Clasificarea mediilor de cultură - studopediya

Mediul natural sunt substraturi naturale (lapte, sânge, bilă, ser, cartofi). Artificiale conțin un amestec de substanțe și produse de descompunere acidă sau enzimatică organici naturali. mediile sintetice constau dintr-o bază de sare tampon și soluții de aminoacizi. hidrati de carbon. purine. pirimidină. nucleotide. nucleozide. acizi grași. vitamine exact așa cum prescris doze. Ca surse de azot, aminoacizi sunt utilizate în ele. Avantajul acestor medii este că acestea au o compoziție constantă, ele pot fi folosite pentru a determina cerințele microbiene ale anumitor nutrienți.

mediu nutritiv solid se prepară prin adăugarea sigiliului lichid. Deoarece sigiliul este utilizat în mod tipic agar. Agar - un produs derivat din alge marine, este o pulbere gălbuie sau placă cuprinde polizaharide cu masă moleculară mare. despicate majoritatea microorganismelor nu sunt distruse prin autoclavare, valoarea nutritivă a presei nu se schimbă, nu inhibă creșterea microbilor. Pentru câmpurile bacteriologice și imunologice utilizate refrigerate limpezite agar, care în timpul de fierbere sau autoclavare amestecul cu apă pulberea se topește la o temperatură de 85-100 ° C și cu răcire la 45-48 ° C a format un gel.

Pentru preparare, se adaugă solid cu agar mediu de cultură într-o concentrație de la 1,5 până la 3%.

mediu simplu.

Carne-peptonă (BCH) este o bază de proteine ​​din toate mediile.

Există mai multe modalități de a pregăti BCH:

a) în apă cu peptonă carne Ready - așa-numita carne-peptonă;

Carnea-peptonă agar-agar (MPA) - primesc trasee adauga la BCH Arap-Arapa (1,5-3%). Dacă MPA este distribuit pe tuburi sau flacoane diagonale - este înclinat. Pentru a obține tuburi pentru mediul de solidificare este lăsat într-o poziție înclinată. Dacă mediul este distribuit în tubul de înălțimea pe verticală de 5-7 cm, este coloana agar. IPA, înghețate în cutii Petri sub forma unei plăci - agar placă. Dacă mediul are o înălțime strat vertical de 2-3 cm și un strat diagonală de aceeași magnitudine este poluskoshenny agar.

medii de cultură speciale - mediu, care creează condiții pentru cultivarea bacteriilor care nu cresc pe suport simplu.

Sânge sau agar bulion de sânge - se obține prin adăugarea la mediul de cultură încălzit 5-10% steril de sânge de oaie defibrinat, cal iepure, om. Mediul este utilizat pentru izolarea streptococilor, pneumococilor si alte bacterii, precum și pentru studiul activității hemolitice.

Zer sau bulion de zer agar a fost preparată prin adăugarea un simplu mediu de 15-20% de cal sau din ser bovin. Miercuri folosit pentru a izola pneumococ, meningococ.

bulion fiere sau agar biliar a fost preparat prin adăugarea la mediul de cultură fierea medicale fără conservant sau proaspăt preparate de la bovine. Miercuri folosit pentru a evidenția tifoida, germen si dizenterie bastoane.

mediu special pentru cultivarea bacteriilor anaerobe: mediu Kitty Tarotstsi este compus din bulion nutritiv, glucoza și bucăți de ficat sau carne tocată pentru adsorbirea oxigen.

Gelatina - produs de proteine ​​animale de hidroliza parțială a colagenului. Aceasta ia forma unor plăci galben, incolore sau slab, fără gust și fără miros. În umfla de apă rece care absoarbe puternic de apă. La o temperatură de 30 ° C se dizolvă, sub răcire la 20-22 ° C, se transformă într-un gel (jelly). Utilizat în microbiologie pentru a studia enzime proteolitice.

mediile de diagnostic diferențial permit să se distingă o specie dintr-un alt microb. Principiul construcției de medii de diagnostic diferențiat pe diferite activități biochimice de bacterii. Structura media-diagnostic diferențial include mediul de bază, asigurând reproducerea bacteriilor, anumite substrat chimic, o atitudine diferită față de cea este indicator de diagnostic, schimbarea culorii indică extinderea substratului și formarea produselor acide.

Endo agar - mediu dens este folosit pentru izolarea și identificarea primară a Enterobacteriaceae. În compoziția sa include, pe lângă baza nutritivă, lactoză fucsină, bazic, sulfit și albite fosfat de sodiu. În mod corespunzător fierte incolor mediu sau are o nuanță ușor roz. Coloniile de bacterii (E. coli) care fermentează lactoza, pictat pe ea în roșu; bacteriile nu fermentează lactoza (salmonella) rămân incolore.

mediu Levin (agar laktozoeozinmetilenovy) - mediu pentru izolarea enterobacterii. Coloniile de bacterii laktozofermentiruyuschih vopsite in culoarea albastru inchis sau negru, colonii laktozootritsatelnyh de bacterii cresc in culoarea mediului (violet deschis).

mediu Hiss - un set de carbohidrați specifici pentru a studia activitatea enzimatică a bacteriilor și diferențierea lor pe aceste motive.

medii nutritive Elective conțin substanțe suplimentare care inhibă creșterea bacteriilor Gram-pozitive. mediu de cultură selectiv pentru a stimula dezvoltarea unor bacterii și inhibă creșterea altora. Condițiile selective sunt obținute prin adăugarea la substanțele chimice medii. Deoarece aceste medii bacterii patogene multiplica și se acumulează, de asemenea, denumite de îmbogățire a mediului.

Miercuri Ploskireva - mediu nutritiv dens, care conține săruri biliare, briliant verde, lactoză și indicator. Acest mediu nu este doar selectiv, deoarece inhibă creșterea multor germeni și contribuie la o mai bună creștere a agenților cauzali tifoidă, paratifoidă, dizenteria, dar, de asemenea, diagnosticul diferențial, ca laktozootritsatelnye bacterii formă (Shigella) pe coloniile incolore și lactoză - cărămidă roșie .

Selenitovaya mediu - este cel mai bun mediu pentru îmbogățirea Salmonella și germeni dizenterie Sonne. selenit de sodiu conținut în mediu stimulează creșterea acestor bacterii inhiba creșterea florei concomitente.

Miercuri Muller servește la acumularea de Salmonella. La mediul a fost adăugat cretă, soluție Lugol și hiposulfit de sodiu. În reacția acestor compuși cu tetrationat de sodiu se formează, care inhibă creșterea Escherichia coli, dar creează condiții favorabile pentru creșterea Salmonella.

Bismutul agar sulfit (mediu Blair-Wilson) - cuprinde o sare de bismut, verde strălucitor. Salmonella în creștere pe acest mediu sub formă de colonii de culoare neagră. Alte tipuri de creștere a bacteriilor pe acest mediu nu sunt permise.

agar vitelline-sare (VSA) - mediu pentru izolarea Staphylococcus, conține 10% clorură de sodiu, care inhiba majoritatea bacteriilor conținute în material. De asemenea, acest mediu este diagnosticul diferențial, deoarece prezența lecithinase gălbenușului de ou dezvaluie enzima (letsitovitellazu), care formează stafilococi patogene. scindează Lecithinase la lecitină fosforholiny și acizi grași insolubile în apă, cu toate acestea letsitinazopolozhitelnyh mediu în jurul coloniilor devin tulbure și zona opalescent apare ca un „curcubeu halo“.

Telluritovye mediu (telluritovy agar zer, sânge-agar telluritovy) - mediu selectiv pentru izolarea bacteriilor difteriei care contin telurit de potasiu. sare telur Incolor conținut în mediul, recuperarea bacteriilor la colonii de colorare difterie black metal.

Alkaline Agar elektivam pentru Vibrio cholerae, mediu de reacție alcalină (pH 9,0), nu a inhibat creșterea Vibrio cholerae, dar inhibă dezvoltarea altor microorganisme.

mediu decaparea - mediu conțin aditivi care împiedică multiplicarea microbilor și a morții, ceea ce contribuie la păstrarea viabilității acestora. Conservarea mediului sunt utilizate atunci când nu există nici o posibilitate de inoculare rapidă a mijloacelor de nutrienți.

Pentru bacterii, conservantii cel mai frecvent utilizate:

a) amestec de glicerol format din 0,5 l glicerol chimic pure și 1,0 litri de soluție salină;

b) amestec de borat;

c) amestec tampon fosfat.

Pentru conservarea pe termen lung a proaspăt izolate și culturi de producție sunt utilizate agar semisolid foame în mediu, la o capacitate redusă de a trăi produse metabolice microbiene se acumulează ușor, care promovează culturile de conservare bună.

mediu special.

In Bacteriologie larg utilizat mediu nutritiv uscat în producția industrială, care sunt pulberi higroscopice care conțin toate ingredientele mediului decât apa. Pentru prepararea lor utilizate compendii triptice produse nealimentare ieftine (deșeuri de pește, carne și oase, cazeina tehnice).

Ele sunt ușor de transportat, pot fi stocate pentru o lungă perioadă de timp, scuti laboratorul dintr-un vast proces de pregătire a mass-media, mai aproape de rezolvarea problemei standardelor media. Industria medicala produce un mediu uscat Endo, Levin Ploskireva, vismutsulfit, agar nutritiv, indicator de carbohidrați BP și altele.

Pentru cultivarea microorganismelor care utilizează termostate.

Termostat - acest aparat, menținut la o temperatură constantă. Aparatul este alcătuit dintr-o cameră încălzitor, pereți dubli, între care aerul sau apa este circulat. Temperatura este controlată termostat. Temperatura optimă pentru propagarea microorganismelor mai 37 ° C.

Metodele de preparare a plăcii de agar

IPA a fost topită într-o baie de apă, apoi se răcește la 50-55 ° C gât flacon tras lampă spirit flacără, vas petri deschis, astfel încât gâtul sticlelor a intrat fără a atinge marginile cupelor, turnat în 10-15 ml IPA ceașcă capac de închidere se agită, că mediul este distribuit uniform, sunt lăsate pe o suprafață orizontală înainte de întărire. După uscare ceașcă cu placă de agar este stocată în frig.

Ostuzhennoy buclă sterilă ia o picătură de stânga materialului dezvăluie o margine a cupei, făcând o buclă și interiorul marginilor opuse ale buclei face unele curse pe un singur loc, iar apoi se rupe de pe bucla de materiale lovituri insamantate paralele de la o margine a cupei celuilalt cu un interval de 5-6 mm. La începutul semănatului, atunci când microbii din bucla va fi mult, ei vor scurge creșterea, dar cu fiecare accident vascular cerebral de microbi în bucla, există mai puține, și ei vor rămâne singur și pentru a da colonii izolate.

Însămânțarea Drygalski metoda

Această metodă este utilizată atunci când materialul de însămânțare abundent colonizare microflora (puroi, scaun, spută). Pentru însămânțare prin metoda de Drygalski spatulă și să ia câteva cești (3-4). Spatula - instrument realizat dintr-un fir metalic sau o tuburi de sticlă de sticlă, pliat într-un triunghi sau în formă de L. Material buclă sau pipetat în prima ceașcă și spatula distribuite uniform pe suprafața mediului, cu aceeași spatulă, fără ardere prin ea, materialul este frecat în mediul de cultură, în al doilea pahar, și apoi - într-o a treia. Cu o astfel de cultură în prima ceașcă se va scurge creșterea și cupe ulterioare cresc colonii izolate.

Izolarea culturii pure de Schukevichu

Pentru însămânțare ia un mediu de cultură proaspăt preparată cu condensatul. Materialul de testat este preluat în buclă și aduceți-l ușor aseptic fără a atinge mediul și pereții din apa de condensare. Bacteriile cu mobilitate ridicată „crawl“ pe suprafața umedă a pantei.

Ca urmare a activității independente a studentului trebuie să știe:

1. Clasificarea morfologiei fungilor și metodele lor de studiu.

2. Clasificarea și morfologia actinomicete.

3. Regulile anti-regim și de siguranță.

1. diferenția microorganisme microscopie.

2. Preparatele Mikroskopirovat colorate.

3. decontaminate manipulează material preparate braț dezinfiruyuschimi.

4. Preparatele au fost preparate din culturi pure.