Evaluarea celulare citotoxicitate fenomen clasic de citotoxicitate

Classical citotoxicitate fenomen - capacitatea de limfom cu celule T fotsitov recunosc elementul care poartă străinătății caracteristici genetice (cum ar fi celulele modificate virus, celulele tumorale, celulele alogene si xenogene), și le distruge. Celulelor NK, spre deosebire de limfocitele T, recunosc celulele organismului ca străini care au pierdut antigenele complexului major de histocompatibilitate (MHC moleculă). Alte celule (de exemplu, limfocite B, celule monocite-macrofage, eozinofile, neutrofile, etc.) sunt de asemenea capabile de citotoxicitate, dar această funcție este legată de implicarea anticorpilor împotriva celulelor țintă - CM (dependentă de anticorpi citotoxicitatea celulară), citokine (TNF ) și alți agenți. În condiții fiziologice, adică în mod normal, citotoxicitatea celulelor imune îndreptate spre eliminarea și distrugerea celulelor senescente și deteriorate, oferind astfel clearance-ul dintr-un organism multicelular celule învechite și produsele lor de descompunere.

Celulele primare, citotoxice - instrumente grafice antigenspetsi- limfocitelor citotoxice (CTL), NK (celule killer naturale), precum și un număr de celule mieloide (macrofage, neutrofile).

Activitatea citotoxică a celulelor killer implementat de limfocite directe sinaptice de contact (efectoare kletki - CE) CM. In apoptoza indusă CM.

În mature granulele diferențiate de limfocite citotoxice formate conținând perforin și granzymes. După formarea sinapselor între CM și CE concentrat peleți din zona de contact și apoi sunt eliberate într-o direcție CM. Perforina în contact cu membrană polimerizat CM și încorporate în membrană, formând diametrul porilor acesta de circa 100 A. In acest moment penetra granzymes - enzime care initiaza apoptoza CM.

Inducerea apoptozei în CM poate apărea, de asemenea, prin intermediul moleculei CD95 (de asemenea, cunoscut sub numele de Fas), care conține un domeniu al morții. ligand CD95 ofera molecula FasL (CD178), exprimate pe CTL, celulelor NK. În unele cazuri de TBE au devenit ele însele o „victimă» apoptoza Fas-mediată. Exprimându-Fas-molecule, pot contact cu celule care poartă Fas-ligand, cum ar fi potytke depăși bariera hematoencefalică. Supraexprimarea molecule Fas (CD95) pe limfocitele activate care demonstrează capacitatea lor de a suferi apoptoza atunci când nesosto- yavshihsya procesele fiziologice ale proliferării și diferențierii Rovkov după activare. Se crede că un astfel de proces poate duce la un fenomen notat cu imunodeficiență cauzată de activarea (LV Koval'chuk Cheredeyev AN).

În sistemul in vitro, gradul de distrugere a CM mai aproape de liza. Metodele de evaluare a activității funcționale a CTL, există mai multe, dar „standardul de aur“ este încă considerat a fi „testul de crom“. Prin „crom“ se înțelege o sare de cromat de sodiu cu conținut de crom izotop radioactiv - Na251Cr04, care este utilizat pentru etichetarea CM. O astfel de etichetă empiric ca fiind relativ aleasă; îndeplinește următoarele criterii: pătrunde liber în celulele vii și nu ies până când celula este în viață. Eticheta nu intră în compuși stabili cu structuri intracelulare și este capabil să iasă în mediul extracelular de a muri KM.

Alegerea KM - o altă activitate de creație, care a rezolvat experimental, în conformitate cu obiectivele unei anumite investigații. Cea mai comună utilizare a KM tumorale sau celulele infectate viral. În cazul în care CM selectat diagrama în continuare experimentul este pe scurt după cum urmează.