viabilitatea.
Odată cu apariția mediilor din două etape au devenit disponibile cultivare îndelungată - până la 5-6 zile. articole de calitate, dar numărul lor a scăzut devin mai ușor de identificat. A existat riscul ca o zi de 4-5 nu va exista nici un embrion. În acest caz, este imposibil să se determine ceea ce a dus la oprirea dezvoltării lor: condiții de creștere artificială imperfectă sau anomalii genetice.
Cultura embrion este procesul de monitorizare a dezvoltării acestora, selectarea exemplarelor mai viabile și pentru a determina o zi mai propice pentru transferul lor către uter. Datorită mediului de dezvoltare pentru cultivarea acestei proceduri poate dura până la 4-6 zile. Până la sfârșitul acestei perioade implantarea cu succes a embrionului este cel mai probabil, în majoritatea cazurilor clinice.