Ap №4

Ufa, BSAU, Departamentul de Boli Infecțioase,

zoogigieny și vetsanekspertizy

LABORATOR DE LUCRU № 4

Acoperirea capsulei și microorganisme care formează spori. Determinarea motilității microbiene.

Scopul instruirii. Aflați metodele de bază de vopsire a litigiilor. Examinați tipurile de microbi, în funcție de locația flagella. Se determină mobilitatea microorganismelor.

Materiale si echipamente. Culturile bacillus fân, lame de sticlă, lamele de sticlă cu o lune, ochelari de acoperire, microscoape, tampoane cu vopsele, ulei de imersie, bumbac tampoane cu alcool medicinal.

Colorarea disputa. Toate metodele de colorare litigiului se bazează pe furnizarea de penetrarea colorantului prin dispute cutanate achromophilous. Prin urmare, mordant utilizat.

litigiu colorat Zlatogorovu. Pe frotiul fix aplicat:

Carbolină magenta, colorant timp de 5-10 minute.

Soluție de acid sulfuric 2% se menține timp de 2-3 secunde.

O soluție de albastru de metilen colorate timp de 3-5 min.

Frotiuri: controverse forme vegetative roșu - albastru.

Acoperirea capsulelor. corpul celulei microbiene este acoperit cu un strat liber de mucus. În unele specii de microorganisme, acest strat este în curs de dezvoltare foarte puternic și apoi a numit-o capsulă.

Capsula - coajă pentru mucoase strat, o substanță mucinei, polizaharida moleculară mare, care este sintetizat în citoplasmă și secretată la suprafața peretelui celular (învelișul exterior este derivat strat).

Prezența capsulei este un indicator important de diagnostic în identificarea agenților patogeni și diferențierea anumitor infecții (antrax, pneumonia pneumococică, etc.). Microorganisme patogenice formează capsula în organismul infectat. Acesta este un factor de virulență și protejează celula bacteriană prin fagocitoză și acțiunea bactericidă a serului. Dimensiunile lor sunt de multe ori mai mari decât corpul celulelor microbiene. Compoziția chimică capsule neomogene: unele dintre ele constau dintr-un complex de proteine, altele - polizaharide. Capsula și restul celulelor sunt colorate diferit: primul deoarece servește ca o protecție, și este adesea găsit în microorganismele patogene.

Există mai multe metode de colorare capsulă.

substanța capsular este prost colorată. De aceea, atunci când se prepară o formulare de capsulă pentru detectarea următoarelor reguli:

Un frotiu este preparat din material proaspăt, ca și capsula lizată repede.

fixa chimic frotiu, cerneala metahromoticheskie utilizată pentru vopsirea, adică în timpul utilizării, citoplasmă care este colorat într-o singură culoare și capsula - în cealaltă;

Clătiți cu apă, frotiu ar trebui să fie ușoară și de scurtă durată

Acoperirea capsulelor Mihin. Pe frotiul fix aplicat:

Metilen Albastru Loeffler (mai bună decât soluția veche), colorate timp de 2-3 minute. când încălzirea.

Se spală cu apă și se usucă.

Frotiuri: corpul de celule microbiene în albastru închis, capsula - roz deschis.

Acoperirea capsulelor Olten. Pe frotiul fix aplicat:

Fresh fierbinte 2% pata soluție safranina timp de 5-7 minute.

clătiți rapid cu apă și uscat.

Frotiuri: corpul celular este vopsit în culoarea roșu-cărămidă, capsulă - galben-portocaliu.

Determinarea motilității microbiene

În modurile autorităților de transport în mișcare sunt flagele, care efectuează mișcări de rotație. Amplasarea lor pe corpul diferitelor celule microbiene. Flageli sunt de lungimi diferite. Diametrul lor este atât de mică încât nu sunt vizibile în lumina microscopului (sub 0,2 microni). Diferite grupuri de bacterii numărul și locația flagella diferit. Flageli culori percep rău. Metodele de colorare complex distorsioneze formă flageli autentic, astfel încât, în laboratoarele de colorare flageli nu efectuate, iar bacteriile testate într-o stare de viață.

În funcție de locația și numărul de microorganisme subcompartimentarea flageli (Figura 5):

a) monotrihi - microorganisme având pe unul dintre polii de o flagellum. Aceasta este bacteria mai motile, mișcarea activă, translațională (Pseudomonas);

b) lofotrihi - microorganisme având pe unul dintre polii fasciculului flageli mișcare activă, de translație (monocytogenes);

c) amfitrihi - microorganisme având flagele la ambii poli celule microbiene se deplasează aleator;

g) peritrichous - microorganisme ale căror flageli sunt dispuse pe toată suprafața celulei, mutați aleatoriu (E. coli).

Figura 5 aranjament tipurilor flageli de bacterii

Pentru a determina motilitatea bacteriilor este necesar să se utilizeze o cultură a nu mai mult de o zi-vechi, ca vechile culturi pierd capacitatea de a muta. Cercetarea realizată prin prepararea unei concasat sau picături suspendate.

„Hanging picătură“ metoda. picătură agățat este pregătită cu o degajare pe lamă (semilună). lune Edge unse cu un strat subțire de petrolatum și aplicată unui număr de microorganisme lamelă de sticlă. În cazul în care acestea sunt cultivate într-un mediu lichid, luând o picătură de cultură dacă o densă, mai întâi pe foaia de sticlă se aplică o picătură de soluție izotonică de clorură de sodiu, și apoi cultura microbilor. Manivela lamelă de sticlă de pe 180i coborâte cu grijă pe capac, astfel încât scăderea a fost în centrul degajării, după care acesta este returnat în poziția sa inițială. Acest preparat este suspendat de picături cu suprafața interioară a sticlei de acoperire și depozitate într-o cameră umedă sigilată Aceasta permite să observe mișcarea microbilor pentru un timp prelungit. Medicamentul este considerat un câmp întunecat ușor (deschidere îngustă) care mărește contrastul formelor necolorate.

Metoda de „picătură de bara“. O picătură de suspensie bacteriană este aplicată la o lamă de microscop convențional și se acoperă cu grijă, cu un capac de sticlă și apăsați ușor cu degetul. Microscopie a fost efectuat, precum și în metoda „agățat picătură“.

1 Tehnica de colorare MIKHIN.

2 Tehnica de colorare Olten.

3 Tehnica de colorare Zlatogorovu.

4 Se prepară medicamente zdrobite și agățat picătură.

Întrebări pentru auto-cunoaștere

Ce este o dispută?