Dezvoltarea și utilizarea de metode pentru a determina serotipului genotipuri virusului circulant

S.L.MUKOMOLOV * A.A.KOLOBOV ** I.A.SOZINA * M.LAPPALAYNEN *** E.A.KAMPE-NEMM ** N.V.ZHELEZNOVA * II Malkov * V.A.SHPEN **

aboratoriya hepatitei virale București Institutul Pasteur, * Laboratorul de Institutul de Cercetare a Biochimice pure ** peptide, Departamentul de Virusologie, Universitatea din Helsinki, Finlanda ***

Virusul hepatitei C (TOS) se referă la agenți patogeni cu heterogenitate extrem pronunțată a populației. Sa constatat ca pacientii cu HS cronice asociate cu diferite genotipuri ale virusului în moduri diferite de a satisface genotipuri interferonoterapiyu.Opredelenie HS important în studiile epidemiologice, deoarece permite transferul unui agent patogen bine documentat.

Pentru studiul de propagare a variantelor GS ale virusului în unele zone din România (București, Nijni Novgorod, Ufa, Belgorod) și țările vecine (Belarus, Kazahstan, Georgia) metoda serotipare am fost testate de seruri anti-NS4-pozitive obținute de la 474 de persoane, inclusiv 157 de donatori de sânge de 237 pacienți cu hepatită C, și 80 de persoane din grupele de risc (dependente de droguri intravenoase, pacienții cu cancer, pacienții din centre de hemodializă cronică, spitale tuberculoza, si altele.).

Rezultatele „orb“ testare 154 seruri cu genotipuri cunoscute ale virusului hepatitei C prin RFLP sunt prezentate în tabelul №1. In general, serotipirovano 148 probe (96,1%). sulf- meci completă și genotipurilor observate la 130 din 148 seruri (87,8%). Pentru genotipuri individuale, această cifră a fost diferită. Frecvența cea mai mare a rezultatelor potrivite observate pentru HCV-1 - (92,5%), cu un indice de dispersie de la 87,1% la subtipul 1b ser până la 100% pentru seruri cu subtipuri mixte 1a + 1c; pentru HCV-3 - 94,3% (toate tratate ser subtip 3a). Cel mai mic procent din coincidență a rezultatelor a fost observată la testarea pe seruri RFLP aparținând HCV-genotip 2 (80%). Când serotipizare 5 seruri sa constatat că pot fi atribuite genotip HCV-4. Cu toate acestea, atunci când se compară rezultatele cu potrivire de date RFLP a fost observată numai în 2 probe (40%).

Corelația înaltă a rezultatelor care determină genotipuri GS a primit două metode foarte diferite, permițând studiul serotipul variantelor virusului HS care circulă în anumite teritorii. Rezultatele acestei părți a studiului sunt prezentate pe scurt în Tabelul №2. In general, toate zonele studiate identificate genotipuri circulație 3 GS, în câteva cazuri, în cele patru regiuni genotipul HCV-4 definite. Cel mai adesea determinat genotip HCV 1 (de la 47,1% în seruri de la Georgia la 74,4% - din Belarus). Pe locul al doilea clasament privind rata de detectie a ocupat aproape toate domeniile HCV-genotip 3 (15,5% în seruri din Belarus până la 34,0% - de la Nijni Novgorod). Mult mai puțin studiate ser conțin tip specific anti-NS4 HCV-2. Frecvența maximă de detecție a acestui genotip a fost stabilit în serul Belarus (12,7%), Kazahstan (13,7%) și minimum - în seruri de la București (3,8%). In 35 seruri din toate regiunile studiate, cu serotipare a stabilit prezența anticorpilor anti-NS4 genotipuri diferite (genotipuri mixte). Cea mai mare proporție de seruri cu genotipuri mixte în probele efectuate au fost determinate HCV-1 și HCV-3 (26 de 35-74.3%), în același timp, adică cele mai frecvente genotipuri. Alte variante de combinații sunt mult mai rare - HCV-1 + 2-VHC (8,6%), HCV-2 + HCV-3 (11,4%). HCV-1 + HCV-4 în combinație a relevat două seruri din Georgia (5,7%).

Materialele prezentului studiu sugerează că utilizarea de peptide sintetice corespunzătoare determinanții antigenici ai proteinelor nestructurale NS4, ca principală componentă immunosorbent ELISA poate detecta cu succes genotipuri ale virusului in serul GS infectat cu agentul cauzator al oamenilor și să monitorizeze patogen genovariants circulație în regiuni.

Tabelul 1. SOPOSTAVLENIE PEZULTATOV GENOTIPURI PENTRU DETERMINAREA VIPUSA GEPATITA C METODAMI RFLP ȘI SEPOTIPIPOVANIYA